用于治療乙肝的脂肪間充質祖細胞和脂肪基質血管成分組合物的制作方法
【技術領域】
[0001] 本發明設及脂肪干細胞應用領域，具體地，本發明提供了一種脂肪間充質祖細胞 和脂肪基質血管成分的組合用于治療乙肝的用途。
【背景技術】
[0002] 肝病分為病毒性肝病和非病毒性肝炎。病毒性肝炎主要包括甲、乙、丙、下、戊型病 毒性肝炎，非病毒性肝病主要包括酒精性肝病、藥物或毒物性肝病、新陳代謝異常性肝病、 脂肪性肝病。慢性乙型肝炎呈全球分布，可能導致包括肝功能失代償、肝硬化W及肝細胞癌 等疾病。活動性乙肝病毒（皿V)復制是肝損傷和疾病進展的主要驅動因素。
[0003] 重型乙型肝炎是感染皿V后導致的重型肝炎，其發病兇險，進展迅速，絕大部分患 者預后不良，可迅速出現大面積肝細胞壞死導致肝功能嚴重受損，肝臟代謝、排泄和解讀的 功能減退。從而導致機體免疫能力下降，造成惡性循環。目前臨床上缺乏有效的治療手段， 主要是血漿置換和肝移植，但由于供體缺乏，很多患者在等待移植供體期間死亡。因此，及 時有效的肝功能支持和促進肝細胞再生可能幫助肝功能衰竭患者無需肝移植而自行恢復 或者度過等待移植的難關。
[0004] 傳統藥物a干擾素能夠有效地抑制病毒復制，療效相對持久，但其適用的人群范 圍窄，不良反應發生率較高。而新一代的干擾素-聚乙醇化干擾素，它的療效略優于普通干 擾素，但其仍然具有使用患者群窄，不良反應發生率較高，價格較貴的缺點。拉夫米定是第 一個核巧類似物，能夠快速、持久抑制病毒復制，改善肝功能，延緩乙肝疾病進展的藥物，但 其皿eAg血清轉陰率低。文獻報道服用拉米夫定1年皿eAg血清轉陰率為16 %左右，停藥 后容易復發、病毒不能徹底清除隨治療時間延長，病毒耐藥突變的發生率增高（第1、2、3、 4年分別為14%、38 %、49 %、66 % )。阿德福韋醋長期治療耐藥發生率低，對拉米夫定耐藥 者仍有效，但其抗病毒作用較弱，起效慢，有潛在的腎毒性。恩替卡韋的抗病毒作用強，耐藥 率低，在動物實驗發現致癌性，且價格較貴。替比夫定抗病毒作用強，皿eAg轉換率高，但其 變異率較高，有肌酸激酶升高等副作用，上市時間短，抗病毒作用，長期療效和安全性都有 待證實。核巧（酸）類似藥物均不能隨便停藥，長期服用乙肝病毒輕易發生變異耐藥，也會 出現像流感樣、厭食、惡屯、、腹瀉、抑郁、屯、絞痛等副作用。而且，抗病毒治療只能抑制皿V復 審IJ，不能徹底清除病毒，也無法修復肝炎導致的肝細胞壞死。
[0005] 目前，乙肝的治療主要是抗病毒治療。而現階段的抗病毒藥物只能抑制皿V復制， 尚不能徹底清除病毒，也無法修復肝炎導致的肝細胞壞死。因此感染乙肝病毒后容易形成 慢性乙肝，有可能導致肝硬化、肝癌等發生。
[0006] 綜上所述，本領域尚缺乏一種能夠有效治療乙型肝炎，特別是能夠徹底清除乙肝 病毒，修復肝炎導致的肝細胞壞死的手段。
【發明內容】
[0007] 本發明的目的在于提供一種能夠有效治療乙型肝炎，特別是能夠徹底清除乙肝病 毒，修復肝炎導致的肝細胞壞死的手段。
[0008] 本發明的第一方面，提供了一種脂肪間充質祖細胞和脂肪基質血管成分組合物的 用途，用于制備治療乙肝的藥物組合物。
[0009] 在另一優選例中，所述的脂肪間充質祖細胞是傳代培養的脂肪間充質祖細胞。
[0010] 在另一優選例中，所述的組合物中，所述脂肪間充質祖細胞的含量為IX 1〇6/ ml-1 X loVml。
[0011] 在另一優選例中，所述的組合物中，所述脂肪間充質祖細胞與所述脂肪基質血管 成分的體積比為1:9~2:8。
[0012] 在另一優選例中，在所述組合物中，主要活性成分僅為脂肪間充質祖細胞和脂肪 來源基質血管組分。
[0013] 在另一優選例中，所述的藥物組合物包括：脂肪間充質祖細胞、脂肪來源基質血管 組分，和藥學上可接受的載體。
[0014] 在另一優選例中，所述的載體是輸液劑載體和/或注射劑載體。
[0015] 在另一優選例中，所述的治療包括選自下組的一項或多項指標改善：
[0016] 乙肝表面抗原、乙肝表面抗體、乙肝e抗原、乙肝e抗體、乙肝核屯、抗體、乙肝病毒 DNA，和 ALT。
