W用于根據需要 打開或關閉流體流選項。蠕動累可被致動W將無菌液體從無菌液體膽存器經過管子12推 動到卵室1和針13兩者中。 陽163]卵室1完全充滿流體。還優選的是,卵室1被保持在加熱板上或在加熱殼體內,W保持室1處于身體溫度或接近于身體溫度。所述加熱板或殼體可W與累相關聯,所述累 用于作為較大累單元的一部分經過系統抽出液體。優選的是,流體被加熱到36. 8 + 0. 4Γ, 37Γ。
[0164] 在卵收集過程中,當濾器4在卵室內大體上上水平時,卵室保持在"收集方向"。 當抽吸卵泡流體并試圖從卵室1內的任何血液或碎片中分離卵或卵子時,運促進了重力效 應。
[01化]卵收集通常是針對在鎮靜狀態下的患者的日過程。在超聲引導下,針13通過患者 的陰道的頂端進入卵巢。卵泡流體和相關的卵子通過經過系統抽出流體而被抽吸。蠕動累 用于將裝填流體經過系統抽出至廢物膽存器中,其抽拉包括任何卵子的卵泡流體經過針13 和管子12經過入口端口 7進入卵室1中。流體經過入口端口被抽出到容器中,并進入第一 室5中,且然后進一步經過濾器4被抽出到第二室6中。擋板顯示經過擋板長度擴展的流 體流動。然后,其w降低的速度作為"簾"流在擋板之上流動。卵和血細胞在擋板之上經過 并且朝向濾器落下。由于在10-100μπι之間優選在20-60μπι之間的濾器4的孔大小被選 擇W小于卵子/卵的大小,因此卵被保留在第一室5中,而卵泡流體、血細胞和其它較小尺 寸的碎片經過濾器4進入第二室6中,并且最終被從出口端口 9抽出至廢物膽存器中。該 孔大小使運種分離主要發生在重力作用下,因此需要經過過濾器的最小的抽吸壓力。運導 致了卵在干凈的流體環境中被截留在第一室5中。W運種方式從存在于卵泡流體中的血液 中分離卵W防止血凝塊的形成是非常重要的。
[0166]值得注意的是,因為所有的卵被收集在單個容器中,同時卵泡流體經過系統最終 被抽出到廢物膽存器中,所W運降低了胚胎學家必須查找W鑒定和選擇適當的卵子/卵的 流體的量。 陽167]密封的室被保持在培養箱中,直到胚胎學家準備檢查并打開它。
[0168] 在抽吸后,如果卵尚未經過入口端口7抽出,則卵可能位于管子12內。在收集結 束時,臨床醫生能夠使用灌液累,W保證所有的卵泡流體已被推入卵室1中,并且沒有卵或 卵子被無意留在管子12中。
[0169] 如果考慮卵從女性體內取出之后被截留在針中,則該針可W插入到例如鹽水的滅 菌加熱流體中,并且被沖洗。
[0170] 在未示出的實施方案中,卵室還設置有空氣傳感器,其檢測在抽吸過程中空氣是 否進入第一室。在卵泡的抽吸過程中,存在空氣可進入系統的風險,運可影響卵或卵子被保 持在其中的卵泡流體或液體的抑值,或者在更顯著的情況下,可導致卵干燥。當室定向成 收集時,傳感器將定位在第一室的頂部處。隨后,空氣出口端口 10可被打開W除去任何空 氣,W最小化圍繞所收集的卵的生理條件的改變(例如抑值的改變)且防止卵干燥。空氣 出口端口 10也可W在不存在傳感器的情況下使用。 陽171]在收集過程中如果針變堵塞,沖洗針也是可能的。在針和入口端口7之間的管子 12可W設有Ξ通分接頭17(圖4中所示)。針和入口端口 7之間的流動可W例如使用夾管 閥在點A處被封閉,并且在無菌液體膽存器和針之間的流動可W例如在點Β處被打開。累 (優選為蠕動累)用于將無菌液體從無菌液體膽存器經過針推出,驅逐可能阻止針孔或相 關聯的管子的任何東西。一旦沖洗完成,在無菌液體膽存器和針之間的流動可被再次關閉, 并且在針和入口端口 10之間的流動可W被再次打開。在沖洗過程中,與抽吸相關聯的抽吸 累通常會停止。
[0172] 然后可從與針13相關聯的管子12和此外第二管14中分離并斷開卵室1。由于 端口 7、9、10是可密封的(優選是自密封的)和無滴漏的,因此運導致室成為用于收集的卵 的密封環境。貫穿收集過程,卵室1被保持在熱塊上W保證卵室1和其內含物都保持在體 溫37°C,或保持在胚胎學家所希望的溫度(在某些情況下,胚胎學家喜歡將卵保持在稍微 高于或低于體溫的溫度)。室可被保留在恒溫,例如體溫,并如果需要,卵子/卵可W被保持 在室中一段時間。
