運用二維特征的側向層析檢測的制作方法
【專利說明】運用二維特征的側向層析檢測 I.相關申請的交叉引用
[0001] 本申請請求了 2012年7月18日提交的名稱為"運用二維特征的側向層析檢測" 的美國臨時申請61/673, 156和2013年3月13日提交的名稱為"運用二維特征的側向層析 檢測"的美國發明專利申請13/802, 036的優先權。通過引用將上述申請的內容全部并入本 文。 N.技術領域
[0002] 本發明涉及運用二維特征，優選均一的二維檢測和對照特征的新型側向層析裝 置，提供層析對照信息、充當內部對照和/或為所述檢測裝置提供內部校準信息。本發明還 涉及利用所述側向層析裝置提供層析對照信息、充當內部對照和/或為所述檢測裝置提供 內部校準信息的方法。 III. 本發明的【背景技術】
[0003] 側向層析檢測已經被開發并被用于各種用途。有必要使側向層析檢測具有改善的 或更完整的對照和/或校準特征。本發明解決了這個必要以及現有技術中的相關需求。 IV. 本發明的公開內容
[0004] 一方面，本發明的公開內容提供了一種檢測裝置，所述裝置包含基質上的多個試 劑點，其中至少兩個所述試劑點不重疊且彼此充分間隔，以便當液體沿著所述基質側向層 析時，朝向、經過和/或圍繞所述兩個試劑點中一個的所述液體的流動基本上不影響朝向、 經過和/或圍繞所述另一個試劑點的所述液體樣品的流動，所述兩個試劑點中的每一個既 不是在垂直于所述液體層析方向的方向上橫跨所述基質整個寬度的試劑線，也不是環繞所 述檢測裝置的中心或樣品/液體施加位點的試劑線組成的完整的圓，并且在液體沿所述檢 測裝置側向層析并通過所述至少兩個試劑點后，在所述至少兩個試劑點上形成檢測信號從 而提供層析對照信息，充當內部對照和/或為所述檢測裝置提供內部校準信息。
[0005] 另一方面，本發明的公開內容提供了一種方法，所述方法包含：a)用上述檢測裝 置接觸液體，其中將所述液體施加到位于所述至少兩個試劑點上游的所述檢測裝置的位 點；b)向所述至少兩個試劑點輸送標記試劑；和c)在所述至少兩個試劑點上估測由所述標 記試劑產生的信號的出現、不出現、量和/或圖案，從而提供層析對照信息，充當內部對照 和/或為所述檢測裝置提供內部校準信息。
[0006] 在一些實施例中，本檢測裝置可以進一步包含指示液體樣品中分析物的存在、不 存在和/或含量的檢測位點，并且可將本方法用于進一步指示液體樣品中分析物的存在、 不存在和/或含量。任何適合的設計或裝置，包括在2011年1月18日提交的美國臨時申 請61/461,499, 2012年1月4日提交的美國專利申請13/343,681，和2012年1月17日提 交的國際專利申請PCT/US2012/021586中公開和/或請求保護的設計或裝置，可以與本設 計或裝置組合形成用于提供層析對照信息、充當內部對照和/或為所述檢測裝置提供內部 校準信息的裝置，并用來指示液體樣品中分析物的存在、不存在和/或含量。同樣，本方法 也可以與在2011年1月18日提交的美國臨時申請61/461，499,2012年1月4日提交的美 國專利申請13/343,681和2012年1月17日提交的國際專利申請PCT/US2012/021586中 公開和/或請求保護的方法結合，來提供層析對照信息，內部對照和/或為所述檢測裝置提 供內部校準信息，用于指示液體樣品中分析物的存在、不存在和/或含量。
[0007] 本檢測裝置和方法的原理可被應用或適用于現有技術中公知的側向層析檢測裝 置和分析。