8] 由 WaterLOGSY NMR 光譜量測結果中，可發現在 δ H 5. 55 (H-l)、3. 36、3. 28 及 3. 13(為化合物A的糖質子H-2'~H-5'的吸收訊號）均有正向訊號，顯示化合物A可與 GLP-1受體蛋白質的胞外區域產生作用。
[0079] 實施例三：化合物對于cAMP的影響
[0080] 將BRIN-BD11細胞以胰蛋白酶取下置于KRBB溶液中，種至384孔盤，每孔密度為 4000個細胞/10 μ 1，之后再加入相同體積、內含IBMX(lmM)的化合物Α(200 μΜ、400 μΜ、 800 μΜ)，靜置于37°C下培養60分鐘。之后，加入10μ1的HTRF cAMP dynamic 2套組 (Cisbio, Bedford, USA)的試劑至每孔之中，在室溫下靜置一個小時。另依照套組說明書制 備標準品。最后，利用SpectraMax M5系統（Molecular Device)中預設的程式，讀取微量 多孔盤中的樣品及標準品，結果如圖3所示，其中數據代表平均值土SEM(n = 3)，*P〈0. 05， 相較于載體組（〇)。
[0081 ] 實施例四：化合物于去敏化條件下對于胰島素分泌細胞BRIN-BD11的活性測試
[0082] 根據前人已發表的去敏化作用（Green et. al (2〇〇1)· Function of a long-te rm, GLP-1-treated, insulin-secreting cell line is improved by preventing DPP IV-mediated degradation of GLP-1. Diabetes, obesity &metabolism 7, 563-569)，利用 乙酰化GLP-1對GLP-1的作用進行去敏化，之后再于GLP-1受體拮抗劑（exendin 9-39)存 在和不存在的條件下加入化合物A進行刺激，以評估不同條件下的胰島素分泌狀況，結果 如圖4A至圖4C所示。
[0083] 實施例五：化合物對于第二型糖尿病小鼠（db/db mice)的療效
[0084] 以瘦素受體（leptin receptor)突變的 05713]^(3/]-1^口<111同型合子（db/db)小鼠 做為實驗組，將空腹血糖大于400mg/dl、葡萄糖耐受性不良的12周齡db/db小鼠分成三組， 另一方面將同齡的C57BLKS/J-Lep db/+異型合子（db/m)小鼠作為無糖尿病的對照組。每組 以口服的方式分別給予蒸餾水（dH20)、150mg/kg化合物A或300mg/kg化合物A，為期4周。 結束之后，測量下列生理參數：(A)體重、（B)每日攝食量、（C)空腹血糖值、（D)糖化血紅蛋 白百分比（HbAlc% )、（E) 口服葡萄糖耐受性測試（0GTT)、（F)血清三酸甘油酯及（G)血清 總膽固醇，結果如圖5A至圖5G所示。
[0085] 實施例六：化合物對于糖尿病小鼠的療效
[0086] 經過4周施予蒸餾水或不同濃度的化合物A(150mg/kg、300mg/kg)后，收集各組 db/db小鼠的空腹血清樣本，量測其胰島素濃度。以下式計算胰島素阻抗指數（H0MA-IR): 胰島素（μυ/ml) X葡萄糖（mM)/22. 5 ;并以下式計算β細胞功能指數（Η0ΜΑ-Β% ) :20X 胰島素（yU/ml)/[葡萄糖5]，結果如圖6A、圖6B所示。
[0087] 據此，于前述說明中，發明人已充分描述關于特定實施例及實例的概念。然應了解 的是，本領域具有通常知識的技術人員可在不偏離權利要求的范疇下進行各種變化、改變 及修飾。因此，于解讀權利要求時，應將本發明的說明以說明性而非限制性的方式作為參 考，且前述各種變化、改變及修飾均應涵蓋于本發明的范圍內。
[0088] 此外，本文所述各實施例中的某些特征，亦可以組合的方式于單獨實施例中加以 提供，且各別實施例亦可分別提供或以任何次組合的方式提供之。此外，范圍內描述的相關 數值應包括所述范圍內的每個數值。
