銀杏內酯k晶l型及制備方法和其組合物與用圖
【技術領域】0
[0001] 本發明設及發現了銀杏內醋K在固體狀態下存在的一種晶L型的狀態形式;設及發 明了晶L型的制備方法;設及發明了含有銀杏內醋K晶L型及含任意非零比例晶L型的混合晶 型的藥物組合物;本發明還設及銀杏內醋K晶L型作為藥物有效成分，在制備各種屯、腦血管 疾病、糖尿病、免疫系統疾病及神經系統疾病防治藥物中的應用。
【背景技術】
[0002] 銀杏內醋K屬于銀杏二祗內醋，其結構式如下所示，該化合物為天然PAF受體括抗 劑。其對中樞神經系統、缺血損傷具有保護作用，可用于治療缺血性腦血管疾病及相關疾 病。
[0003]
[0004] 銀杏內醋K的分子結構式
[0005] 在中國專利CN10182404U公開號盧坤，記載了廣東省中藥研究院發明的"一種銀 杏內醋K的制備方法"，其中設及了利用銀杏內醋B加酸脫水濃縮后使用乙醇或甲醇溶液進 行重結晶，制得銀杏內醋K。
[0006] 在中國專利CN102002052(公開號中，記載了江蘇康緣藥業股份有限公司發明 的"銀杏內醋K及其復合物及其制備方法與用途"，其中設及了銀杏內醋B的溶解，轉化，加酸 沉淀或濃縮析晶及將沉淀物或結晶進行重結晶的步驟。其中將沉淀物或結晶用乙醇、甲醇、 丙酬或正下醇溶液重結晶可制得銀杏內醋K。
[0007] 在中國專利CN101747338(公開號中，記載了廣州艾格生物科技有限公司發明 的"一種銀杏內醋類化合物制備方法"，其中設及了銀杏內醋K的提取、柱層析、濃縮及重結 晶步驟。其中使用95%甲醇溶液重結晶可制得銀杏內醋K。
[000引在中國專利CN1424315(公開號）[4]中，記載了江蘇康緣藥業股份有限公司發明的 "銀杏內醋化合物及其制備方法和含有該化合物的藥物組合物"，其中設及了分離純化銀杏 內醋K的方法。將銀杏內醋粗品經乙酸乙醋或丙酬溶液進行回流提取，經柱層析純化，用石 油酸-乙酸乙醋洗脫后合并濃縮洗脫液，放置出現沉淀，將沉淀用丙酬溶解W制備型高效液 相純化，可得銀杏內醋K。
[0009]文獻《銀杏祗內醋的分離、純化和結構鑒定》W中用采用銀杏葉的乙酸乙醋回流 液，柱層析純化后，用C也Ch-MeOH洗脫，收集銀杏內醋粗品洗脫液，重結晶后經過制備型RP- HPLC純化，制得銀杏內醋Κ純品。
[0010] 《Determination of the derivative from ginkgolide Β》等文獻中[6-7]設及了 將銀杏內醋B用甲醇溶液溶解后使用RP-HPLC/UV法在半制備色譜柱上進行分離，流動相為 甲醇-水，檢測波長為216nm，得到了一種銀杏內醋B的衍生物即為銀杏內醋K。
[OOU]《銀杏內醋提取物中微量成分的LC/DAD/ESI/MS分析及結構鑒定》中使用70%丙酬 溶液將銀杏內醋提取物完全溶解，后經過制備分離方法得到銀杏內醋K純品W。
[0012] 上述專利與文獻公開的銀杏內醋K固體樣品，經試驗證實均為銀杏內醋K的不同溶 劑合物。經國內外專利與文獻檢索，未發現有關銀杏內醋K的其它晶型專利或文獻報道。
[0013] 本發明發現了與上述專利或文獻研究報道內容不同的一種新的銀杏內醋K固體物 質存在狀態，即銀杏內醋K的晶L型，其不含有任何結晶水或結晶溶劑，發現了該晶L型的制 備方法，W及其安全性與穩定性方面的優勢特征。
[0014] 本發明的研究目的是從銀杏內醋K的晶型固體物質存在狀態研究入手，通過晶型 篩選技術、晶型評價技術，在藥物的有效成分原料層面上尋找、發現晶型固體物質存在種類 與狀態特征，將晶型物質與藥效學研究相結合，為尋找、發現、開發具有最佳臨床療效的銀 杏內醋K的優勢藥用晶型固體物質提供基礎科學數據；同時，也為從銀杏內醋K固體藥物原 料物質基礎上申請國家或國際的知識產權發明專利保護提供科學依據
【發明內容】
[0015] 本發明目的之一:提供銀杏內醋K晶L型的存在狀態和描述方式。
[0016] 本發明目的之二:提供銀杏內醋K晶L型的制備方法。
[0017] 本發明目的之；:提供含有銀杏內醋K晶L型純品、或含有任意非零比例晶L型的混 合晶型的固體藥物及其組合物。
[0018] 本發明目的之四：提供使用銀杏內醋K晶L型作為藥物活性成分的藥物組合物，其 每日用藥劑量在50yg~lOOmg范圍內。
[0019] 本發明目的之五:提供使用銀杏內醋K晶L型作為藥物活性成分原料而制備開發出 供臨床使用的片劑、膠囊、丸劑、針劑、緩釋或控釋制劑藥物。
[0020] 本發明目的之六:提供銀杏內醋K晶L型在安全性及穩定性方面的優勢特征。
