，長有氣道上皮細胞的尼龍網可以從培養皿中自由取出，用于免疫細胞化學、細胞原位雜交以及膜片鉗等方面的實驗；同時由于支撐柱與孔板焊接機械力適中，孔板上的氣道平滑肌細胞也可通過夾鑷去除支撐柱后進行上述實驗操作。(4)根據以上三點本實用新型的有益效果，應用本實用新型可以直接和間接地降低實驗成本，提高共培養成功率。
【附圖說明】
[0020]圖1是本實用新型【具體實施方式】的結構示意圖；
[0021]圖2是圖1的局部示意圖；
[0022]圖3是圖2的仰視圖。
【具體實施方式】
[0023]下面結合附圖對本實用新型作更進一步的說明。
[0024]實施例1
[0025]如圖1、圖2、圖3所示，一種氣道上皮與氣道平滑肌細胞共培養裝置，由含有多個皿狀空間4的孔板1、設于孔板I內底面的若干根立柱2、以及對應任一皿狀空間4內被立柱穩定在某一水平高度的尼龍網3組成。
[0026]孔板可選擇6孔板、12孔板、24孔板的任意一種，可選擇性地在其空間內進行細胞培養。立柱2為底部熔融狀態下焊接在皿狀空間4底面的玻璃柱，立柱2的高度不超出皿狀空間高度的1/3~1/2。
[0027]氣道平滑肌細胞種植于容器皿狀空間的底壁，氣道上皮細胞種植于尼龍網3上。培養時整個體系在培養基中。若干根立柱距其頂端1/4~1/3處設有與尼龍網間隙配合的橫向切槽5。在任一皿狀空間內，立柱切槽5的槽口方向面向皿狀空間的中心。尼龍網3為300-600目尼龍網。
[0028]利用本上述的培養裝置建立氣道平滑肌細胞和氣道上皮細胞系培養體系的處理步驟包括:
[0029](I)玻璃柱酸處理后進行高壓滅菌，然后焊接到孔板內底面；
[0030](2)冷卻后將焊接有玻璃柱的孔板紫外消毒，多聚賴氨酸包被，37° C過夜；
[0031](3)將氣道平滑肌細胞種植于孔板內底面，48 h后全量換液，以后每2~3 d換液一次；
[0032](4)氣道平滑肌細胞種植第3 d，尼龍網75%酒精浸泡30 min，紫外消毒，多聚賴氨酸包被，37° C過夜；
[0033](5)離體培養2~4 d氣道上皮細胞系種植于尼龍網，24 h后全量換液，以后每2~3d換液一次；
[0034](6)氣道平滑肌細胞種植第5 d，條件培養基預孵氣道上皮細胞系24 h，收集條件培養基；次日，條件培養基半量更換平滑肌細胞培養基，37° C孵育24 h ;
[0035](7)氣道平滑肌細胞種植第7~9 d，更換新鮮平滑肌細胞培養基6，將氣道上皮細胞系尼龍網小心反扣并卡在玻璃柱切槽內，建立體系。
[0036]實施例2
[0037]如圖1、圖2、圖3所示，本實施例為優選實施例。一種氣道上皮與氣道平滑肌細胞共培養裝置，由12孔板、玻璃柱、尼龍網組成。12孔板內有12個皿狀空間4，任一皿狀空間4內底面設有四根玻璃柱2、玻璃柱2通過底部熔融狀態焊接在皿狀空間4底面。玻璃柱2側面設有一個橫向的切槽5，槽口 5方向面向皿狀空間4的中心，尼龍網3為400目圓形尼龍網，卡在玻璃柱切槽5內被穩定在一定都高度。玻璃柱2的高度不超出皿狀空間4高度的1/3~1/2，以12孔板為例，立柱高度為6~8mm，直徑4~6mm ;切槽5位于玻璃柱2距頂端1/4?1/3處，深度2?3mm。
[0038]氣道平滑肌細胞種植于容器皿狀空間的底壁，氣道上皮細胞種植于尼龍網上。培養時整個體系在培養基6中。
[0039]以上所述僅是本實用新型的優選實施方式，應當指出:對于本技術領域的普通技術人員來說，在不脫離本實用新型原理的前提下，還可以做出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也應視為本實用新型的保護范圍。
【主權項】
1.氣道上皮與氣道平滑肌細胞共培養裝置，其特征在于包括:設有至少一個皿狀空間的容器、設于所述容器皿狀空間底面的若干根立柱、以及對應任一皿狀空間內被立柱穩定在某一水平高度的尼龍網。2.根據權利要求1所述的氣道上皮與氣道平滑肌細胞共培養裝置，其特征在于:所述容器包括6孔板、12孔板、24孔板、細胞培養皿的任意一種。3.根據權利要求1或2所述的氣道上皮與氣道平滑肌細胞共培養裝置，其特征在于:所述若干根立柱為底部熔融狀態下焊接在皿狀空間底面的玻璃柱，立柱的高度不超出皿狀空間高度的1/3~1/2。4.根據權利要求3所述的氣道上皮與氣道平滑肌細胞共培養裝置，其特征在于:所述若干根立柱距其頂端1/4~1/3處設有與所述尼龍網間隙配合的橫向切槽。5.根據權利要求4所述的氣道上皮與氣道平滑肌細胞共培養裝置，其特征在于:在任一皿狀空間內，立柱切槽的槽口方向面向皿狀空間的中心，所述尼龍網為圓形尼龍網。6.根據權利要求4所述的氣道上皮與氣道平滑肌細胞共培養裝置，其特征在于:所述尼龍網為300目~600目尼龍網。7.根據權利要求6所述的氣道上皮與氣道平滑肌細胞共培養裝置，其特征在于:所述尼龍網為400目尼龍網。8.根據權利要求3所述的氣道上皮與氣道平滑肌細胞共培養裝置，其特征在于:任一皿狀空間內的立柱設有3~6個。
【專利摘要】本實用新型公開了一種氣道上皮與氣道平滑肌細胞共培養裝置，屬于生物實驗器材領域。該細胞共培養裝置包括：設有至少一個皿狀空間的容器、設于容器皿狀空間底面的若干根立柱、以及對應任一皿狀空間內被立柱穩定在某一水平高度的尼龍網。本實用新型克服了Transwell小室氣道上皮細胞生長不易控制的問題，上皮細胞可以自由穿越尼龍網，有益于共培養體系的建立；實驗過程中尼龍網可以從培養皿中自由取出，用于后續實驗；該培養板相對于Transwell小室大大降低實驗成本，提高共培養成功率。
【IPC分類】C12M3/04
【公開號】CN204752748
【申請號】CN201520386960
【發明人】曾曉寧, 馬元, 黃茂, 許露偉, 張嘉祥, 戴望舒, 陳光宗
【申請人】曾曉寧, 馬元, 黃茂
【公開日】2015年11月11日
【申請日】2015年6月8日