,其包含根據(jù)本發(fā)明的表現(xiàn)出內(nèi) 切-1,4-β-木聚糖酶活性的酶與任意一種或多種β-葡聚糖酶組合。在一些實(shí)施方案中, 這種一種或多種葡聚糖酶是根據(jù)本發(fā)明的。
[0134] 本發(fā)明的另一個(gè)重要的方面為組合物,其包含根據(jù)本發(fā)明的表現(xiàn)出內(nèi) 切-1,3(4)-β -葡聚糖酶活性的酶與任意一種或多種木聚糖酶組合。在一些實(shí)施方案中, 這種一種或多種木聚糖酶為根據(jù)本發(fā)明的表現(xiàn)出內(nèi)切-1,4-β -木聚糖酶活性的酶。在一 些實(shí)施方案中,這種一種或多種木聚糖酶為根據(jù)SEQ ID NO: 17和/或SEQ ID NO: 18的酶。 在一些實(shí)施方案中,所述一種或多種木聚糖酶為根據(jù)SEQ ID N0:19、SEQ ID N0:20、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:22、SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:24 和 / 或 SEQ ID NO:25 或它們的任何功 能片段的酶。
[0135] 在一些實(shí)施方案中,表現(xiàn)出內(nèi)切-1,4-β-木聚糖酶活性的酶與表現(xiàn)出內(nèi) 切-1,3 (4) - β -葡聚糖酶活性的酶的組合根據(jù)下表:
[0136]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種表現(xiàn)出內(nèi)切-l,4-0-木聚糖酶活性的酶,該酶包含與選自SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18,SEQ ID NO: 19,SEQ ID N0:20,SEQ ID N0:2USEQ ID N0:22,SEQ ID N0:23,SEQ ID N0:24、SEQ ID N0:25或它們的任何功能片段中的任意一者具有至少80%的一致性的氨基 酸序列。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的酶,該酶對(duì)可溶性的阿拉伯木聚糖底物(WE-AX)和不可溶的 阿拉伯木聚糖底物(WU-AX)阿拉伯木聚糖底物的活性比值為低于大約7.0,例如低于大約 6. 5,例如低于大約6. 0,例如低于大約5. 5,例如低于大約5. 0,例如低于大約4. 5。
3. -種表現(xiàn)出內(nèi)切-1,3 (4)-0-葡聚糖酶活性的酶,該酶包含與選自SEQ ID NO: 7、SEQ ID N0:8、SEQ ID N0:9、SEQ ID NO: 10,和 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、 SEQ ID NO: 14、SEQ ID NO: 15、SEQ ID NO: 16或它們的任何功能片段中的任意一者具有至 少80%的一致性的氨基酸序列。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1-3的任意一項(xiàng)所述的酶,該酶的最適溫度為40-70°C的范圍,例如 45-65°C的范圍,例如50-65°C的范圍,例如55-65°C的范圍。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1-4的任意一項(xiàng)所述的酶,其中所述的酶與選自SEQ ID N0:l-25或它 們的任何功能片段中的任意一條氨基酸序列具有至少81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、 91、92、93、94、95、96、97、98 或 99% -致性。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1-5的任意一項(xiàng)所述的酶,其具有的氨基酸總數(shù)少于350,例如少于 340,例如少于330,例如少于320,例如少于310,例如少于300個(gè)氨基酸,例如200至350個(gè) 的范圍,例如220至345個(gè)氨基酸的范圍。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1-6的任意一項(xiàng)所述的酶,其中與選自SEQ ID NO: 1-25或它們的任何 功能片段中的任意一條氨基酸序列相比,所述的酶的氨基酸序列具有至少1、2、3、4、5、6、7、 8、9或10個(gè)氨基酸取代。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1-7的任意一項(xiàng)所述的酶,其中與選自SEQ ID NO: 1-25或它們的任何 功能片段中的任意一條氨基酸序列相比,所述的酶的氨基酸序列具有最多1、2、3、4、5、6、7、 8、9或10個(gè)氨基酸取代。
9. 根據(jù)權(quán)利要求1-8的任意一項(xiàng)所述的酶,其中所述的酶包含SEQ ID NO: 1-25或它們 的任何功能片段中的任意一者所識(shí)別的氨基酸序列。
10. 根據(jù)權(quán)利要求1或3的任意一項(xiàng)所述的酶,所述的酶由SEQ ID NO: 1-25或它們的 任何功能片段中的任意一者所識(shí)別的氨基酸序列組成。
11. 一種包含DNA序列的DNA構(gòu)建體,其中所述的DNA序列編碼根據(jù)權(quán)利要求1-10的 任意一項(xiàng)所述的酶。
12. -種包含根據(jù)權(quán)利要求11所述的DNA構(gòu)建體的重組表達(dá)載體。
13. -種使用權(quán)利要求11所述的DNA構(gòu)建體或權(quán)利要求12所述的載體轉(zhuǎn)化的細(xì)胞。
14. 一種制備物,其包含根據(jù)權(quán)利要求1-10的任意一項(xiàng)所述的酶、或根據(jù)權(quán)利要求11 所述的DNA構(gòu)建體、或根據(jù)權(quán)利要求12所述的載體或根據(jù)權(quán)利要求13所述的細(xì)胞。
15. -種組合物,其包含根據(jù)權(quán)利要求1、2、4-10的任意一項(xiàng)所述的表現(xiàn)出內(nèi) 切-1,4- 0 -木聚糖酶活性的酶,以及任意一種或多種0 -葡聚糖酶。
16. 根據(jù)權(quán)利要求15所述的組合物,其中所述的一種或多種0 -葡聚糖酶為表現(xiàn)出根 據(jù)權(quán)利要求3-10的任意一種所述的內(nèi)切-1,3(4)-0 -葡聚糖酶活性的酶。
17. -種組合物,其包含根據(jù)權(quán)利要求3-10的任意一項(xiàng)所述的表現(xiàn)出內(nèi) 切-1,3 (4) - 0 -葡聚糖酶活性的酶,以及任意一種或多種木聚糖酶。
