細胞濃縮液的制造方法以及細胞懸濁液處理系統的制作方法_3

            文檔序號:9650222閱讀:來源:國知局
            [0115]3)在連接了細胞懸濁液處理器的細胞濃縮液回收口與回收容器的情況下,該連接的路徑成為回收路徑。
            [0116]回收路徑為上述任一種方式即可,也能夠將兩種以上并用。
            [0117](注入路徑)
            [0118]注入路徑是用于向上述存積容器的溶液入口注入溶液的路徑。作為構成注入路徑的管,能夠使用一般的塑料制的管,其中,從安全性、耐久性的方面考慮能夠優選使用氯乙烯制的管。
            [0119]此外,本發明所言的溶液,除了細胞懸濁液,還包括用于將濃縮細胞懸濁液而得的細胞濃縮液再次稀釋的稀釋液、用于在濃縮處理前對細胞懸濁液處理系統整體進行預充的預充液。
            [0120]用于本發明的稀釋液可舉出生理鹽水、輸液、蒸餾水、緩沖液、培養基、血漿、包括無機鹽、糖類、血清、蛋白質的液體等,特別是從安全性的觀點考慮優選能夠使用生理鹽水、輸液。另外,預充液也可舉出生理鹽水、輸液、蒸餾水、緩沖液、培養基、血漿、包括無機鹽、糖類、血清、蛋白質的液體等,特別是從安全性的觀點考慮能夠優選使用生理鹽水、輸液。本發明中稀釋液以及預充液可以使用相同的溶液,也可以使用不同的溶液。在使用不同的溶液的情況下,能夠從處于與存積容器的溶液入口連接的回路上的分支部分分離,設置連結于各連接部的回路。
            [0121]另外,與上述存積容器的溶液入口連接的注入路徑的另一個端部成為細胞培養袋用、稀釋液袋用或者預充液袋用的連接部。
            [0122]細胞培養袋連接部只要是能夠與用于細胞培養的袋連接的形狀,能夠無特別限制地使用瓶針、魯爾公接頭、魯爾母接頭、鎖連接等。
            [0123]稀釋液袋連接部或者預充液袋連接部只要是能夠與存積稀釋液或者預充液的袋連接的形狀,能夠無特別限制地使用瓶針、魯爾公接頭、魯爾母接頭、鎖連接等。
            [0124]另外,優選在上述注入路徑設置有用于對液體進行輸送的栗。通過栗能夠穩定地向存積容器輸送液體。另外,設置栗的位置處于將連接于細胞培養袋連接部、稀釋液袋連接部以及預充液袋連接部的回路的合流位置與溶液入口連結的回路上,這樣能夠減少送液所需要的栗的個數,從而優選。
            [0125](檢測單元)
            [0126]檢測單元是用于對上述存積容器內或者循環回路的導入用連通管內的細胞濃縮液的液量進行檢測的單元。
            [0127]作為檢測上述存積容器內的液量的單元,可舉出使用直接檢測存積容器內的存積液的液面的氣泡傳感器。
            [0128]另外,作為其他實施方式,也可以例如以在上下方向與存積容器平行的方式設置管,成為在下方將存積容器與管連通的回路,以管內的液面與存積容器內的液面相等的方式進行調整,在該管設置氣泡傳感器。若存在該單元,則能夠通過氣泡傳感器來檢測管內的液面來作為存積容器內的液面。
            [0129]另外,也可以在與存積容器平行地設置的上述管的下方設置腔室。特別是通過設置內徑比管大的腔室,能夠期待減少向平行設置的管誤浸入氣泡而被檢測出的故障的產生。
            [0130]作為檢測上述導入用連通管內的細胞濃縮液的液量的手段,可舉出在與存積容器的循環入口連通的導入用連通管具備氣泡傳感器。若為該方式,則與檢測上述存積容器內的液量的手段相比,能夠進一步濃縮細胞懸濁液,因此能夠減少被濃縮的懸濁液(細胞濃縮液)的量,從而具有能夠降低懸濁液中的不需要的成分的量之類的優點。
            [0131]另外,作為設置于上述導入用連通管的氣泡傳感器的位置,沒有特別限定,通過設置于接近存積容器的位置,能夠將連接存積容器與氣泡傳感器的回路的長度縮短。