[0173] -旦卵被收集,下一個階段是胚胎學家檢查和選擇最可行的卵/卵子,W備在過 程中進一步使用。如圖2中最佳所示,卵室1通過從"收集方向"至"檢查方向"約90°角 被移動/重新定向,所述"收集方向"中濾器4在卵室內大體上上水平的面中,所述"檢查方 向"中底壁3現在是下表面并且濾器4在大體上上豎直的平面上。方向的運種改變允許胚 胎學家將仍然密封的卵室1放置到顯微鏡上,卵室現在檢查方向W用于觀看。有利地,該方 向也使卵室1方便存放和移動。底壁3是透明的,且允許光進入室,當使用具有較低定位光 源的顯微鏡時(即光源被定位在卵室1的下方),運是非常有用的。存在的任何卵/卵子被 保持在第一室5中,并當卵室1處于觀看方向時,其將被擱在卵室的底面上,該底面現在是 底壁3的內表面。通過在底壁3與濾器4接觸和/或底壁3與一個或多個側壁8接觸的地 方提供傾斜表面11或半徑邊緣,卵/卵子被促進遠離第一室的邊緣,尤其遠離濾器,當卵室 1處于收集方向時,濾器是卵/卵子將最有可能已定位的地方。由于頂壁2也是透明的,因 此胚胎學家可W觀看卵室1的內含物而無需將其打開或啟封該單元。室的方向還保證了濾 器不會阻礙胚胎學家的觀看。底壁可W設置有標記或指示,例如網格圖形,W協助胚胎學家 定位卵或卵子。至此,卵/卵子將被保持在大體上上密封的流體(且更優選地液體)環境 中,具有溫度或抑值的最小化的改變或未改變和最小化的空氣進入或沒有空氣進入。
[0174]應當理解的是,雖然在運個實施方案中整個頂壁是透明的,但是可選擇的實施方 案可W使僅頂壁的窗口部分是透明的,提供足夠的尺寸W允許胚胎學家觀看第一室的內含 物。還能夠可視化第二室的內含物存在一些好處,因為在收集過程中醫生通常會希望看到 是否顯著量的血液被從卵泡中抽拉。容器的任何剩余的壁或部分可任選地也是透明或半透 明的,W允許從任何角度觀看抽吸流體。
[01巧]一旦胚胎學家已檢查卵,并確定看起來最可行的那些,然后他們可W去除卵室1 的蓋部15,所述蓋部15包括頂壁2的至少一部分,并且在圖1所述的實施方案中,所述蓋部 15包括頂壁2的全部。蓋部可W設置有突起部19,其可W由使用者握持W有利于去除蓋部 15。優選地,為了避免阻礙對室內的觀察,突起部19被定位到蓋部15的一側。在一個實施 方案中,蓋通過扭轉(旋轉)除去,而在其他實施方案中,蓋部15可W簡單地從基部16提 升離開。優選地,需要小于20度的旋轉W除去蓋子,更優選地小于10度。所述蓋子可W是 圓形或非圓形的。直到此時,蓋部15已用液密和氣密密封件密封至卵室1的基部16。運 已保證在抽吸后卵室已經是完全氣密的和流體密封的,W防止生理和環境的變化,諸如改 變抑值和溫度或進入空氣或氧氣或與污染物接觸。優選的是,運是熱密封件、防篡改帶或 娃密封件,其一旦破壞則不可再密封。運將確保卵室是單次使用的和防篡改的。在一個實 施方案中,使用保持環17將蓋15密封至基部16,如圖化中所示。所述保持環優選單次使 用,其適合于當蓋15從基部16移除時被破壞。保持環17可具有加耳片部分18,其從室向 外延伸W當需要時有利于將保持環17從室移除。因為卵室1可設置有患者標識符,因此單 次使用的室還使更容易跟蹤患者。患者標識符可W是永久識別符。隨著蓋部15被移除,胚 胎學家可W使用已知的技術用移液管取走所選擇的卵。然后,所收集的卵或卵子可W進一 步使用。
