1.一種用高效液相色譜法分離測(cè)定恩格列凈及其光學(xué)異構(gòu)體的方法,包括以直鏈淀粉衍生物手性柱為色譜柱,以甲醇、乙醇和正己烷的混合物作為流動(dòng)相,或者,以纖維素衍生物手性柱為色譜柱,以乙腈與磷酸鹽緩沖溶液的混合物作為流動(dòng)相,進(jìn)行洗脫,以紫外檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,所述直鏈淀粉衍生物手性柱為直鏈淀粉-三(3-氯-4-甲基苯基氨基甲酸酯)鍵合硅膠填料柱。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,所述纖維素衍生物手性柱為纖維素-三(3-氯-4-甲基苯基氨基甲酸酯)鍵合硅膠填料柱。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,甲醇、乙醇與正己烷的體積比為16:11:73。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,乙腈與磷酸鹽緩沖溶液的體積比為25∶75~65∶35。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法,乙腈與磷酸鹽緩沖溶液的體積比為45:55。
7.根據(jù)權(quán)利要求1或5所述的方法,流動(dòng)相中磷酸鹽緩沖溶液的pH值為2~6。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,所述磷酸鹽選自磷酸二氫鈉、磷酸二氫鉀、磷酸二氫銨、磷酸氫二鈉、磷酸氫二鉀和磷酸氫二銨中的一種或多種。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,所述磷酸鹽為磷酸二氫鈉。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,進(jìn)一步包括以下步驟:
(1)取恩格列凈原料藥或其藥物組合物,加甲醇、乙醇或乙腈使恩格列凈完全溶解并稀釋定容,配制成每1ml溶液中含恩格列凈0.8~2.0mg,濾過,作為供試品溶液;
(2)以直鏈淀粉或纖維素衍生物類手性柱為色譜柱,柱溫為25~35℃,波長(zhǎng)為200~250nm;
(3)取供試品溶液5~20μl,注入高效液相色譜儀,以0.8-1 ml/min流速洗脫完成恩格列凈及其光學(xué)異構(gòu)體的分離測(cè)定。