本公開內容的化合物或其藥物可接受的鹽以每個成人每天約3〇yg至100yg的劑量、30 yg至500yg的劑量、30yg至10g的劑量、100yg至5g的劑量或100yg至lg的劑量施用。在經由注 射施用的情況下，其以每個成人每天約30yg至lg的劑量、100yg至500mg的劑量或100yg至 300mg的劑量施用。在兩種情況下，劑量以一次施用或分幾次施用。劑量可以被模擬，例如使 用SimcypK'程序。
[0071] 但是并不意味著向哺乳動物(包括人類)施用本公開內容的化合物要限于特定的 施用模式、劑量或給藥頻率。本公開內容涵蓋所有的施用模式，包括口服施用、腹膜內施用、 肌內施用、靜脈內施用、關節內施用、病灶內施用、皮下施用、或任何其它足以提供適于預防 或治療SLE或狼瘡腎炎的劑量的途徑。可以將本公開內容的一種或多種化合物以單劑量或 多劑量施用于哺乳動物。當以多劑量施用時，所述劑量可以彼此間隔例如幾個小時、一天、 一周、一個月或一年。應當理解，對于任何特定的對象，應當根據個體需要以及實施或指導 施用包含本公開內容的化合物的藥物組合物的人員的專業判斷，隨時間調整特定的劑量方 案。
[0072] 對于臨床應用，本公開內容的化合物通常可以靜脈內、皮下、肌內、經結腸、經鼻、 腹膜內、經直腸、經頰或口服施用。包含至少一種本公開內容的化合物(適用于人用藥物或 獸用藥物）的組合物可以以允許通過適當的途徑施用的形式存在。可以使用一種或多種藥 物可接受的佐劑或賦形劑，根據常規方法可以制備這些組合物。所述佐劑尤其包括稀釋劑、 無菌水性介質和各種無毒的有機溶劑。用于治療用途的可接受的載體或稀釋劑在制藥領域 是眾所周知的，并且例如描述于Remington:The Science and Practice of Pharmacy(第 20版），A· R·Gennaro編輯，Lippincott Wi 1 liams和Wilkins，2000，Philadelphia，以及 Encyclopedia of Pharmaceutical Technology，J.Swarbrick和J.C.Boylan編輯，1988， 1999，Marcel Dekker，New York。所述組合物可以以片劑、丸劑、顆粒劑、粉劑、水溶液或混 懸劑、可注射溶液、酏劑或糖漿的形式存在，并且所述組合物可以任選地包含選自甜味劑、 調味劑、著色劑和穩定劑中的一種或多種試劑以獲得藥物可接受的制劑。
[0073] 媒介物的選擇以及媒介物中活性物質的含量通常根據產品的溶解性和化學性質、 特定的施用模式和在藥學實踐中需遵守的規定來確定。例如，諸如乳糖、檸檬酸鈉、碳酸鈣 和磷酸二鈣的賦形劑以及諸如淀粉、海藻酸和與潤滑劑(例如，硬脂酸鎂、十二烷基硫酸鈉 和滑石粉)組合的某些復合硅酸鹽的崩解劑，可以用于制備片劑。為了制備膠囊，使用乳糖 和高分子量聚乙二醇是有利的。當使用水性懸浮液時，可以包含促進懸浮的乳化劑。還可以 使用稀釋劑，例如蔗糖、乙醇、聚乙二醇、丙二醇、甘油、氯仿或其混合物。
[0074] 對于腸胃外施用，使用本公開內容的組合物在植物油（例如，芝麻油、花生油或橄 欖油）中的乳液、懸液或溶液，藥物可接受的鹽的水性有機溶液(例如，水和丙二醇）、可注射 的有機酯（例如，油酸乙酯)或無菌水溶液。本公開內容的組合物的鹽的溶液尤其用于通過 肌內注射或皮下注射而施用。可以將包括鹽在純蒸餾水中的溶液的水溶液用于靜脈內施 用，條件是：（i)適當地調節它們的pH，（ii)用足量的葡萄糖或氯化鈉適當地緩沖并且使其 等滲，以及（iii)通過加熱、輻照或微濾對它們進行殺菌。包含本公開內容的化合物的適當 的組合物可以溶于或懸浮于適當的載體中用于噴霧器或者懸浮液氣霧劑或溶液氣霧劑，或 可以被吸收到或吸附于適當的固體載體上以用于干粉吸入器中。用于直腸施用的固體組合 物包括根據已知方法配制的栓劑，并且包含至少一種本公開內容的化合物。