【主權項】
1. 一種式（I)化合物或其醫藥上可接受的鹽類、酯類或立體異構物： 其中，札為c 醛基；C 羧基；C 6-(；。芳基胺基C 烷基，其中該芳基視情況經一或多個 羥基、Ci-Q烷基或C 烷氧基取代；C「C6烷基羰基乙烯基或C 烷氧基羰基乙烯基； R2為哌喃葡萄糖基或Η ; 為單鍵或雙鍵；且 其中，式（I)化合物不包括： (IS, 4aS，7R，7aR) -7-甲基-1- (((2S，3R，4S，5S，6R) -3, 4, 5-三羥基-6-(羥甲基）四 氫-2H-哌喃-2-基）氧基）-1，4a，5, 6, 7, 7a-六氫環戊[c]哌喃-4-醛； (IS, 4aS，7R，7aR) -7-甲基-1- (((2S，3R，4S，5S，6R) -3, 4, 5-三羥基-6-(羥甲基）四 氫-2H-哌喃-2-基）氧基）-1，4a, 5, 6, 7, 7a-六氫環戊[c]哌喃-4-羧酸；及 (4aS，7R，7aR)-7-甲基八氫環戊[c]哌喃-4-羧酸。2. 如權利要求1的式（I)化合物或其醫藥上可接受的鹽類、酯類或立體異構物，其中 札為C 醛基；C 羧基；苯基胺基C 烷基，其中苯基視情況經一或多個C 烷基或 烷氧基取代；C i-C3烷基羰基乙烯基或C i-C3烷氧基羰基乙烯基。3. 如權利要求1的式（I)化合物或其醫藥上可接受的鹽類、酯類或立體異構物，其選自 以下任一種： (2R，3S，4S，5R，6S) -2-(乙酰氧基甲基）-6- (((IS, 4aS，7R，7aR) -4-甲酰基-7-甲 基-1，4a，5, 6, 7, 7a-六氫環戊[c]哌喃-1-基）氧基）四氫-2H-哌喃-3, 4, 5-三基三乙 醋； (2R，3S，4S，5R，6S) -2-(羥甲基）-6- (((IS, 4aR，7R，7aR) -4- (((4-甲氧基苯基）胺基） 甲基）-7-甲基八氫環戊[c]哌喃-1-基）氧基）四氫-2H-哌喃-3, 4, 5-三醇； (2R，3S，4S，5R，6S) -2-(羥甲基）-6- (((1S，4aR，7R，7aR) -7-甲基-4-((苯基胺基）甲 基）八氫環戊[c]哌喃-1-基）氧基）四氫-2H-哌喃-3, 4, 5-三醇； (E) -4- ((IS, 4aS, 7R, 7aR) -7-甲基-1- (((2S, 3R, 4S, 5S, 6R) -3, 4, 5-三羥基-6-(羥 甲基）四氫-2H-哌喃-2-基）氧基）-1，4a，5, 6, 7, 7a-六氫環戊[c]哌喃-4-基） 丁 -3-烯-2-酮； 3- ((IS, 4aS，7R，7aR) -7-甲基-1- (((2S，3R，4S，5S，6R) -3, 4, 5-三羥基-6-(羥甲基） 四氫-2H-哌喃-2-基）氧基）-1，4a，5, 6, 7, 7a-六氫環戊[c]哌喃-4-基）丙烯酸（E)-甲 酯；及 (2R，3S，4S，5R，6S) -2-(羥甲基）-6- (((1S，4aR，7R，7aR) -7-甲基-4-((對-甲苯基胺 基）甲基）八氫環戊[c]哌喃-1-基）氧基）四氫-2H-哌喃-3, 4, 5-三醇。4. 一種醫藥組合物，其包括如權利要求1至3中任一項的化合物或其醫藥上可接受的 鹽類、酯類或立體異構物，及醫藥上可接受的載體。5. -種式（I)化合物或其醫藥上可接受的鹽類、酯類或立體異構物的用途，其用于制 備治療受GLP-1受體調控的相關疾病的藥物： 其中，札為C 醛基；C 羧基；C 6-(；。芳基胺基C 烷基，其中該芳基視情況經一或多個 羥基、烷基或C 烷氧基取代；C「C6烷基羰基乙烯基或C 烷氧基羰基乙烯基； R2為哌喃葡萄糖基或Η ; =為單鍵或雙鍵。6. 如權利要求5的用途，其中該相關疾病選自以下至少一種：糖尿病、肥胖癥、代謝癥 候群、心血管疾病及神經退化性疾病。7. 