[0021] 本發明目的之屯:提供使用銀杏內醋K晶L型作為活性成分原料，在制備治療腦缺 血性疾病的藥物中的應用。
[0022] 本發明提供了銀杏內醋K在固體狀態下的晶L型形式，晶L型樣品的制備方法;發現 使用銀杏內醋K的晶L型作為活性成分制備開發出的藥物及其組合物用于制備各種屯、腦血 管疾病、糖尿病、免疫系統疾病及神經系統疾病防治藥物中的應用。
[002引技術特征
[0024] 1.銀杏內醋K晶L型固體樣品形態特征：
[0025] 1.1本發明設及的銀杏內醋K晶L型，其特征在于，不含有任何結晶溶劑或結晶水， 當使用粉末X射線衍射分析采用CuKa福射實驗條件時，表現為衍射峰位置:2-Theta值η或 d值（A)和衍射峰相對強度：峰高值化ei曲t % )或峰面積值(Area% )具有如下特征峰值時 的固體物質(表1，圖1);
[0026] 表1銀杏內醋K晶L型的粉末X射線衍射峰值
[0027]
[0029] 1.2本發明設及的銀杏內醋Κ晶L型，其特征在于，使用衰減全反射傅立葉紅外光譜 法進行分析時在 3496、3360、2971、2919、2863、1810、1761、1704、1474、1437、1406、1377、 1358、1342、1315、1289、1249、1235、1183、1151、1115、1082、1059、1024、1000、984、964、925、 902、885、832、798、752、726、717、695、656畑1-1處存在紅外光譜特征峰，其中紅外光譜特征峰 的允許偏差為±2cnfi(圖2)。
[0030] 1.3本發明設及的銀杏內醋K晶L型，其特征在于，使用差示掃描量熱技術分析時， 表現為在30~290°C溫度范圍內，升溫速率為每分鐘10°C的DSC圖譜中在280°C±5°C處存在 1個吸熱峰(圖3)。
[0031] 1.4本發明的設及的銀杏內醋K晶L型，其特征在于，使用熱重技術分析時，表現為 在30~200°C溫度范圍內，升溫速率為每分鐘10°C的TG圖譜中不存在失重臺階(圖4)。
[0032] 2.銀杏內醋K晶L型樣品的制備方法特征：
[0033] 2.1本發明設及的銀杏內醋K晶L型的制備方法，其特征在于，使用甲醇、二氧六環、 乙醇、丙酬、乙酸乙醋、乙臘或四氨巧喃的單一溶劑，或由甲醇、乙醇、水、二氧六環、丙酬、四 氨巧喃及乙酸乙醋中任意兩種或多種經不同配比組合制成的混合溶劑，在20°C~60°C溫度 下將銀杏內醋K樣品完全溶解并經環境溫度15°C~65°C、環境濕度10%~75%、真空實驗條 件下進行快速去除溶劑實驗;后在100°c~250°C的高溫環境下放置至少lOmin后，制備獲得 銀杏內醋K的晶L型。
[0034] 2.2本發明設及的銀杏內醋K晶L型的制備方法，其特征在于，使用甲醇、二氧六環、 乙醇、乙酸乙醋或四氨巧喃作為良溶劑，使用水或正己燒作為反溶劑，在20°C~60°C溫度下 將銀杏內醋K樣品完全溶解并經環境溫度10-40°C、環境濕度10%~75%條件下進行快速沉 淀操作，在溫度10-40°C、環境濕度10%~75%條件下靜置2-12h，沉淀過濾;所得固體樣品 在80°C~250°C的高溫環境下放置至少lOmin后，制備獲得銀杏內醋K的晶L型。
[003引2.3本發明設及的銀杏內醋K晶L型的制備方法，其特征在于，使用銀杏內醋K晶K型 樣品經80°C~250°C高溫環境，放置至少lOmin后，獲得銀杏內醋K的晶L型。
[0036] 2.4本發明設及的銀杏內醋K的晶L型的制備方法，其特征在于，采用物理力學晶格 破壞法獲得銀杏內醋K晶L型。其中所述的物理力學晶格破壞法優選球磨法，其中球磨法的 球料比為1:10~30:1，優選為6:1~15:1;球磨轉速為100~80化/min,優選為300~40化/ min;研磨時間為2-20h，優選為8~16h。
[0037] 3.銀杏內醋K的晶型成分、給藥劑量及藥物制劑組合物特征：
[0038] 3.1本發明設及的銀杏內醋K的混合晶型固體物質，其特征在于，含有任意非零比 例的銀杏內醋K晶L型。
[0039] 3.2本發明設及的藥物組合物，其特征在于，含有銀杏內醋K的晶L型，或含有銀杏 內醋K的混晶固體物質和藥學上可接受的載體。
[0040] 3.3本發明設及的藥物組合物，銀杏內醋K的每日用藥劑量在50yg~lOOmg范圍內。
[0041] 3.4本發明設及的藥物組合物，其特征在于，所述的藥物組合物是片劑、膠囊、丸 劑、針劑、緩釋制劑或控釋制劑。
[0042] 3.5本發明設及銀杏內醋K的晶L