是根據本發明的卵室的另一實施方案的分解透視圖;和 陽120] 圖2a示出了在收集方向(A)和檢查方向做中的卵室改變的剖視圖訊 陽12U 圖化是在收集方向(A)和檢查方向做中的卵室的另一實施方案的剖視圖訊 陽122] 圖3示出了使用試管和塞子的現有技術系統的圖;和
[012引圖4示出顯示裝填系統/沖洗系統的示意圖訊
[0124] 圖5是示出在卵母細胞收集期間溫度改變的效應的圖。介質被抽吸到常規的卵母 細胞收集室中(常規的)或抽吸到CHUMP1的原型中(CHUMP1)。W1分鐘間歇記錄溫度。 使用常規系統,溫度損失更大,回收時間也如此(η= 7 ;P<0. 001)。據信運是源自使用常規 系統增加的蒸發量;和
[0125] 圖6展示在標準的卵母細胞收集過程中所發生的冷卻和封閉的系統的潛在的好 處。發明人使用常規系統使用在生理起始溫度處的介質實施6個模擬卵母細胞的抽吸。在 打開的試管中在5分鐘的時間段內測量抽吸介質的溫度。在(A)中觀看到顯著的冷卻(藍 線)。然后,發明人用油覆蓋介質,并且顯示沒有發生運種冷卻。運確認了冷卻是由蒸發引 起的訊 陽126]圖7A-7G是示出在使用中的卵收集系統的系統圖。(A)步驟1 :將收集容器加載到 加熱塊中。鹽水和廢物袋需要被引導穿過兩個蠕動累(peri-pump),并且然后經由魯爾鎖 (luerlock)附接到收集容器。附接卵母細胞回收針。度)步驟2:用加熱的鹽溶液填充收 集容器經由腳踏開關來激活鹽水累。一旦容器充滿,接下來累流體也將裝填回收針。(C)步 驟3:-旦所述針位于正確的位置,廢物累可W被激活。運提供了收獲胚胎的吸力。(D)步 驟4:將在卵泡流體中無用的碎片經由廢物累從收集容器樣品中除去。巧)步驟5:-旦完 成收集,殘留在回收針中的任何卵泡流體均經過管道被抽出,確保所有的胚胎都在收集容 器中。(巧步驟6 :將足夠熱的鹽溶液累送到該容器中W排出任何截留的空氣。(G)步驟7 : 加熱區域的包含該收集容器的段可W被移除W用于傳輸到附近的加熱站。運將不會是"有 動力的",而將包含足夠的潛熱W圍繞空間傳輸收集容器或將收集容器傳輸至培養箱;和 陽127] 圖8是根據本發明的卵室的第一設計的平面圖;和
[0128] 圖9是根據本發明的卵室的第二優選設計;和
[0129] 圖10是示出室裝配過程的流程圖訊
[0130] 圖11是根據本發明的第Ξ個實施方案的流體累系統的簡化示意圖;和 陽131]圖12A-12D是(A)在"填充室"序列期間,度)在"沖洗"序列期間,(C)在"去除空 氣"序列期間,(D)在"收集卵"序列期間的系統的圖示,其中涂黑的系統部件表示有效系統 部件訊 陽132]圖13示出由控制器執行的簡化高級主處理流程圖;和 陽13;3]圖14A-14E是(A)控制器用戶界面,和在不同序列:做"收集卵",似沖洗,值)"高 壓"和巧)"在高壓下收集卵"中的控制器用戶界面的說明性示例;和 陽134]圖15是(a)從頂部,(b)透視圖,(c)從側部和(d)從前部所觀看的流體累系統的 說明性示例設計。
[0135] 卵室1通常在圖la和化中描述。卵室1是具有大體上平面的頂壁2和大體上平 面的底壁3的封閉容器的形式。該容器還具有適當數量的側壁8W形成多面體(應理解的 是,壁中的一個或多個可W是彎曲的,而不是平面的,如圖化中)。室的包括頂壁2的上部 是從室1的下部可分離的或可拆卸的,但是,在正常使用中在卵收集和檢查期間,卵室1的 上部和下部用液密且大體上氣密的密封件組合。
[0136] 卵室1可W通過例如注射成型、旋轉成型、擠出、真空成形、壓縮成型或者通過Ξ 維印刷來形成。
[0137] 在一個實施方案中,室1是由熱固材料的熱軟化制成的。熱軟化塑料的例子包括 丙締臘-下二締-苯乙締、聚酷胺(尼龍)、醋酸鹽(或者纖維素)、丙締酸、聚甲基丙締酸 甲醋、聚丙締、聚苯乙締、低密度或高密度聚乙締、聚氯乙締、uPVC。熱固性塑料的例子包括 聚醋樹脂、環氧樹脂和聚碳酸醋。在優選的實施方案中,該室是由聚苯乙締制成的,然而,在 另一個實施方案中,該卵室是由玻璃制成,優選由純化玻璃制成。