[0075] 待用于治療性施用的本公開內容的化合物的劑量制劑應當是無菌的。通過經無菌 膜(例如，0.2微米膜)過濾或其它常規方法從而易于實現無菌化。制劑通常以凍干形式或作 為水溶液儲存。在一些實施方案中，本公開內容的組合物的pH例如可以為包括端值在內的3 至11，可以為5至9,或可以為7至8。
[0076] 雖然施用的一個途徑為通過口服劑量施用，但可以使用其它施用方法。例如，組合 物可以以各種劑型通過皮下、靜脈內、肌內、經結腸、經直腸、經鼻或腹膜內施用，所述劑型 例如栓劑、植入的丸劑或小圓柱劑、氣霧劑、口服劑量制劑以及諸如軟膏劑、滴劑和皮膚貼 劑的局部制劑。本公開內容的實施方案的化合物可以并入諸如植入物的成型制品中，包括 但不限于瓣膜、支架、管和假體，其可以使用惰性材料，例如合成聚合物或硅酮（例如， Silastic^組合物、硅酮橡膠或其它可商購的聚合物）。此類聚合物可以包括聚乙烯吡咯烷 酮、吡喃共聚物、聚羥基-丙基-甲基丙烯酰胺-苯酚、聚羥乙基-天冬酰胺-苯酚或被棕櫚酰 殘基取代的聚環氧乙烷-聚賴氨酸。此外，本公開內容的化合物可以與一類用于實現藥物控 釋的生物可降解的聚合物結合，所述聚合物例如聚乳酸、聚乙醇酸、聚乳酸與聚乙醇酸的共 聚物、聚ε己內酯、聚羥基丁酸、聚原酸酯、聚縮醛、聚二氫吡喃、聚氰基丙烯酸酯、水凝膠的 交聯共聚物或兩親性嵌段共聚物。
[0077] 本公開內容的化合物還可以以脂質體遞送系統的形式，例如小的單層囊泡、大的 單層囊泡和多層囊泡，來進行施用。脂質體可以由各種脂質，例如膽固醇、硬脂胺或磷脂酰 膽堿來形成。還可以使用與化合物分子偶合的抗體、抗體片段、生長因子、激素或其它靶標 部分（例如，參見Remington:The Science and Practice of Pharmacy,見上文）來遞送本 公開內容的化合物，包括與本公開內容的實施方案的化合物的血液組分體內結合。
[0078] III.合成
[0079] 提供了用于制備本公開內容的實施方案的一般合成路線和特定合成路線。本領域 的技術人員可以認識到，對這些程序進行某些改變或調整也可以合成本公開內容化合物。 在一些情況下，短語"例如/諸如"用于列舉更多的一般性化合物或結構的各種可選方案。應 當理解，"例如/諸如"不應理解為是限制性的，而且其含義與"包括，例如，但不限于" 一致。
[0080] 以下所提供的具體實例的某些條件是共有的。使用Bi〇taiiek'Emrys Liberator或 Initiator微波反應器進行微波加熱。使用Bi〇tageKSP4快速色譜系統進行柱色譜法。使用 Biichii旋轉蒸發器或GenevaeK離心蒸發器進行溶劑去除。使用氖代溶劑在Varian Unity?分光光度計上在400MHz處記錄NMR光譜。將相對于殘余質子化溶劑的化學位移進行 報告。
[0081 ]使用各種比例的一種或多種以下溶劑:EtOAc、庚烷、二氯甲烷或MeOH，在預涂有 〇. 25mm硅膠層的Whatman?玻璃板上進行薄層色譜。
[0082] 使用乂84(^6*(：18 1.7以1112.1\5〇111111柱在^^6^八。911^7*系統上對許多實例 進行LC/MS分析。溶劑A和溶劑B分別為水w/0.1 %甲酸和乙腈w/0.1 %甲酸。5分鐘總的方法 時間，5 % B至99 % B經4分鐘，流速為0.3ml/min。以電噴霧正離子模式在Waters SQD上從 100-2000amu獲得質譜數據。
[0083] 可選地，使用XBridge? C8 3·5μηι 4.6X50mm柱在Waters自動純化系統上進行純 度和質量確認。溶劑A和溶劑B分別為水w/0.1 %甲酸和乙腈w/0.1 %甲酸。6分鐘總的方法時 間，10%B至95%B經5分鐘，流速為2·5ml/min。以電噴霧正離子模式在Micromass ZQ?上從 130-1000amu獲得質譜數據。