            [0132]另外,本發明的細胞懸濁液處理系統中,也可以在與存積容器的溶液入口連接的注入路徑設置氣泡傳感器。在利用該氣泡傳感器檢測出氣泡的情況下能夠停止細胞懸濁液、稀釋液、預充液等溶液朝存積容器的存積。例如,具有即使不知道作為對象的細胞懸濁液的處理量,通過將上述氣泡傳感器設置于注入路徑,也能夠不用每次處理都設置栗的驅動時間而處理對象的液體全部量的優點。另外,也能夠成為從栗的驅動時間開始加入固定量的溶液的工序。例如,在需要僅處理細胞懸濁液的一部分的情況下,通過設定栗的驅動時間能夠進行處理。該氣泡傳感器能夠設置于注入路徑的任意位置,但在減少向注入路徑內的殘留液量的點上,設置于盡量靠近存積容器的位置是有利的。
            [0133]另外,也可以在上述存積容器的上部設置其他的氣泡傳感器。通過設置該氣泡傳感器,能夠辨別存積容器內的上部附近的溶液的有無。即,在供給了超過存積容器的容量的液體的情況下,上述傳感器進行檢測,能夠作為警報向使用者通知。
            [0134]用于本發明的細胞懸濁液處理系統的栗、氣泡傳感器使用一般使用的部件。另外,也能夠在回路的所希望的位置設置夾具來進行流路的切換。作為這些栗、氣泡傳感器以及夾具,沒有特別限定,例如也能夠使用用于透析裝置等的部件。
            [0135]細胞懸濁液處理系統中,通過上述檢測單元檢測出細胞濃縮液濃縮至規定的液量,通過使細胞濃縮液從上述存積容器朝細胞懸濁液處理器的輸送停止的控制單元,使濃縮結束。
            [0136]在如本發明那樣使用細胞懸濁液處理器進行細胞懸濁液的濃縮的情況下,若空氣朝細胞懸濁液處理器進入則不只是濃縮能力降低,還存在回收細胞時在細胞懸濁液處理器內附著細胞等,使細胞的損失大幅度增加的問題。作為判斷濃縮工序的結束時刻的手段,可以考慮預先確定朝細胞懸濁液處理器的送液量、從細胞懸濁液處理器廢棄的廢液量的方法。然而,實際上即使對細胞懸濁液處理系統的回路、路徑上所設置的栗的送液量等進行調整,根據細胞懸濁液的濃度、細胞的大小、細胞的種類等,在細胞懸濁液處理器的濃縮的程度也不固定,從而有時進行濃縮直至還有空氣進入細胞懸濁液處理器內為止,因此進行濃縮的期間需要監視細胞懸濁液處理器的狀態,造成自動化困難的狀況。
            [0137]與此相對地,本發明中,使用上述檢測單元判斷細胞懸濁液的濃縮工序的結束,從而無論細胞懸濁液的狀態等如何,均能夠不會使空氣進入細胞懸濁液處理器內地高精度地得到充分濃縮的細胞濃縮液。
            [0138]以下,基于圖例示出細胞懸濁液處理系統的例子。
            [0139]圖1是本發明所使用的細胞懸濁液處理系統A的一實施方式,示出具有用于檢測循環回路的導入用連通管內的細胞濃縮液的液量的檢測單元的系統的回路圖。
            [0140]圖1的細胞懸濁液處理系統A具有前端進行了分支的注入路徑27。分支的各個端部成為細胞培養袋連接部1以及稀釋液袋連接部2。在比細胞培養袋連接部1以及稀釋液袋連接部2更靠存積容器3側的注入路徑27分別設置有夾具22、21,通過開閉夾具22、21能夠進行從細胞培養袋連接部1或者稀釋液袋連接部2朝存積容器3供給的溶液的切換。
            [0141]另外,在比分支部分更靠存積容器3側的注入路徑27設置有栗12,通過調整其驅動速度能夠調整上述溶液朝存積容器3的供給量。
            [0142]在比上述栗12更靠存積容器3側的注入路徑27設置有氣泡傳感器10。若供給的溶液消失而氣泡傳感器10檢測出進入了注入路徑27的空氣,則通過停止栗12能夠在最佳的時機停止上述溶液朝存積容器3的供給。另外,通過將上述栗12與氣泡傳感器10電連接,能夠自動地調整溶液的供給。
            [0143]注入路徑27的另一端與處于存積容器3的下部的溶液入口 15連接。
            [0144]在存積容器3的下部除了上述溶液入口 15之外,還配置有循環出口 16、循環入口17,在存積容器3的上部以使存積容器3的內部成為大氣壓的方式具備空氣過濾器8。另夕卜,在從存積容器3直至空氣過濾器8的路徑以能夠檢測出供給了存積容器3的容積以上的溶液的方式設置有氣泡傳感器9。該氣泡傳感器9與上述栗12電連接,從而能夠自動地停止溶液的供給。