例如，本檢測裝置和方法的原理可被應用或適用于美國專利3, 641，235, 3, 959 ，078, 3, 966, 897, 4, 094, 647, 4, 168, 146, 4, 299, 916, 4, 347, 312, 4, 366, 241，4, 391，904, 4， 425, 438, 4, 517, 288, 4, 960, 691，5, 141，875, 4, 857, 453, 5, 073, 484, 4, 695, 554, 4, 703, 017 ，4, 743, 560, 5, 075, 078, 5, 591，645, 5, 656, 448, RE 38, 430E，5, 602, 040, 6, 017, 767, 6, 319 ，676, 6, 352, 862, 6, 485, 982, 5, 120, 643, 4, 956, 302, RE 39, 664E, 5, 252, 496, 5, 514, 602， 7, 238, 538B2, 7, 175, 992B2, 6, 770, 487B2, 5, 712, 170, 5, 275, 785, 5, 504, 013, 6, 156, 271，6 ,187, 269, 6, 399, 398, 7, 317, 532, EP 0, 149, 168A1, EP 0, 323, 605A1, EP 0, 250, 137A2, GB 1，526, 708和W099/40438中公開和/或請求保護的側向層析檢測裝置和分析。 V.【附圖說明】
[0008] 圖1A、1B和IC示出了運用層析對照特征的一些示例性檢測。如圖1A、1B和IC所 示，沿著、橫跨和/或位于層析區域的依賴于分析物的對照特征能說明該區域內檢測性能 的機械的變化。在一些實施例中，結合的特征也可以是依賴于分析物的對照特征。在兩個 示例中，可以在實際檢測運行時設置或繪制所述對照特征，并且可以在檢測的讀數時間評 估所述對照特征的信號。或者，也可以使用動力學測量。
[0009] 圖2示出了運用預期的陽性或陰性對照特征的示例性檢測。如該圖所示，所述示 例性檢測包括真陰性對照特征、用于交叉反應的對照特征、和依賴于分析物的陽性對照特 征。
[0010] 圖3A-1和3A-2示出了運用依賴于分析物的校準特征的若干示例性檢測。所述校 準特征可用于讀數器校準。所述校準特征可以是頂部示例（圖3A-1)所示的相對完整的曲 線，或是底部示例（圖3A-2)所示的已知結合特性的相對簡單的特征。
[0011] 圖3B-1和3B-2示出了運用依賴于分析物的校準特征的若干示例性檢測。頂部示 例（圖3B-1)示出了依賴于分析物的校準曲線，其中可以使用過量的分析物進行層析，并且 信號強度可以通過增加校準曲線中的結合試劑的濃度來調整。底部示例（圖3B-2)示出了 包括恒定水平的結合試劑的依賴于分析物的校準曲線。采用不同水平的結合試劑，分析物 可在多個裝置上層析，從而在所述檢測裝置的整個所需范圍建立不同的結合模式。 VI.本發明的詳細描述 A.定義
[0012] 除非另有定義，本文使用的所有技術和科學術語具有與本發明所屬領域普通技術 人員通常理解的涵義相同的涵義。本文涉及的所有專利、專利申請（公布的或未公布的）， 和其它出版物通過引用將其全部內容并入本文。如果列于本部分中的定義與通過引用并入 本文的所述專利、申請、公布的申請和其它出版物中記載的定義相反或不一致，以本部分列 出的定義為準。
[0013] 如本文所用，"a"或"an"意思是"至少一個"或"一個或多個"。
[0014] 如本文所用，"與液體層析方向基本平行的線"意思是所述線和液體層析方向之間 的角度至少小于45度或大于135度。在一些具體的實施例中，所述線和液體層析方向之間 的角度大約是40、35、30、25、20、15、10、5、4、3、2或1度，或者所述線完全平行于液體層析方 向。在其它的具體實施例中，所述線和液體層析方向之間的角度大約是140、145、150、155、 160、165、170、175、176、177、178或179度，或者所述線完全平行于液體層析方向。
[0015] 如本文所用，"線與液體層析方向基本垂直"意思是所述線和液體層析方向之間的 角度至少大于45度或小于135度。在一些具體的實施例中，所述線和液體層析方向之間的 角度大約是50、55、60、65、70、75、80、85、86、87、88或89度，或者所述線完全垂直于液體層 析方向。在其它的具體實施例中，所述線和液體層析方向之間的角度大約是130、125、120、 115、110、105、100、95