[0084] 使用XBridge? C8 5μπι，19 X 100mm柱在Waters自動純化系統上對許多實例進行制 備型反相LC/MS。溶劑A和溶劑B分別為水w/0.1 %甲酸和乙腈w/0.1 %甲酸。12分鐘總的方法 時間，30 %B至95%B經10分鐘，流速為20ml/min。以電噴霧正離子模式在Micromass ZQ?上 從130-1000amu獲得質譜數據。
[0085] 使用以下手性柱中的一個：Chiral pak IA(5cmX 50cm 或 2cmX 25cm)、 aiiralpak? AD(2cmX 25cm)或OiiraleefODUcmX 25cm)，對許多實例進行外消旋化合物 的制備型HPLC拆分。在由相同的固定相構成的0.45cmX25cm柱（IA、AD或0D)上通過HPLC分 析來測定經純化的化合物的對映體比例。
[0086]以下闡明了用于制備本公開內容的化合物的一般方法和實驗。在某些情況下，通 過實施例描述具體的化合物。然而，應當理解，在各個情況中，根據以下所描述的方案和實 驗來制備一系列本公開內容的化合物。對于可獲得NMR和/或質譜數據的那些化合物，該數 據示于圖3中。
[0087]以下縮寫用于本文中：
[0088] 定義：以下縮寫具有所指出的含義：
[0089] AcOH:乙酸
[0090] anhyd:無水的 [0091] aq·:水性的
[0092] Bn:芐基
[0093] Boc:叔丁氧基羰基
[0094] CSA:樟腦磺酸
[0095] d:天
[0096] DAMP:危險相關分子模式
[0097] 081]:1，8-重氮雙環[5.4.0]^碳 _7_ 烯
[0098] DCE:1，2_ 二氯乙烷
[0099] DCM:二氯甲烷
[0100] DIPEA:N，N-二異丙基乙胺
[0101] DMA:N，N-二甲基乙酰胺
[0102] DMAP:4-二甲基氨基吡啶
[0103] DMF:N，N-二甲基甲酰胺
[0104] DMS0:二甲基亞砜
[0105] dsDNA:雙鏈 DNA
[0106] EDC: 1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽
[0107] ee:對映體過量
[0108] EtOAc:乙酸乙酯
[0109] EtOH:乙醇 [0110] h:小時
[0111] HATU:N，N，N'，N'_四甲基-0-(7-氮雜苯并三唑-1-基)脲六氟磷酸鹽 [0112] HC1:鹽酸
[0113] HCQ:羥氯喹
[0114] hep:正庚烷
[0115] HEPES: 4- (2-輕乙基）-1 -哌嗪乙烷磺酸
[0116] HPLC:高效液相色譜
[0117] IFN:干擾素
[0118] IPA:異丙基醇或異丙醇
[0119] K2C03:碳酸鉀
[0120] MeOH:甲醇
[0121] MgS〇4:硫酸鎂(無水的）
[0122] min:分鐘
[0123] MTBE:甲基叔丁基醚
[0124] Na2C03:碳酸鈉
[0125] Na2S〇4:硫酸鈉(無水的）
[0126] NaBH4:硼氫化鈉
[0127] NaCl:氯化鈉
[0128] NaH:分散在油中的60%氫化鈉
[0129] NaHC03:碳酸氫鈉
[0130] NaOH:氫氧化鈉
[0131] NBS:N_ 溴丁二酰亞胺
[0132] NH4C1:氯化銨 [0133] NH4C1:氯化銨 [0134] NH40H:氫氧化銨
[0135] NMP:N-甲基吡咯烷酮
[0136] Ns:對硝基苯磺酰基或鄰硝基苯磺酰基
[0137] °C:攝氏度
[0138] PAMP:病原體相關分子模式
[0139] PBMC:外周血單核細胞
[0140] PBS:磷酸鹽緩沖鹽水
[0141] pDC:漿細胞樣樹突狀細胞
[0142] PhNTf2:N_苯基三氟甲烷磺酰亞胺
[0143] qPCR:定量聚合酶鏈反應
[0144] R848:瑞喹莫德（resiquimod)
[0145] rt:室溫
[0146] sat:飽和的
[0147] SNAP: BIOTAGE?牌快速色譜柱
[0148] S0C:護理標準