[0017] 在另一優選例中，所述的脂肪間充質祖細胞具有選自下組的任一或多種特征： 陽〇1引 （i)80% W上的細胞具有表面抗原CD29 ;
[0019] (ii)70% W上的細胞具有表面抗原CD73 ;
[0020] (iii)60% W上的細胞具有表面抗原CD105 ;
[0021] (iv)70% W上的細胞具有表面抗原CD90。
[0022] 在另一優選例中，90% W上的細胞具有表面抗原CD29。
[0023] 在另一優選例中，80 % W上的細胞具有表面抗原CD73。
[0024] 在另一優選例中，70% W上的細胞具有表面抗原CD105。
[0025] 在另一優選例中，80 % W上的細胞具有表面抗原CD90。
[00%] 在另一優選例中，所述的脂肪間充質祖細胞具有選自下組的任一或多種特征：
[0027] (V)在細胞群中，10% W下的細胞具有表面抗原CD34 ; 陽02引 （vU在細胞群中，10% W下的細胞具有表面抗原CD45。
[0029] 在另一優選例中，5% W下的細胞具有表面抗原CD34。
[0030] 在另一優選例中，5% W下的細胞具有表面抗原CD45。
[0031] 在另一優選例中，1 % W下的細胞具有表面抗原CD34。
[0032] 在另一優選例中，1% W下的細胞具有表面抗原CD45。
[0033] 在另一優選例中，所述的基質血管組分含有選自下組的細胞因子：干細胞生 長因子（HGF)，血管內皮生長因子（VEGF)、血小板衍生因子（PDGF)、人轉化生長因子 0 aGF-e )、巨隧細胞集落刺激因子（GM-CS巧、白介素-2(比-扣、白介素-10 (比-10)、或其 任意組合。
[0034] 在另一優選例中，基質血管組分中的干細胞生長因子（服巧的濃度> 0. 5ng/ml。
[0035] 在另一優選例中，基質血管組分中的血管內皮生長因子（VEGF)的濃度> 35pg/ ml,較佳地> 40pg/ml。 W36] 在另一優選例中，基質血管組分中的人轉化生長因子e (TGF-e)的濃度 > 150pg/ml，較佳地 > 180pg/ml。
[0037] 在另一優選例中，基質血管組分中的白介素-2(比-2)的濃度> 15pg/ml，較佳地 > 20pg/ml，更佳地 > 30pg/ml。
[0038] 在另一優選例中，基質血管組分中的白介素-10(比-1〇)的濃度> 15pg/ml，較佳 地 > 20pg/ml，更佳地 > 30pg/ml，最佳地 > 40pg/ml。
[0039] 在另一優選例中，所述的基質血管組分具有選自下組的任一或多種特征： W40] a) 20% W上的細胞具有表面抗原CD29 ;
[0041] (ii)50% W上的細胞具有表面抗原CD73 ;
[0042] (iii)80% W上的細胞具有表面抗原CD49d ;
[0043] (iv) 50% W上的細胞具有表面抗原CD90 ; W44] (V) 60% W上的細胞具有表面抗原CD34 ; W45] (vU 30% W上的細胞具有表面抗原HLA-DR ;
[0046] (Vii)在細胞群中，10% W下的細胞具有表面抗原CD14 ;
[0047] (Viii)在細胞群中，20% W下的細胞具有表面抗原CD45 ;
[0048] (ix)在細胞群中，10%^下的細胞具有表面抗原4。^11。 W例在另一優選例中，30% W上的細胞具有表面抗原CD29。
[0050] 在另一優選例中，60% W上的細胞具有表面抗原CD73。
[0051] 在另一優選例中，90 % W上的細胞具有表面抗原CD49d。
[0052] 在另一優選例中，60% W上的細胞具有表面抗原CD90。
[0053] 在另一優選例中，70 % W上的細胞具有表面抗原CD34。
[0054] 在另一優選例中，35 % W上的細胞具有表面抗原HLA-DR。
[0055] 在另一優選例中，5% W下的細胞具有表面抗原CD14。
[0056] 在另一優選例中，15% W下的細胞具有表面抗原CD45。 陽057] 在另一優選例中，5% W下的細胞具有表面抗原Actin。
[0058] 本發明的第二方面，提供了一種用于預防或治療肝炎的藥物組合物，所述的藥物 組合物包括：有效量的脂