結果圖。正常代表正常小鼠，植入LCC細胞Omg/kg代表肺癌腫瘤小鼠 ，Renca cell implantedOmg/kg代表腎癌腫瘤小鼠；TIAA代表給藥后植瘤建模小鼠組，TIDA代表給藥期 間植瘤建模小鼠組；1. 5mg/kg、4. 5mg/kg代表Rh2給藥濃度。圖8B顯示小鼠脾臟中Treg 細胞統計結果柱狀圖。正常代表正常小鼠，植入LCC細胞Omg/kg代表肺癌腫瘤小鼠 ，Renca cell implantedOmg/kg代表腎癌腫瘤小鼠；TIAA代表給藥后植瘤建模小鼠組，TIDA代表給 藥期間植瘤建模小鼠組；1. 5、4. 5代表Rh2給藥濃度。
[0049] 圖9顯示不同模型小鼠在不同給藥濃度下的腫瘤大小。圖9顯示第十天各組小鼠 腫瘤大小，植入LCC細胞Omg/kg代表肺癌腫瘤小鼠，Renca cell implanted Omg/kg代表腎 癌腫瘤小鼠；TIAA代表給藥后植瘤建模小鼠組，TIDA代表給藥期間植瘤建模小鼠組；1. 5、 4. 5代表Rh2給藥濃度。
[0050] 圖10顯示給藥后TIAA#肺癌腫瘤小鼠在不同給藥濃度下的腫瘤（LLC)生長曲線。 縱坐標為腫瘤體積，橫坐標為給藥天數。
[0051] 圖11顯示給藥后TIDA#肺癌腫瘤小鼠在不同給藥濃度下的腫瘤（LLC)生長曲線。
[0052] 圖12顯示給藥后TIAA#腎癌腫瘤小鼠在不同給藥濃度下的腫瘤（Renca)生長曲 線。
[0053] 圖13顯示給藥后TIDA#腎癌腫瘤小鼠在不同給藥濃度下的腫瘤（Renca)生長曲 線。
【具體實施方式】
[0054] 本發明人經過廣泛而深入地研究，首次意外地發現，在腫瘤發生諸多復雜的機制 中，人參皂苷Rh2除了通過現有技術中已知的促進腫瘤細胞凋亡以外，本發明還證明了人 參皂苷Rh2還能夠通過抑制Treg細胞，從而改善人體內T細胞的平衡，進一步加強自身免 疫功能，從而達到抗腫瘤的效果。實驗證明，人參皂苷Rh2在體外及體內均對Treg細胞有 較高的抑制作用，且還能夠有效地預防荷瘤后的Treg細胞增高，從而達到治療或預防腫瘤 的目的。在此基礎上，完成了本發明。
[0055] 術語
[0056] 如本文所用，術語"Treg細胞升高性腫瘤"、或"Treg細胞升高引起的免疫缺陷性 疾病"指的是主要由于Treg細胞升高而造成的腫瘤或免疫缺陷性疾病。在應用時，可通過 測定確診腫瘤或免疫缺陷性疾病對象的樣本（例如全血樣本）中Treg細胞在T細胞中所占 的比例（即VI)，并將VI與對照值或正常值V0比較，當VI彡2V0時，則說明該對象為Treg 細胞升高性腫瘤或為Treg細胞升高引起的免疫缺陷性疾病患者。
[0057] 優選地，所述的Treg細胞升高性腫瘤包括卵巢癌、乳腺癌、結直腸癌、胃癌、肝癌、 肺癌、腎癌、胰腺癌、淋巴瘤、黑色素瘤。
[0058] Treg細胞升高引起的免疫缺陷性疾病包括自身免疫性胃炎、關節炎、腮腺炎、結腸 炎、變態反應性腦炎和糖尿病。
[0059] 人參皂苷Rh2
[0060] 在本發明中，人參皂苷Rh2為抑制Treg細胞的活性成分。
[0061] 人參皂苷Rh2(ginsenoside Rh2,簡稱GS-Rh2)是從人參中分離得到的原人參二 醇型低糖鏈皂苷單體。人參皂苷Rh2是人參皂苷主要活性物質經水解后，最后產物中抑制 癌細胞增殖作用的能力最強的成分，具備良好的抗腫瘤活性功能，抑制腫瘤癌細胞生長。人 參皂苷Rh2可以有效增強單核巨噬細胞的吞噬功能，誘發腫瘤癌細胞凋亡。Rh2的HK細胞 活性功能，誘導腫瘤癌細胞分化。
