°C冷凍0. 5h，50°C加熱lh，凍融循環重復次數為2次。
[0035] 實施例3 :脂質體人工皮膚膜的制備
[0036] 與實施例1不同的是，步驟（1)中稱取卵磷脂300mg和膽固醇300mg置于前形瓶， 用8ml無水乙醇溶解，用旋轉蒸發儀除去溶劑，成膜。成好的膜置于真空干燥箱過夜除去殘 余溶劑。加入含10%乙醇的磷酸鹽緩沖溶液8ml水合，得到脂質體混懸液。步驟（4)中凍 融循環條件為，_70°C冷凍lh，75°C加熱0. 5h，凍融循環重復次數為3次。
[0037] 實施例4 :脂質體人工皮膚膜的制備
[0038] 與實施例1不同的是，步驟（1)中稱取卵磷脂480mg和膽固醇60mg置于前形瓶， 用20ml無水乙醇溶解，用旋轉蒸發儀除去溶劑，成膜。成好的膜置于真空干燥箱過夜除去 殘余溶劑。加入含15%乙醇的磷酸鹽緩沖溶液15ml水合，得到脂質體混懸液。步驟（4)中 凍融循環條件為，_90°C冷凍0. 5h，70°C加熱lh，凍融循環重復次數為2次。
[0039] 實施例5 :脂質體人工皮膚膜的制備
[0040] 與實施例1不同的是，步驟（1)中稱取卵磷脂400mg和膽固醇IOOmg置于前形瓶， 用16ml氯仿-甲醇（2:1)溶解，用旋轉蒸發儀除去溶劑，成膜。成好的膜置于真空干燥箱 過夜除去殘余溶劑。加入含15%乙醇的磷酸鹽緩沖溶液15ml水合，得到脂質體混懸液。步 驟（4)中凍融循環條件為，-70°C冷凍lh，70°C加熱lh，凍融循環重復次數為3次。
[0041] 實施例6 :脂質體人工皮膚膜的制備
[0042] 與實施例1不同的是，步驟（1)中稱取卵磷脂600mg置于前形瓶，用12ml無水乙 醇溶解，用旋轉蒸發儀除去溶劑，成膜。成好的膜置于真空干燥箱過夜除去殘余溶劑。加入 含15%乙醇的磷酸鹽緩沖溶液12ml水合，得到脂質體混懸液。步驟（4)中凍融循環條件 為，-90°C冷凍0. 5h，55°C加熱0. 5h，凍融循環重復次數為3次。
[0043] 實施例7 :脂質體人工皮膚膜的制備
[0044] 與實施例1不同的是，步驟（1)中稱取卵磷脂500mg置于茄形瓶，用8ml氯仿-甲 醇（2:1)溶解，用旋轉蒸發儀除去溶劑，成膜。成好的膜置于真空干燥箱過夜除去殘余溶 劑。加入含5%乙醇的磷酸鹽緩沖溶液8ml水合，得到脂質體混懸液。步驟（4)中凍融循環 條件為，_70°C冷凍lh，75°C加熱0. 5h，凍融循環重復次數為2次。
[0045] 實施例8 :脂質體人工皮膚膜的制備
[0046] 與實施例1不同的是，步驟（1)中稱取卵磷脂400mg置于前形瓶，用15ml無水乙 醇溶解，用旋轉蒸發儀除去溶劑，成膜。成好的膜置于真空干燥箱過夜除去殘余溶劑。加入 含10%乙醇的磷酸鹽緩沖溶液12ml水合，得到脂質體混懸液。步驟（4)中凍融循環條件 為，-120°C冷凍0. 5h，55°C加熱0. 5h，凍融循環重復次數為3次。
[0047] 實施例9 :脂質體人工皮膚膜的制備
[0048] 與實施例1不同的是，步驟（1)中稱取卵磷脂700mg置于前形瓶，用15ml無水乙 醇溶解，用旋轉蒸發儀除去溶劑，成膜。成好的膜置于真空干燥箱過夜除去殘余溶劑。加入 含10%乙醇的磷酸鹽緩沖溶液12ml水合，得到脂質體混懸液。步驟（4)中凍融循環條件 為，-90°C冷凍lh，75°C加熱0. 5h，凍融循環重復次數為3次。
[0049] 實施例10 :脂質體人工皮膚膜的制備
[0050] 與實施例1不同的是，步驟（1)中稱取卵磷脂400mg，膽固醇100mg，膽固醇硫酸酯 20mg，神經酰胺60mg，棕櫚酸200mg，置于前形瓶，用15ml無水乙醇溶解，用旋轉蒸發儀除去 溶劑，成膜。成好的膜置于真空干燥箱過夜除去殘余溶劑。加入含10%乙醇的磷酸鹽緩沖 溶液12ml水合，得到脂質體混懸液。步驟（4)中凍融循環條件為，-80°C冷凍0.5h，65°C加 熱0. 5h，凍融循環重復次數為2次。
[0051] 實施例11 :脂質體人工皮膚膜的制備