[0176]蓋的一個實施方案是壓縮配合蓋。運里,提供工具W除去該蓋。在一個實施方案 中,工具是鑰匙,當其被插入到蓋中并被旋轉時,其能夠使所述蓋被移除。在一個實施方案 中,工具的接收區域(鎖孔)位于蓋的包含流動指引裝置的區域中。 陽177] 參考圖8和9,公開了兩種略有不同的卵室的設計。在公開了優選的設計的圖9 中,上部室5的側部是直的而不是如圖8中所示的設計中是錐形的。并且,擋板形成V形, 并附接到蓋15的下側,并且蓋15的形狀匹配上部室5的形狀(即平坦的底部、平行側部變 成彎曲的拱形)。蓋15的下側也可W是加厚的,W便突出到室5中并移置室5中的液體使 得當蓋15被除去時存在更少的溢出風險。蓋15的厚度可W朝著濾器4減少,即有角度的, 使整個濾器4是可見的。此外,蓋15可W由聚苯乙締環形密封件(未示出)覆蓋,為了移 除蓋15,所述密封件應該被移除。
[0178] 加固耳片也可W位于在上部室5的外側壁上的某位置處,優選地在卵收集模式中 的頂端處。工具可W擱在加固耳片上W破壞密封件,使密封件擦開。一旦被破壞,密封環可 被剝離。密封環可W是剛性的(和脆性的),W便完整無損地脫落。當加固耳片在室的最高 點處時(在收集模式),空氣出口可優選位于室的最上部分處、加固耳片下方(在觀看模式 中)。
[0179] 此外,蓋15的上表面可包括耳片,其作為手柄W移除蓋15。耳片可優選地被定位 W便不遮擋觀看室5,例如,在擋板的直接上方(觀看模式)。其也可位于上部室5的在擋 板上方的區域中(在收集模式中),優選在中屯、的左側或右側。 陽180] 卵室的優勢 陽181] 當與現有技術相比時,卵室具有許多優點; 陽182] ?隨時控制卵的溫度(增加的細胞生存力) 陽183] ?卵一直保持在封閉的流體環境中,實現了維持穩定的抑值和最小化污染和/或 暴露于揮發性有機化合物(V0C)的風險
[0184] ?卵收集過程是連續的,即沒有必要從一個試管轉移到另一個試管。所有的卵被 收集在一個封閉室中。(更少的勞動密集,最小化污染的風險,防止熱量損失)
[0185] ?卵在室內被自動清潔(從卵泡流體中的血液分離),并且卵在干凈的流體中被 呈現給胚胎學家,因此可W輕易被識別。(節約胚胎學家的時間,更少的冷卻,減少污染的風 險)。
[0186] ?當胚胎學家準備挑出卵并且將他們放置在油下培養介質中時,在胚胎實驗室中 室只被打開一次(理想地在隔離器中)(最小化污染的風險)。
[0187] ?在收回之后,卵可保持在培養箱中的封閉的氣密室中。因此,卵收集的臨床過程 和卵的識別的胚胎學過程變得獨立。運更有效地利用臨床時間和胚胎學家的時間,并允許 實驗室和診所位置的靈活性。 陽18引 ?室可用于用緩沖介質(或鹽水)代替卵泡流體,為卵提供滲透性和抑穩定的環 境。
[0189] 從臨床醫生的角度看,該系統W與現有系統大致相同的方式運行,即可W使用現 有的針和管子收集,室可W是透明的,并且在新系統中抽吸流體可W是可見的,就像它在現 有系統中一樣。
[0190] 從胚胎學家的觀點來看,使用現有的設備(顯微鏡,護罩等),并且該皿具有與已 經使用的皿類似的尺寸。在一些實施方案中,卵可能位于與現有方法的基部不同的基部上, 但在顯微鏡下會看起來相同,并且將容易識別。 陽191] 該皿可在尺寸/形狀上與卵母細胞的選擇和清潔過程中使用的當前培養皿相似, 并且足夠大W提供最佳濾器區域。 陽19引此外,卵室可W應用于獸醫IVF市場。由于獸醫IVF經常在控制不良的環境中進 行,因此卵室的優點將是極為期望的。 陽193] 卵室的制造 陽194] 在優選的制造方法中,卵室由下列部件制成; 陽1巧]第一內室-注射成型的聚苯乙締 陽196] 第二內室-注射成型的聚苯乙締 陽197] 蓋-注射成型的聚苯乙締 陽19引 保持環-注射成型的聚苯乙締 陽199] 空氣出口連接器-機加工或注射成型的聚苯乙締 陽200] 入口和出口連接器-注射成型的聚苯乙締 陽201] 主過濾網-60μΜ尼龍網 陽202] 空氣出口過濾網-60μΜ尼龍網 陽203] 墊圈-娃密封材料
[0204] 第一內室、第二內室、蓋和保持環是由BASF所提供的聚苯乙締Luran皿-20制成 的。第一內室的目的是卵收集過程期間收集卵母細胞。一旦完成收集過程,第一內室還為 胚胎學家提供了容器來選擇和清潔卵母細胞。第一內室是在裝