一種組蛋白甲基化酶ezh2抑制劑中間體的合成方法
【技術領域】
[0001 ] 本發明設及一種組蛋白甲基化酶EZH2(enhancer of zeste homolog 2)抑制劑的 中間體的合成方法，屬于有機合成領域。
【背景技術】
[0002] 組蛋白甲基化酶EZH2是化G蛋白復合體的主要成份，是H3K27甲基化催化酶，它與 組蛋白甲基化修飾有關，通過與其他化G蛋白形成polycomb抑制復合物(PRC)而發揮轉錄抑 制作用，在胚胎發育、細胞分化和腫瘤發生中具有重要作用。EZ肥具有DNA甲基轉移酶、組蛋 白去乙酷化酶的調控作用，參與祀基因的轉錄抑制并促進細胞的增殖，且其參與的基因沉 默機制與DNA甲基轉移酶參與的基因沉默機制及組蛋白的乙酷化修飾存在交互作用。在腫 瘤細胞中EZH2為一個專口高度沉默包括抑癌基因在內的一系列祀基因的轉錄抑制因子。 EZ肥可激活干細胞特異基因及調控很多抑癌基因如pl6、p27和服CA18。
[0003] EZH2在多種腫瘤組織中高表達，如前列腺癌、乳腺癌、膀脫癌、大腸癌、肝細胞癌、 淋己瘤等，并發現EZH2表達增高與腫瘤的進展及預后相關。運就提示其可能成為一種新的 腫瘤標志物，同時成為基因治療的新祀點。其中，代表性的化合物CPI169的R型異構體具有 較好的生物活性，能抑制PRC2的催化活性，ICstKlnM,還能降低H3K27me3細胞水平，ECso為 70nM。
[0004]
[0005] 化合物1(結構如下式所示）與3-(氨基甲基)-4-甲氧基-6-甲基化晚酬鹽 酸鹽通過常規縮合方法可制備EZH2抑制劑CPI169、CPI360及其類似化合物。
[0006]
[0007]其中，Z為NH、NBoc、0、S、S〇2。對于化合物I的合成方法的報道較少， W02014124418A1，W02015010078A2，W02015023915A1W及organic letters ,2014(16)， 4114-4117中公開的方法(如下式所示），均WI-6為起始原料制備化合物I，其中化合物I-3 的制備需使用格氏試劑，反應體系要求苛刻，且產品手性選擇性不高，需要通過進一步的拆 分純化W得到單一構型的化合物1-2,但純化收率低，W(R)-叔下基4-(1-氨基乙基)贓晚- I-簇酸叔下醋的純化為例，通過與扁桃酸成鹽再游離的方法進行單一手性化合物的富集， 但純化收率僅44%;由化合物1-2制備化合物I-I時，需要使用價格昂貴、不易得的釘或鈕金 屬催化劑，使得化合物I的合成成本大大提高，且反應條件苛刻，需惰性氣體條件下IlOC攬 拌12小時，反應結束后需要通過硅膠柱層析色譜分離方法對化合物I進行分離純化，不利于 工藝放大。
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[0009] 因此需要開發一種化合物I的新的合成方法，本專利給出的方法路線短、操作簡 單，收率高，ee值高、安全性好，環境友好，成本低，有利于工藝化生產。
【發明內容】
[0010] 本發明的目的是提供一種下面通式(I)所述化合物的合成方法。
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123456 其中，Z 為NH、NBoc、0、S、S〇2。 2 本發明所述化合物I的合成方法可W用W下流程表示： 3
4 其中，Z的定義如前。 5 更具體的，本發明的制備方法包含如下過程： 6 1)步驟1:在有機溶劑中，化合物1通過還原得到化合物2;
[001 引
[0019] 所述還原劑可選自（R)-2-甲基-CBS-惡挫棚燒，（S)-2-甲基-CBS-惡挫棚燒，（R)-MeCBS-棚燒二甲硫酸，（S)-MeCBS-棚燒二甲硫酸，二氯雙(4-甲基異丙基苯基)釘-(±)-2， 2 ' -二(二-對甲苯基麟)-1，1' -聯糞，二氯化釘-1，1' -聯糞-2，2 ' -雙二苯麟，棚氨化鋼、棚氨 化裡、四氨裡侶、鈕/碳，氨氧化鈕/碳，銷/碳，氧化銷，銷/=氧化二侶，二乙基苯胺棚燒，棚 燒二甲硫酸中的一種或多種，優選(R) -MeCBS-棚燒二甲硫酸、（S) -MeCBS-棚燒二甲硫酸。所 述還原劑與化合物1的摩爾比為0.1~2:1。所述反應使用的溶劑為甲醇、乙醇、四氨巧喃，甲 苯中的一種或多種，優選四氨巧喃;所述的反應時間W檢測反應完成為止;所述的反應溫度 為-10 ~35°C。