如權利要求5的用途，其中該相關疾病選自以下至少一種：空腹高血糖、葡萄糖耐受 性不良、血脂異常、糖尿病視網膜病變、糖尿病腎病變、糖尿病神經病變、脂肪肝、動脈粥樣 硬化、慢性心臟衰竭、阿茲海默癥及帕金森氏癥。8. 如權利要求5的用途，其中該（I)化合物或其醫藥上可接受的鹽類、酯類或立體異構 物選自： (IS, 4aS，7R，7aR) -7-甲基-1- (((2S，3R，4S，5S，6R) -3, 4, 5-三羥基-6-(羥甲基）四 氫-2H-哌喃-2-基）氧基）-1，4a，5, 6, 7, 7a-六氫環戊[c]哌喃-4-醛； (IS, 4aS，7R，7aR) -7-甲基-1- (((2S，3R，4S，5S，6R) -3, 4, 5-三羥基-6-(羥甲基）四 氫-2H-哌喃-2-基）氧基）-1，4a, 5, 6, 7, 7a-六氫環戊[c]哌喃-4-羧酸； (4aS，7R，7aR)-7-甲基八氫環戊[c]哌喃-4-羧酸； (2R，3S，4S，5R，6S) -2-(乙酰氧基甲基）-6- (((IS, 4aS，7R，7aR) -4-甲酰基-7-甲 基-1，4a，5, 6, 7, 7a-六氫環戊[c]哌喃-1-基）氧基）四氫-2H-哌喃-3, 4, 5-三基三乙 醋； (2R，3S，4S，5R，6S) -2-(羥甲基）-6- (((IS, 4aR，7R，7aR) -4- (((4-甲氧基苯基）胺基） 甲基）-7-甲基八氫環戊[c]哌喃-1-基）氧基）四氫-2H-哌喃-3, 4, 5-三醇； (2R，3S，4S，5R，6S) -2-(羥甲基）-6- (((1S，4aR，7R，7aR) -7-甲基-4-((苯基胺基）甲 基）八氫環戊[C]哌喃-1-基）氧基）四氫-2H-哌喃-3, 4, 5-三醇； (E) -4- ((IS, 4aS, 7R, 7aR) -7-甲基-1- (((2S, 3R, 4S, 5S, 6R) -3, 4, 5-三羥基-6-(羥 甲基）四氫-2H-哌喃-2-基）氧基）-1，4a，5, 6, 7, 7a-六氫環戊[c]哌喃-4-基） 丁 -3-烯-2-酮； 3- ((IS, 4aS，7R，7aR) -7-甲基-1- (((2S，3R，4S，5S，6R) -3, 4, 5-三羥基-6-(羥甲基） 四氫-2H-哌喃-2-基）氧基）-1，4a，5, 6, 7, 7a-六氫環戊[c]哌喃-4-基）丙烯酸（E)-甲 酯；及 (2R，3S，4S，5R，6S) -2-(羥甲基）-6- (((1S，4aR，7R，7aR) -7-甲基-4-((對-甲苯基胺 基）甲基）八氫環戊[c]哌喃-1-基）氧基）四氫-2H-哌喃-3, 4, 5-三醇。
【專利摘要】本發明關于一種式(I)化合物或其醫藥上可接受的鹽類、酯類或立體異構物：其中，R1為C1-C6醛基；C1-C6羧基；C6-C10芳基胺基C1-C6烷基，其中該芳基視情況經一或多個羥基、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基取代；C1-C6烷基羰基乙烯基或C1-C6烷氧基羰基乙烯基；R2為哌喃葡萄糖基或H；為單鍵或雙鍵。該式(I)化合物或其醫藥上可接受的鹽類、酯類或立體異構物可用于制備治療受GLP-1受體調控的相關疾病的藥物。
【IPC分類】A61P9/04, C07H17/04, A61P9/10, A61P3/04, A61P3/00, A61K31/352, A61P13/12, A61P3/10, A61P25/28, A61P25/16, A61K31/7048, A61P9/00, A61P27/02, C07D311/94, A61P1/16, A61P3/06, A61P25/00
【公開號】CN105622687
【申請號】CN201410584351
【發明人】劉慧康, 黃琤, 林麗純, 李文泰, 蔡耿彰
【申請人】中國醫藥研究所
【公開日】2016年6月1日
【申請日】2014年10月27日