[0138] 室1可W用諸如納米金剛石的物質涂覆。在優選的實施方案中,上部室的至少內 部部分被涂覆。 陽139]卵室1包含濾器4,所述濾器4將容器分成第一室5 (卵收集室)和第二室6。濾 器4在頂壁2和底壁3之間延伸,有效地平分容器。在運個實施方案中,濾器4是平面的并 且從底壁3大體上垂直地延伸。在可選擇的實施方案中,濾器可W是彎曲的,然而,運不是 優選的,因為血塊和卵可在相同的地方收集,使卵更難在血塊中被識別。濾器4可WW另一 種角度,例如W與底壁3成大于25°的角度,理想地W與底壁3成25°和90°之間的角度, 并且優選地W與底壁3成70。的角度。可選擇地,角度可在45。至90。之間。濾器的孔大 小被選擇,W允許血液和其他雜物通過,但不允許卵子通過。在一個實施方案中,濾器具有 60至64微米的孔大小。由于血細胞是8-10微米,因此濾器可大于10微米,但小到足W截 留卵子。優選的是,孔大小小于將被用于例如胚胎收集裝置的孔大小。
[0140] 第一室5具有定位在側壁上的入口端口 7。優選的是,該入口被定位成使得當卵 室1被定向成用于收集使得第一室在第二室的上方且濾器4是大體上上水平的時,入口在 最高點處。可W看出的是,當在運個方向時,與第二室6相關聯的側壁朝向彼此成錐形,W 促進流體朝著位于第二室6的側壁上的出口端口 9流動。當定向成用于收集時,側壁被成 形W形成漏斗。 陽141]優選地,在"收集方向"中,出口端口將處于最低位置,W允許重力輔助所有血細胞 進入出口管中的去除。任選地,端口可在側壁上的不同位置處或在頂壁上。
[0142]優選地,第二室的尺寸應該小,W減小沖洗該室W清除血細胞所需要的流體的體 積。 陽143]流動引導裝置定位在第一室中。在優選的實施方案中,運種裝置是擋板的形式,其 可W是直線的或彎曲的,當所述裝置進入室時,所述裝置起到降低流體端流的作用。運是為 了降低卵的物理應力和促進血細胞直接移動至下部室中。在另一個實施方案中,流體引導 裝置附連到室的底部(在觀看模式中)。還可存在在除去蓋時降低流體水平面W減少流體 溢出的風險的機構。運可W例如通過將流體引導裝置并入到蓋中,使得擋板連同蓋一起從 室移除從而降低流體水平面來實現。
[0144] 在底壁3接觸濾器4處,表面略呈錐形W提供光滑的斜面11。當卵室1定位在觀 看方向時,運促進任何卵從濾器4中離開。運使所收集的任何卵更易被看到且更不可能被 隱藏在第一室的陰影的角落中。
[0145] 入口端口7和出口端口9可W是自密封端口。當該端口關閉時,卵室1是關閉的、 流體密封的和氣密的容器。該端口適合在隔離器或2類護罩內使用。
[0146] 在一個實施方案中,所述自密封端口是魯爾式或扭轉連接(twist-to-connect) 接頭。 陽147] 期望的是,該端口是醫用級并允許一只手斷開部(one hand disconnect)。更優 選地,該端口可設置有可聽斷開部(點擊),其將提醒使用者該斷開已經發生。該端口應是 無泄漏的防溢閥,其包括防止意外斷開的機構。端口應允許所連接的管轉動,因為運防止扭 結。還優選的是,該端口具有彈性體密封件。室的端口和其他元件應該是伽馬射線消毒的。
[0148] 理想地,端口應允許無隙流動路徑,該流動路徑可提供更好的流動,并消除了停滯 流動區。
