0192] 還觀察到：用局部乳膏處理之后，濕疹皮膚病變的總體平均尺寸（長度X寬度）大 幅減小。例如，平均長度減小為-23.8 % (從6.3cm到4.8cm )，而平均寬度減小為-22.8 % (從 3 · 9cm到3 · Ocm) 〇
[0193] SCORAD是用于評估濕疹的程度和嚴重度的臨床工具(異位性皮炎評分）。皮膚科醫 生可在治療前后利用該工具來判斷治療是否有效。
[0194] 異位性皮炎嚴重度得分(S⑶RAD)指數被用作濕疹的標準化評定量表。這種組合得 分指數由異位性皮炎歐洲特別小組（European Task Force on Atopic Dermatitis)在 1993年開發。它已經受真實性和可靠性檢驗并顯示局部留類化合物和UV-A療法試驗中的靈 敏性改變。它使用9法則組合了疾病程度的評估，其中利用疾病強度的6個臨床特征(在單個 代表性位點評估），加上瘙癢和睡眠喪失的視覺模擬評分。所述指數已顯示出與疾病嚴重度 的整體評估一致并與認為反映異位性皮炎的疾病活動性的多種循環因子一致。
[0195] 根據表1A，受試者內分析顯示:處理組中的受試者的平均SCORAD指數得分從基線 到第7天(P-值= 0.049)和第30天(P-值= 0.004)具有統計學顯著降低。此外，注意到了從基 線到所有時間點的一致降低并在第30天發現了最多的降低(-49.11%)。圖10顯示了 SCORAD 結果。
[0196] 受試者完成了皮膚病生活質量指數(DLQI )，其是對每個受試者自身皮膚狀況的自 我評估。皮膚病生活質量指數(DLQI)由10個問題組成，問題涉及在過去的一周里患者在皮 膚病對與他們的生活質量相關的不同健康方面的影響方面的感知。
[0197] 根據表1A，受試者的平均皮膚病生活質量指數(DLQI)得分顯示出從基線到所有時 間點持續降低，其中最多的降低在第30天(-48.03%)。從基線到第30天(P-值<0.05)觀察 到了統計學顯著變化。圖11顯示了 DLQI結果。
[0198] 還評估了受試者從第0天至第30天的生命得分(vital score)。觀察到:受試者的 體溫、收縮壓、舒張壓、脈搏率和呼吸率從基線至任何時間點盡管展示出增加或降低的趨 勢，但無統計學顯著變化。另一方面，從基線至第15天觀察到了體重顯著但較少的增加(p< 0.05)。根據表1A，相較于基線，在第15天，體重增加為+0.81 % (約1.2鎊）；在第30天之前，體 重增加為+0.97% (約1.5鎊）。從遭受本文所述各種狀況或疾病的患者的營養觀點來看，這 種結果可是有價值的。
[0199] 對于該研究，沒有報告不良事件或嚴重的不良事件。
[0200] 總之，臨床研究的結果表明：實施例6B的產品對治療輕至中度異位性皮炎(又名濕 疹)有效，這通過皮膚病變的尺寸以及疾病的其它標志（例如，瘙癢、起鱗和泛紅)減少得到 證明。
[0201] 預期局部施用皮膚乳膏將成功治療與濕疹、牛皮癬有關的癥狀和相關的炎性病 癥。乳膏通常以基本上覆蓋受影響表面區域的方式被局部施加在皮膚上。乳膏可被配制成 化妝品、藥物或營養組合物，其分別包括藥學上或營養學上可接受的載體。
[0202] 在人類個體中，皮膚乳膏(實施例6B)的有用治療劑量范圍可以為但不限于約Ig至 約5g。另一個更窄的合適劑量范圍為約Ig至約2g，例如，l_2g/病變。對于施用至人類皮膚， 另一種有用的治療劑量為約〇. 5g/病變至約1.5g/病變。
[0203]例如，在人類患者中，皮膚乳膏（實施例6A-6D)可以以日劑量為約Ig至約5g被提 供。另一個更窄的合適劑量范圍為每天約Ig至約2g。另一個更窄的合適劑量范圍為每天約 1區至約3區。
[0204] 實施例6D(牛皮癬）
[0205]通過將2階段提取物(實施例2B)替換為實施例6C中的提取物2A來制備試驗乳膏。