[0020] 2)步驟2:化合物2與甲基橫酷氯在堿性條件下，得到化合物3;
[0021]
[0022] 所述反應可W為本領域此類反應的常規方法和條件，所述的堿可選自=乙胺，N, N-二異丙基乙胺，化晚，4-二甲氨基化晚二異丙胺，碳酸鋼，碳酸鐘，碳酸氨鋼，碳酸氨鐘，氨 氧化鋼，氨氧化鐘，鋼氨中的一種或多種，優選=乙胺。所述的反應時間W檢測反應完成為 止。
[0023] 3)步驟3:化合物3和化合物4通過親核取代制備化合物5;
[0024]
123 所述的親核取代方法和條件可W為本領域此類反應的常規方法和條件，所述的堿 可選自鋼氨，二(=甲基娃基)氨基裡，碳酸鐘，碳酸鋼，碳酸飽中的一種或多種，所述的溶劑 為N，N-二甲基甲酯胺，N，N-二甲基苯胺的一種或兩種。所述反應溫度為80~130°C，優選100 ~120°C。所述的反應時間W檢測反應完成為止。 2
[00%] 所述化合物4可W由市場得到，或者參考Organic Letters,2013,15(2) ,362-365 中所示方法制得。 3 4)步驟4:化合物5水解制備化合物I;
[002引
[0029] 所述的親核取代方法和條件可W為本領域此類反應的常規方法和條件。
[0030] 本發明方法的優點主要在于：
[0031] 1.公開了一類制備組蛋白甲基化酶EZH2抑制劑關鍵中間體I的合成方法，其中，Z 為NH、NBoc、0、S、S〇2;
[0032] 2.中間體I由化合物1通過還原、橫酷化、取代、水解反應方便的得到，該反應操作 簡單，后處理方便，中間不需要純化，并且四步反應收率高達73% ;
[0033] 3.通過手性還原化合物1得到高e. e.值的化合物2(e . e .值>92 % )，W達到對關鍵 中間體I的手性控制；
[0034] 4.該方法反應操作簡單、環境友好，反應原料簡單易得，適合工業生產；
[0035] 本方法是一條全新的可工業化的合成路線。同時，該路線對開發新的組蛋白甲基 化酶抑制劑具有很好的方法學意義。 具體實施例
[0036] 下面結合具體實施例，進一步闡述本發明。應理解，運些實施例僅用于說明本發明 而不用于限制本發明的范圍。下列實施例中未注明具體條件的實驗方法，通常按照常規條 件進行。
[0037] 實施例中所用的原料或試劑除特別說明之外，均市售可得。
[0038] 實施例中所述的室溫均指20-35°C。除非特別指出，所述的試劑不經純化直接使 用。所有溶劑均購自商業化供應商，例如奧德里奇(Al化ich)，并且不經處理就可使用。反應 通過化C分析和/或通過LC-MS分析，通過起始材料的消耗來判斷反應的終止。分析用的薄層 層析（TLC)是在預涂覆硅膠60 F254 0.25毫米板的玻璃板（EMD化學品公司（EMD 化emicals))上進行的，用UV光(254皿)和/或硅膠上的艦顯象，和/或與化C染色物如醇制憐 鋼酸、水合巧=酬溶液、高儘酸鐘溶液或硫酸高姉溶液一起加熱。
[0039] IH-NMR譜是在萬瑞安-默丘利-VX400(Varian Mercu巧-VX400)儀上，在400MHz操 作下記錄的。
[0040] 本發明中使用的縮寫具有本領域常規含義，如:DCM表示二氯甲燒，DMF表示N，N-二 甲基甲酯胺。
[0041] 連施例1化合物7的制備
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[0043] 將化合物6(652g，2.87mo 1)溶于甲醇（1.5L)，冰浴下分批加入棚氨化鋼（108.6g， 2.87mol)并保持反應體系溫度0-5°C，升至室溫攬拌0.5小時。將反應體系濃縮后，加入水 (3L)和甲基叔下基酸(3L)分層，水相用甲基叔下基酸（I.化X3)，合并有機相，鹽水洗涂，硫 酸鋼干燥，過濾濃縮得到無色油狀化合物7(655g)，無需進一步純化，直接用于下一步反應。
[0044] Ih NMR(400MHz，CDC13): S4.30-4.00 (m，2H)，3.65-3.50(m，1H)，2.75-2.5