[0062] 可用于本發明的人參皂苷Rh2優選包括20 (S)-人參皂苷Rh2、20 (R)-人參皂苷 Rh2,其結構式如下所示：
[0063]
[0064] 本發明通過大量實驗發現，在體外，人參皂苷Rh2可通過直接抑制Treg細胞的分 化、增殖從而降低Treg細胞的數量，在體內，人參皂苷Rh2也能夠通過抑制Treg細胞，從而 有效地預防和治療惡性腫瘤。因此，本發明證實，人參皂苷Rh2不僅可以用于直接抑制Treg 細胞從而治療腫瘤，更可以通過提高免疫力降低放化療的毒性，有效地減小放化療的痛苦 程度。此外，由于Treg細胞在免疫缺陷性疾病中也起到相同的作用，因此人參皂苷Rh2也 能夠通過抑制Treg細胞并調節免疫系統平衡，從而達到增強人體免疫力的效果。
[0065] T 細胞
[0066] T細胞參與細胞免疫，是淋巴細胞的主要組分，它具有多種生物學功能，如直接殺 傷靶細胞，輔助或抑制B細胞產生抗體，對特異性抗原和促有絲分裂原的應答反應以及產 生細胞因子等，是身體中為抵御疾病感染、腫瘤而形成的英勇斗士。T細胞產生的免疫應答 是細胞免疫，細胞免疫的效應形式主要有兩種：與靶細胞特異性結合，破壞靶細胞膜，直接 殺傷靶細胞；另一種是釋放淋巴因子，最終使免疫效應擴大和增強。
[0067] T細胞按照功能和表面標志可以分成很多種類，目前，接受較為廣泛的T細胞分類 如下：
[0068] 細胞毒T細胞（cytotoxic T cell):消滅受感染的細胞。這些細胞的功能就像一 個"殺手"或細胞毒素，因為它們可以對產生特殊抗原反應的目標細胞進行殺滅。細胞毒T 細胞的主要表面標志是⑶8,也被稱為殺手T細胞（NK細胞）。⑶8+T細胞，其表面表達⑶8， 可以通過MHCI與抗原直接結合參與免疫應答。
[0069] 輔助Τ細胞（helper T cell)在免疫反應中扮演中間過程的角色：它可以增生擴 散來激活其它類型的產生直接免疫反應的免疫細胞。輔助T細胞的主要表面標志是CD4。 T細胞調控或"輔助"其它淋巴細胞發揮功能。它們是已知的HIV的目標細胞，在艾滋病發 病時會急劇減少。〇)4+1'細胞，在表面表達0)4(〇1118丨61'〇€(1丨€€6代111:丨31:;[0114)，通過與 MHC II (主要組織相容性復合體，major histocompatibility complex)遞呈的多肽抗原反 應被激活。一旦激活，可以分泌細胞因子，調節或者協助免疫反應。
[0070] 調節性T細胞（regulatory T cell,Treg):負責調節機體免疫反應。通常起著維 持自身耐受和避免免疫反應過度損傷機體的重要作用。調節/抑制T細胞有很多種。
[0071] 記憶T細胞（memory T cell):在再次免疫應答中起重要作用。記憶T細胞由于 暫時沒有非常特異的表面標志，還有很多未知之處。
[0072] 調節性 T 細胞（regulatory T cell, Treg)
[0073] 調節性T細胞（regulatory T cell, Treg)是一類具有獨特免疫調節功能的T細 胞，在腫瘤免疫、抗感染免疫、免疫病理、移植物耐受、阻止自身免疫反應和維持機體免疫平 衡等方面具有重要意義。
[0074] Treg細胞在體內外具有調節功能，根據其表面標記、產生的細胞因子和作用機制 的不同，Treg 細胞可分為 CD4+Th3、CD4+Tr 1、CD4+CD25+Treg、CD4-CD8+Ts 和 NKT (自然殺傷性 T細胞）等多種亞型。在這些種類繁多的調節性T細胞中，⑶4+⑶25+Treg細胞處于極為重 要的地位。CD4+CD25+Treg細胞具有免疫無能性和免疫抑制性兩大功能特征，其免疫無能性 表現在對高濃度IL-2的單獨刺激、固相包被或可溶性抗CD3單抗或抗CD3和抗CD28單抗 的聯合作用呈無應答狀態，也不分泌IL-2,也就是說⑶4+⑶25+Treg細胞對所有傳統的T細 胞受體（T-cell receptor，TCR)介導的實驗性刺激因素均表現為無能性。而免疫抑制性則 表現在活化后能夠強有力地抑制CD4+和CD8+效應T淋巴細胞的活化、增殖及功能，這種免 疫抑制不具有MHC限制性。