[0206] 用牛皮癬試驗乳膏治療腿上具有鱗狀發作的牛皮癬患者（圖9A)。經4周局部施用 乳膏(如上文在實施例6C中所示)通過減少結痂和起鱗提供了顯見的改善(圖9B)。
[0207] 還考慮:本文所述的2階段反應平臺可被用于生產基于花粉的反應產物與蜂巢組 分的組合的經口制劑。這種產品可包括2階段反應混合物，所述2階段反應混合物已被冷凍 干燥或凍干，然后被恰當配制為經口施用。
[0208] 實施例7(細胞保護試驗）
[0209] MTT試驗已被調整以測量提取物是否能保護細胞免受凋亡（程序性細胞死亡），細 胞凋亡是通過以下實現的，
[0210] 1.使用過氧化氫的氧化壓力，或者
[0211 ] 2.使用依托泊苷(化療藥物)的DNA損傷。
[0212] MTT試驗傳統上被用于測量化合物/提取物的細胞毒性。這是通過憑借活細胞線粒 體中MTT(3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑溴化物)朝向甲瓚的還原測量細胞增 殖來實現的。如果細胞處于壓力狀態或者瀕臨死亡，則它們不能進行該反應，因此OD(光密 度)低。如果在提取物的存在下，細胞運作良好，則細胞增殖發生。因此，OD與有活力的（活） 細胞的數目直接相關。
[0213] 在所示的圖3A、3B和4中，OD越高，則存在越多活細胞。沒有一種提取物顯示出細胞 毒性，因為條(bar)與僅細胞處理中的高度相同。
[0214] 傳統MTT試驗被調整以測量提取物的細胞保護。這提供了提取物是否能保護細胞 免受壓力的測量。檢驗HL-60細胞。如圖3A中所示例，試驗的前提如下：
[0215] 1.僅細胞-僅使細胞生長48小時；
[0216] 2.細胞+過氧化氫。使細胞生長24小時，然后加入過氧化氫(助氧化劑)持續另外24 小時。過氧化氫對細胞有毒性，因此抑制生長甚至殺滅細胞；
[0217] 3.細胞+依托泊苷。使細胞生長24小時，然后加入依托泊苷(化療藥物)持續另外24 小時。依托泊苷對細胞非常有毒性，其通過損傷DNA和阻止細胞分裂從而阻止細胞增殖來殺 滅細胞。因此，依托泊苷導致抑制細胞生長和最終細胞死亡；
[0218] 4.僅提取物是將細胞與提取物一起溫育48小時。如果提取物對細胞有毒性，則OD 將比僅細胞處理的OD要低；
[0219] 5.提取物+過氧化氫。將提取物加入細胞中持續24小時，然后加入過氧化氫。如果 提取物能夠保護線粒體免受來自過氧化氫的氧化壓力（即，自由基），則細胞將繼續生長;和
[0220] 6.提取物+依托泊苷。將提取物加入細胞中持續24小時，然后加入依托泊苷。如果 提取物能夠保護DNA免受依托泊苷化療，則細胞將繼續生長。
[0221] 有效的提取物(例如樹番茄、蘋果皮和卡瓦椒)可被用于評估生物活性。例如，制備 樹番茄提取物并如上所述通過在臨密封容器之前（第2階段之前）加入樹番茄粉來使其反 應，或者不使其反應而是在反應完成之后(在第2階段之后，或者完全省略第2階段)加入樹 番茄粉。通過與其它組分反應，看起來生物活性被增強或者甚至被改變，這是因為反應混合 物中的脂質通過充當脂質膜載體，和/或通過酯化類黃酮而協同增強了生物活性。在以下實 施例中，"7K"樣品表示:樹番茄提取物或不含樹番茄的椰子水提取物(如實施例2F中）在第2 階段不反應或發酵，而"乙醇"樣品表示:樹番茄提取物或不含樹番茄的椰子水提取物(如實 施例2F中）在第2階段反應和發酵。
[0222] 因此，MTT試驗作為標準方法被執行，其中使用不含樹番茄的的實施例2F(以1:16 稀釋)作為"7K"提取物，表示在這種情況下，不進行第2階段發酵。這種提取物顯示出強的功 效，因為它沒有細胞毒性并且保護細胞免受DNA損傷和自由基壓力。圖3A中顯示:基于椰子 水的提取物(不含樹番茄)作為"7K"提取物具有非常強的細胞保護活性，且圖3B中顯示:基 于椰子水的提取物(不含樹番茄)作為"乙醇"提取物甚至更有效地促進細胞增殖。