[0149] 適當的自密封端口的例子包括SMC聚碳酸醋系列禪接頭(ColderPro化cts Company),其是扭轉連接的禪接頭,其提供了對魯爾式連接可靠的和更牢固的替代。當 連接時,其還允許管子自由地旋轉。另一個例子是SRC小口徑連接器(ColderPrcxlucts Company),其消除了與魯爾配件誤連接的可能性。NS4ABS系列禪接頭(ColderPro化cts Company)W緊湊的尺寸和醫療級材料的防溢閥為特征。 陽150] 可選擇地,不是自密封端口而是封管機(諸如Compo能進1磨 化iversal (化esenius K油i))可用于密封與室的入口和出口相關聯的管,W提供氣密室。 在所示實施方案中,空氣出口端口10也與第一室相關聯。再一次,運被包括在側壁上,并允 許在使用期間可進入系統的任何空氣被輕易除去。在第一室中還可W存在傳感器,其在空 氣被檢測出時關閉系統并阻止更多的空氣進入系統。 陽151] 容器的頂壁2是透明的,W允許視覺檢查容器的內含物而不用打開容器。在所示 的實施方案中,大體上上整個頂壁是透明的,運是優選的,因為其使所述第一室5和第二室 6被觀察。然而,應當理解的是,可選擇方案是僅頂壁2的一部分是透明的,條件是其允許第 一室5 (其是卵收集室)的視覺檢查。 陽152] 容器的底壁3在所描繪的實施方案中也是透明的。運保證了如果卵室1被放置在 光學顯微鏡上W用于其內含物的視覺檢查,光將能夠通過底壁3進入。此外,應當理解的 是,可選擇方案是該底壁3的一部分是透明的,條件是其允許第一室5 (其是卵收集室)的 視覺檢查。 陽153] 其中,室1包括透明和/或半透明的材料,所述材料優選是無熱源的和無毒的。更 優選地,所述材料通過內毒素、精子毒性和胚胎毒性檢測。優選地,在體外細菌內毒素檢測 中,所述材料實現了 <0. 25抓/ml,優選<0. 03抓/ml的結果。示例測試包括膠凝法、動態比 濁法和顯色方法(定量)。所述材料也將優選通過精子毒性測定法,諸如精子活力測定法 (ht1:p://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/10875871)和 / 或干細胞毒性測定。所述材料 還優選通過胚胎毒性分析。示例的測定包括胚胎干細胞測試巧ST)、斑馬魚胚胎毒性測試 狂ZET)和鼠植入后全胚胎培養(WEC)。優選地,運樣的測定的結果將是通過96小時>80% 的擴大的胚細胞。
[0154] 室1應滿足USP VI級測試要求,并可W根據醫療設備所需的標準進行滅菌。
[0155] 在未示出但由發明人設想的實施方案中,底壁可設置有網格標記或其它可見指 示,其將有助于觀看和定位在第一室內的卵。 陽156] 卵室1的尺寸被選擇為類似于臨床醫生和胚胎學家已經使用的設備,例如與胚胎 學家當前使用的典型的培養皿或收集容器類似的尺寸。尺寸還被選擇W允許卵室1適于在 顯微鏡下觀看。
[0157] 卵室將在2-16cm2之間,優選在4-lOcm2之間。
[0158] 卵室將由無毒塑料(如聚苯乙締)或玻璃制成。
[0159]卵室1優選與包括累的自動收集系統是可集成的。所述系統如圖7中所示。卵室 1配置為附接到管子,該管子經由端口將室1附接到卵收集針、沖洗流體膽存器和廢物收集 單元。卵室配置為安裝在溫度控制系統內。在一個實施方案中,溫度控制系統包括加熱塊, 該加熱塊配置為在僅一個方向接收卵室。另一個實施方案中,管子和累被收納在被溫度控 制的殼體系統中。自動收集系統包括在正確的配置中將管連接到累的機構,如編號的或用 顏色編碼的夾子,或不同長度的管子。運種機構減少或防止當將設備連接到自動收集系統 時的操作者錯誤。 陽160] 卵室1的使用如下; 陽161] 卵室1設置有附接到入口端口 7的管子12。管子12的遠端(即遠離容器的端) 被附接到收集針13。卵室還設置有附接到出口端口的第二管14。該第二管14在其遠端處 與廢物膽存器相關聯。第二管14還與抽吸累相關聯,所述抽吸累適于將流體從卵室1經過 管抽出到廢物膽存器。運種累可通過腳踏板來致動。在所有情況下,所述管子保持在切實 可行的前提下盡可能短。
[0162] 卵室1連同管子12和針13 -起都通過填有加熱的無菌液體例如鹽溶液來裝填。 在針和入口端口 7之間的管子12設有Ξ通分接頭17(圖4中所示),使得管子12也可W連 接到熱的無菌液體膽存器18W及針13和卵室1的入口端口 7。夾管閥可