[0052] 與實施例1不同的是，步驟（1)中稱取卵磷脂800mg，膽固醇100mg，膽固醇硫酸酯 20mg，神經酰胺60mg，棕櫚酸200mg，置于前形瓶，用IOml氯仿-甲醇（2:1)溶解，用旋轉蒸 發儀除去溶劑，成膜。成好的膜置于真空干燥箱過夜除去殘余溶劑。加入含15%乙醇的磷 酸鹽緩沖溶液IOml水合，得到脂質體混懸液。步驟（4)中凍融循環條件為，-70°C冷凍lh， 50°C加熱0. 5h，凍融循環重復次數為2次。
[0053] 實施例12 :脂質體人工皮膚膜的制備
[0054] 與實施例1不同的是，步驟（1)中稱取卵磷脂100mg，膽固醇100mg，膽固醇硫酸酯 20mg，神經酰胺60mg，棕櫚酸200mg，置于前形瓶，用20ml氯仿-甲醇（2:1)溶解，用旋轉蒸 發儀除去溶劑，成膜。成好的膜置于真空干燥箱過夜除去殘余溶劑。加入含5%乙醇的磷酸 鹽緩沖溶液20ml水合，得到脂質體混懸液。步驟（4)中凍融循環條件為，-KKTC冷凍0.5h， 55°C加熱lh，凍融循環重復次數為3次。
[0055] 實施例13 :脂質體人工皮膚膜的制備
[0056] 與實施例1不同的是，步驟（1)中稱取卵磷脂500mg，膽固醇100mg，膽固醇硫酸酯 20mg，神經酰胺60mg，棕櫚酸200mg，置于前形瓶，用12ml無水乙醇溶解，用旋轉蒸發儀除去 溶劑，成膜。成好的膜置于真空干燥箱過夜除去殘余溶劑。加入含12%乙醇的磷酸鹽緩沖 溶液IOml水合，得到脂質體混懸液。步驟（4)中凍融循環條件為，-80°C冷凍lh，65°C加熱 lh，凍融循環重復次數為3次。
[0057] 實施例14 :脂質體人工皮膚膜在體外透皮試驗中的應用。
[0058] 脂質體人工皮膚膜按實施例1方法制備。
[0059] (1)滲透裝置，選用改良Franz擴散池，TK-12D型透皮擴散試驗儀，擴散面積為 3. 14cm2。
[0060] (2)接受液的制備：20%乙醇水溶液（v/v)。
[0061] (3)模型藥物的選擇：本發明選用了 5個具有不同理化性質的模型藥物，分別為芍 藥苷、芍藥內酯苷、阿魏酸、四氫非洲防己堿、延胡索乙素。這5個模型藥物的性質參見表1， 將這5個成分按照一定的比例（14:31:12:1:1)溶解在20%乙醇水溶液中，制備成供給液。
[0062] 表1模型藥物性質
[0064] (4)體外透皮試驗：將脂質體人工皮膚膜夾在Franz擴散池上，有脂質體的一面朝 上。加入一定體積的接受液，置于透皮擴散試驗儀中，37°C恒溫水浴，用磁力攪拌500rpm， 平衡30min，除去氣泡；在供給室中加入2ml的供給液，分別于0、l、2、4、6、8、10、12h吸取 0. 2ml接受液，用HPLC法測定接受液中藥物的濃度用HPLC法測定接受液中藥物的濃度，并 計算各個時間點的單位面積透過量。
[0065] (5)除脂質體人工皮膚膜外，同時以大鼠皮和市售Strat-M人工皮膚膜（默克密理 博（Merck Millipore)公司）按照上述步驟（1)~（4)所述的步驟進行體外透皮試驗，作 為對照。
[0066] 體外透皮曲線結果見圖2,橫坐標為透過時間、縱坐標為單位面積透過量，從中可 以看出本發明制備的脂質體人工皮膚膜比市售人工皮膚膜（Strat-Μ膜）更接近大鼠皮的 透過結果。表2的結果比較了 5種不同性質成分通過人工皮膚膜與大鼠皮的相關系數，即 將某一時間點通過脂質體人工皮膚膜或市售人工皮膚膜（Strat-M膜）的單位面積透過量 與同一時間點通過大鼠皮的單位面積透過量進行相關并計算相關系數，可見，與市售人工 皮膚膜相比脂質體人工皮膚膜與大鼠皮的相關系數更高，透皮效果更加接近。
[0067] 以上結果說明本發明制備的脂質體人工皮膚膜可以代替真實皮膚進行體外透皮 實驗。
[0068] 表2五種成分通過兩種人工皮膚膜分別與通過大鼠皮的單位面積透過量的相關 系數
[0069]
[0070] 實施例15 :脂質體人