[0223] 接下來，使用上述樹番茄提取物(實施例2F)執行相同的試驗流程。樹番茄"水"提 取物自身已顯示出部分減少細胞生長，并具有抵抗過氧化氫和依托泊苷的強細胞保護生物 活性。當摻入發酵反應中以提供樹番茄"乙醇"提取物時，存在顯著的細胞增殖和細胞保護， 如圖4中所示(即，由"Tam"提供的保護）。因此，樹番茄的生物活性通過反應被協同改變。
[0224] 這個實施例中所檢驗的本發明提取物顯示出強的功效，因為它們沒有細胞毒性并 且保護細胞免受DNA損傷和自由基壓力。注意到了過氧化氫和依托泊苷二者均誘導細胞凋 亡。化療就是這樣起作用的-其誘導DNA損傷，然后細胞死亡。這些實驗的結果顯示:本發明 的提取物具有抵抗氧化壓力且抵抗DNA損傷化療的強細胞保護活性。因此，這些結果證明： 這些提取物保護免受細胞凋亡誘導。
[0225] 實施例8 (免疫試驗）
[0226] 使用IL-10和TNFa的雙標簽抗體標記（BioActives Research New Zealand Ltd ·， Auckland，N.Z.)，利用標準方法進行流式細胞術以測量細胞因子的表達。對于該實驗，以以 下方式處理細胞：
[0227] 1.僅細胞-僅使細胞生長48小時；
[0228] 2.(對照)細胞+脂多糖(LPS)。使細胞生長24小時，然后加入LPS(促炎性細菌毒素） 持續另外24小時。；
[0229] 3.僅提取物是將細胞與提取物一起溫育48小時;和
[0230] 4.提取物+LPS。將提取物加入細胞中持續24小時，然后加入LPS。
[0233] TNF是促炎性細胞因子。TNF增加指示炎癥。LPS(脂多糖）是細菌毒素，其在本試驗 中被用于誘導炎癥(TNF從平均19.9至31.7)。
[0234] IL-10是抗炎性細胞因子，其參與減少變態反應例如濕疹。通過增加 IL-10，TNF隨 同其它炎性細胞因子一起減少。LPS還通過觸發TNF增加，從而導致減少IL-10的級聯反應。 如表2中所示，在LPS的存在下，根據本發明制備的椰子和樹番茄提取物將TNF表達維持在正 常水平，同時增加 IL-IO以抗擊促炎性攻擊。
[0235] 實施例9(痤瘡乳膏制劑）
[0236] 在另一個實施方式中，制備處理痤瘡的乳膏制劑。
[0238] 2不含蜂蠟。
[0239] 省略了蜂蠟，因為它無益于痤瘡的皮膚治療。
[0240] 任選地，可加入組合物總重量的最多2.0%的水楊酸。在一個實施方式中，加入0.5 重量％的水楊酸。
[0241 ]羅漢松提取物獲自本地物種的樹皮。
[0242]預期局部施加痤瘡乳膏將成功處理與痤瘡有關的癥狀和相關的炎性病癥。乳膏通 常以基本上覆蓋受影響表面區域的方式被局部施加在皮膚上。乳膏可被配制成化妝品、藥 物或營養組合物，它們分別包括藥學上或營養學上可接受的載體。
[0243] 本發明的化妝品（或藥用化妝品）、或營養組合物可以與營養學上可接受的載體組 合施用。在這種制劑中，活性成分可構成1重量％_99重量％，或者替代性地，0.1重量％-99.9重量％。或者，活性成分可以在約5重量％-約75重量％、或者約10重量％-約75重量％ 的范圍內。"營養學上可接受的載體"表示與制劑的其它成分相容且對使用者無害的任何載 體、稀釋劑或賦形劑。有用的賦形劑包括微晶纖維素、硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、任何可接受的糖 (例如，甘露醇、木糖醇），對于化妝品用途，油基是優選的。
[0244] 本發明的局部藥物組合物可以與藥學上可接受的載體組合施用。在這種制劑中， 活性成分可構成1重量重量％，或者替代性地，0.1重量％-99.9重量％。"藥學上可接 受的載體"表示與制劑的其它成分相容且對使用者無害的任何載