1.一種基于色素的煙草代謝組學(xué)中新鮮煙葉樣品質(zhì)量的判別方法,其特征在于:通過(guò)檢測(cè)新鮮煙葉中胡蘿卜素與葉綠素b含量,計(jì)算其比值,對(duì)煙草代謝組學(xué)中新鮮煙葉樣品質(zhì)量進(jìn)行判別;具體步驟如下:
a、稱取新鮮煙葉凍干樣品0.2~0.4g,加入25~50mL萃取劑,冰浴下超聲波萃取20~40 min,取萃取液經(jīng)0.45μm微膜過(guò)濾器過(guò)濾,濾液裝入棕色色譜瓶,待HPLC分析;
b、液相色譜的條件為:色譜柱Waters Nova-Pak-C18(3.9×150mm,4μm);柱溫30℃;柱流速0.5 mL/min;進(jìn)樣量10μL;流動(dòng)相 A:異丙醇;流動(dòng)相 B:80%乙腈的水溶液(V/V);平衡時(shí)間6min;梯度洗脫:0 min,100%B;40 min,0%B;葉綠素b檢測(cè)波長(zhǎng)428nm,其它質(zhì)體色素檢測(cè)波長(zhǎng)為448nm;采用保留時(shí)間結(jié)合標(biāo)樣的吸收光譜定性,外標(biāo)法定量;
c、通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算得出胡蘿卜素和葉綠素b的含量。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述判別的方法,其特征在于:以胡蘿卜素與葉綠素b含量的比值為指標(biāo),建立區(qū)分代謝組學(xué)正常樣品及褐化樣品的標(biāo)準(zhǔn),即待測(cè)樣品中胡蘿卜素與葉綠素b含量的比值在0.19以上的為合格樣品,用于煙草代謝組學(xué)分析,胡蘿卜素與葉綠素b含量的比值在0.19以下的為變質(zhì)的不合格樣品,不可用于煙草代謝組學(xué)分析。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述判別的方法,其特征在于:所述新鮮煙葉凍干樣品為大田采摘的新鮮煙葉,經(jīng)-196℃液氮罐保存運(yùn)輸,液氮冷凍研磨并凍干后,在-80℃冰箱保存待用的煙葉末。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述判別的方法,其特征在于:所述萃取劑是濃度為90%的丙酮溶液。