            [0145]上述循環入口 17經由導入用連通管28而與細胞懸濁液處理器6上部的細胞懸濁液導入口 18連接。在導入用連通管28設置有氣泡傳感器11,在比該氣泡傳感器11更靠細胞懸濁液處理器6側的位置設置有栗13。通過驅動栗13,能夠將存積容器3內的溶液朝細胞懸濁液處理器6供給。而且,在從存積容器3朝細胞懸濁液處理器6供給的溶液消失的情況下,若氣泡傳感器11檢測出進入了導入用連通管28的空氣,則能夠停止栗13能夠在最佳的時機停止溶液的供給而不會使空氣進入細胞懸濁液處理器6內。另外,通過將上述栗13與氣泡傳感器11電連接,能夠自動地調整溶液的供給。
            [0146]在上述細胞懸濁液處理器6內填充有中空纖維分離膜(未圖示)。從上述細胞懸濁液導入口 18供給的細胞懸濁液在通過上述中空纖維分離膜時將液體分離。被分離的液體從設置于細胞懸濁液處理器6的上部側面的濾液用出口 20排出。
            [0147]上述濾液用出口 20經由配管與廢液容器4連接,在該配管設置有促進濾液的排出與在上述中空纖維分離膜的濃縮的栗14。
            [0148]處于細胞懸濁液處理器6下部的細胞懸濁液導出口 19經由導出用連通管29與上述循環出口 16連接。另外,在導出用連通管29設置有夾具23,通過開閉夾具23能夠調整通過細胞懸濁液處理器6濃縮了的細胞濃縮液向存積容器3的循環。
            [0149]另外,上述導入用連通管28與導出用連通管29成為在存積容器3以及細胞懸濁液處理器6之間使細胞懸濁液、細胞濃縮液循環的循環回路30。
            [0150]在比上述夾具23更靠細胞懸濁液處理器6側的導出用連通管29設置有分支部,該分支部與回收容器5經由回收路徑31連接。在回收路徑31設置有夾具24。該夾具24在如上述那樣進行使用了循環回路30的循環?濃縮的期間關閉。而且,在回收細胞濃縮液的情況下,通過打開夾具24能夠朝回收容器5供給細胞濃縮液。
            [0151]另外,圖2是本發明所使用的細胞懸濁液處理系統A’的另一實施方式,并示出具有用于檢測存積容器內的細胞濃縮液的液量的檢測單元的系統的回路圖。
            [0152]圖2所示的細胞懸濁液處理系統A’中,注入路徑27除了細胞培養袋連接部1、稀釋液袋連接部2之外還具有預充液袋連接部26。預充液袋連接部26成為在比稀釋液袋連接部2更靠存積容器3側的注入路徑27設置的分支部的另一端。在預充液袋連接部26與上述分支部之間設置有夾具25,通過開閉該夾具25能夠調整預充液朝存積容器3的供給。
            [0153]另外,在比設置于注入路徑27的氣泡傳感器10更靠存積容器3側的位置設置有其他分支部,通過設置使該分支部與存積容器3的上部連通的回路32,從而,在溶液裝滿存積容器3內的情況下,通過注入路徑27而存積容器3內的液面與回路32內的溶液的液面成為平行。而且,在回路32的所希望的高度設置氣泡傳感器9a,從而與在存積容器3直接設置氣泡傳感器的情況下需要檢測范圍大的氣泡傳感器相比,檢測回路32內的液面的范圍小,而通過緊湊的氣泡傳感器也能夠檢測存積容器3內的溶液的液面。
            [0154]另外,本發明中,進行濃縮時,通過設置于導入用連通管28的栗13使細胞懸濁液等在上述存積容器3與細胞懸濁液處理器6之間循環,但若回路32與導入用連通管28連結,則存在由于栗13的脈動的影響而通過回路32上的氣泡傳感器9a也難以進行正確的液面的測定的趨勢。
            [0155]與此相對地,如上述那樣在作為與導入用連通管28不同的其他路徑的注入路徑27連接回路32,從而也具有能夠將回路32的液面作為存積容器3內的液體的液面而正確地測定的優點。
            [0156]構成回路32的管能夠使用細口徑的部件,從而能夠抑制液面的搖晃,但口徑沒有特別限定。
            [0157]另外,也可以在上述回路32的比上述氣泡傳感器
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