[0075] 機體腫瘤狀態時Treg細胞往往呈升高趨勢，Treg是具有能識別靶細胞MHC分子所 提呈的TCR自身抗原肽，并能發揮一定的免疫抑制功能的T細胞。它作為一種專職的Treg 細胞亞群，主要發揮免疫抑制功能，通過下調機體對外來抗原或自身抗原的免疫應答水平， 來維持自身耐受。
[0076] 腫瘤患者體內Treg細胞增高的機制：
[0077] (1)腫瘤組織分泌的某些細胞因子能將⑶4+CD25T細胞直接轉變為 CD4+CD25+Treg ;
[0078] (2)腫瘤細胞能表達CCL22趨化因子，促使表達趨化因子C-C-基元受體4 (CCR4)、 趨化因子C-C-基元受體8 (CCR8)的CD4+CD25+Treg遷移到腫瘤微環境；
[0079] (3)腫瘤組織大量釋放腫瘤相關抗原（TAAs)，能被耐受性樹突狀細胞如pDC或 imDC所捕獲并提呈給Treg細胞識別，從而引起了 Treg細胞的活化、增殖；
[0080] (4)經腫瘤抗原刺激后，Treg細胞表達淋巴歸巢分子CCR7和⑶62L，從外周血回 到淋巴結，通過細胞分裂快速積聚。
[0081] 上述結果導致了由腫瘤抗原誘導的、Treg介導的特異性免疫抑制。
[0082] Treg發揮腫瘤免疫抑制作用，主要發生在兩個部位：一是在腫瘤引流淋巴結內， 這些大量增殖的Treg細胞相應地抑制了同一淋巴結中效應細胞的增殖；二是在腫瘤組織 內，增加的Treg細胞抑制了 TIL中效應T細胞殺傷腫瘤細胞的功能。
[0083] Treg細胞發揮抑制作用的分子基礎主要由：
[0084] (1)通過CTLA4依賴的直接細胞接觸抑制方式來抑制效應細胞的功能；
[0085] (2)分泌抑制性細胞因子如TGF- β或IL-10來抑制⑶4+T細胞的活化和增殖，或 者CD8+效應細胞及前體；
[0086] (3)作用APC增加色氨酸新陳代謝來抑制CD4+T細胞的活化和增殖；
[0087] (4) Treg細胞形成使效應細胞轉變成免疫抑制細胞的微環境，使一些⑶4+⑶25T細 胞能被CD4+CD25+Treg誘導并分泌TGF- β或IL-10。
[0088] Treg細胞可能還依賴這種局部微環境干擾⑶8+Τ細胞的增殖、細胞因子的分泌和 細胞毒作用的能力。同時，Treg細胞的增加可以促進腫瘤的生長，抑制腫瘤免疫效應。Treg 細胞介導的免疫抑制干預了免疫應答的各個階段。
[0089] 目前，已經確定在腫瘤發生或發展過程中會伴隨Treg細胞增長的腫瘤包括（但不 限于）卵巢癌、乳腺癌、結直腸癌、胃癌、肝癌、肺癌、腎癌、胰腺癌、淋巴瘤、或黑色素瘤。因 此，可采用本發明人參皂苷Rh2對上述Treg細胞升高性的腫瘤進行預防、治療或輔助治療。
[0090] 組合物和施用方法
[0091] 如本文所用，術語"組合物"包括（a)抑制Treg細胞的抑制劑；或（b)制備預防和 /或治療Treg細胞升高性腫瘤；和/或（c)制備預防和/或治療由于Treg細胞升高造成 的免疫缺陷性疾病的組合物。
[0092] 人參皂苷Rh2具有抑制Treg細胞的作用。因此，當在治療上施用或給予人參皂苷 Rh2時，可抑制Treg細胞的增殖、