18. 根據(jù)權(quán)利要求17所述的組合物,其中所述的一種或多種木聚糖酶為根據(jù)權(quán)利要求 1、2、4-10的任意一項(xiàng)所述的表現(xiàn)出內(nèi)切-1,4-0 -木聚糖酶活性的酶。
19. 根據(jù)權(quán)利要求15-18的任意一項(xiàng)所述的組合物,其中所述的內(nèi)切-1,3 (4) - 0 -葡聚 糖酶活性和所述的內(nèi)切-1,4- 0 -木聚糖酶活性得自至少兩種不同的酶,例如得自兩種不 同物種的至少兩種不同的酶。
20. 根據(jù)權(quán)利要求15-19的任意一項(xiàng)所述的組合物,其包含至少兩種酶的組合,這兩 種酶為所述的兩種酶,或者其氨基酸序列與各個(gè)SEQ ID或它們的任何功能片段具有至少 80 %序列一致性的兩種酶,所述的組合選自: SEQ ID NO:1 和 SEQ ID NO:7 ; SEQ ID NO:2 和 SEQ ID NO:7 ; SEQ ID NO:3 和 SEQ ID NO:7 ; SEQ ID NO:4 和 SEQ ID NO:7 ; SEQ ID NO:5 和 SEQ ID NO:7 ; SEQ ID NO:6 和 SEQ ID NO:7 ; SEQ ID NO:17 和 SEQ ID NO:7 ; SEQ ID NO:18 和 SEQ ID NO:7 ; SEQ ID NO:19 和 SEQ ID NO:7 ; SEQ ID NO:20 和 SEQ ID NO:7 ; SEQ ID NO:21 和 SEQ ID NO:7 ; SEQ ID NO:22 和 SEQ ID NO:7 ; SEQ ID NO:23 和 SEQ ID NO:7 ; SEQ ID NO:24 和 SEQ ID NO:7 ; SEQ ID NO:25 和 SEQ ID NO:7 ; SEQ ID NO:1 和 SEQ ID NO:8 ; SEQ ID NO:2 和 SEQ ID NO:8 ; SEQ ID NO:3 和 SEQ ID NO:8 ; SEQ ID NO:4 和 SEQ ID NO:8 ; SEQ ID NO:5 和 SEQ ID NO:8 ; SEQ ID NO:6 和 SEQ ID NO:8 ; SEQ ID NO:17 和 SEQ ID NO:8 ; SEQ ID NO:18 和 SEQ ID NO:8 ; SEQ ID NO:19 和 SEQ ID NO:8 ; SEQ ID NO:20 和 SEQ ID NO:8 ; SEQ ID NO:21 和 SEQ ID NO:8 ; SEQ ID NO:22 和 SEQ ID NO:8 ; SEQ ID NO:23 和 SEQ ID NO:8 ; SEQ ID NO:24和SEQ ID NO:8 ; SEQ ID NO:25和SEQ ID NO:8 ; SEQ ID NO:I和SEQ ID NO:9 ; SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:9 ; SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:9 ; SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:9 ; SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:9 ; SEQ ID NO:6和SEQ ID NO:9 ; SEQ ID NO:17和SEQ ID NO:9 ; SEQ ID NO:18和SEQ ID NO:9 ; SEQ ID NO:19和SEQ ID NO:9 ; SEQ ID NO:20和SEQ ID NO:9 ; SEQ ID NO:21和SEQ ID NO:9 ; SEQ ID NO:22和SEQ ID NO:9 ; SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:9 ; SEQ ID NO:24和SEQ ID NO:9 ; SEQ ID NO:25和SEQ ID NO:9 ; SEQ ID NO:I和SEQ ID NO:10 ; SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:10 ; SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:10 ; SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:10 ; SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:10 ; SEQ ID NO:6和SEQ ID NO:10 ; SEQ ID NO:17和SEQ ID NO:10 ; SEQ ID NO:18 和SEQ ID NO:10 ; SEQ ID NO:19 和SEQ ID NO:10 ; SEQ ID NO :20 和SEQ ID NO :10 ; SEQ ID NO:21 和SEQ ID NO:10 ; SEQ ID NO :22和SEQ ID NO :10 ; SEQ ID NO :23和SEQ ID NO :10 ; SEQ ID NO:24和SEQ ID NO: 10; SEQ ID NO :25和SEQ ID NO :10 ; SEQ ID NO:I和SEQ ID NO:11 ; SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:11 ; SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:11 ; SEQ ID N0:4和SEQ ID NO:11 ; SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:11 ; SEQ ID N0:6和SEQ ID NO:11 ; SEQ ID NO:17和SEQ ID NO:11 ; SEQ ID NO:18 和SEQ ID NO:11 ; SEQ ID NO:19 和SEQ ID NO:11 ; SEQ ID NO:20 和SEQ ID NO:11 ; SEQ ID NO:21 和SEQ ID NO:11 ; SEQ ID NO:22 和SEQ ID NO:11 ; SEQ ID NO:23 和SEQ ID NO:11 ; SEQ ID NO:24 和SEQ ID NO:11 ; SEQ ID NO:25 和SEQ ID NO:11 ; SEQ ID NO:I 和SEQ ID NO:12 ; SEQ ID NO:2 和SEQ ID NO:12 ; SEQ ID NO:3 和SEQ ID NO:12 ; SEQ ID NO:4 和SEQ ID NO:12 ; SEQ ID NO:5 和SEQ ID NO:12 ; SEQ ID NO:6 和S