[0149] SSRNA:單鏈 RNA
[0150] T3P:丙基磷酸酐
[0151] tBuOK:叔丁醇鉀
[0152] TEA:三乙胺
[0153] TEMPO: 1-氧基-2，2，6，6-四甲基哌啶
[0154] Tf:三氟甲磺酸酯
[0155] TFA:三氟乙酸
[0156] THF:四氫呋喃
[0157] TLDA: Taqmanκ 低密度陣列
[0158] TLR: Toll 樣受體
[0159] TSA:對甲苯磺酸
[0160] -般合成方法：
[0161] 根據以下方案中所示的一般合成方法制備本發明的化合物：
[0162] 方案 1
[0163]
[0164] 利用中間體3來制備至少一個實例，可以根據方案1中所描述的路線來制備中間體 3。用鹽酸輕胺處理商購的5-溴喹啉-8-甲醛1 (Fr6d6rieric de Montigny，Gilles Argouarch,Claude Lapinte，"New Route to Unsymmetrical 9，10-Disubstituted Ethynylanthracene Derivatives，" Synthesis，2006，293-298 ·)以提供月虧2。隨后在催化量 的乙酸銅存在下將2轉化為相應的腈3以提供本發明的關鍵中間體中的一種。使用以下詳述 的適當條件，通過用適當的芳香族化合物、雜芳香族化合物和飽和的雜環化合物，例如哌 啶、哌嗪和嗎啉，來取代5-溴喹啉-8-甲醛的5-位，使中間體3用于產生本發明的化合物。
[0165] 在方案2中示出了產生關鍵中間體3的替代方法，其中用乙酸鈉代替合成中第一步 的三乙胺。
[0166] 方案 2
[0167]
[0168] 在方案3中顯示了用于本發明的另一組實例化合物的方法。由適當取代的、商購的 吡啶48起始，對游離胺進行保護以提供49,此后使吡啶氮活化以形成50。使用硼氫化物或其 它還原劑對吡啶鹽還原，提供不飽和的哌啶51，然后在鈀催化劑存在下使用氫通過另外的 還原條件得到二取代哌啶，為外消旋混合物或52和53。可以通過使用一當量的手性酸(例如 (2R，3R)-2,3-二（（4-甲氧基苯甲酰基)氧基)琥珀酸)形成非對映體鹽的混合物，其中所需 的非對映體鹽從溶液中結晶出來，從而對所需的對映體進行拆分。對所得的晶體進行收集、 重結晶和脫鹽，使得獲得高度對映體過量的所需對映體53。然后使用適當的偶聯劑使53與 5-溴喹啉3偶合以提供Boc保護的54,其容易去保護成為實例55或ER-888840。可以通過使胺 55經受亞硝酸鈉而容易產生醇類似物56。
[0169] 方案 3
[0170
[0171] 如方案4和方案5所示，可以使用54或55作為關鍵中間體制備其它實例化合物。可 以通過用強堿使酰胺質子進行去質子化，然后添加適當活化的烷化劑而使54烷基化。可以 通過還原胺化方法使55烷基化以提供由一般結構57所描述的實例。還可以在適當取代的烷 基、芳基、包含適當的離去基團（LG)的基團存在下，通過使用適當的堿使55烷基化，以提供 具有如方案4所描述的一般結構57和58的單取代實例和二取代實例的混合物。
[0172] 方案 4
[017：
[0174] 使用活化的酸或使用各種酰胺或肽偶聯劑使55酰化以提供如方案5所描述的一般 結構59的酰胺。在堿性條件下使59烷基化以提供在一般結構60中所描述的實例。同樣地，可 以使用本領域的技術人員所熟悉的條件使用活化的烷基磺酰基試劑或芳基磺酰基試劑獲 得55的磺酰胺，以形成由一般結構61所描述的實例。
[0175] 方案 5
[0176]
[0177] 實例的制備
[0178] 化合物3-方案1
[0179] 向5-溴喹啉-8-甲醛1( 1.00g，4.24mmol)和鹽酸輕胺（1 · 177g, 16.94mmol)在乙腈 (110mL)中的懸浮液添加 TEA(2.362mL, 16.94mmol)，然后加熱至回流3h以提供黃色懸浮液。 在完全反應完成后冷卻至室溫，過濾沉淀物，用乙腈（50mL)沖洗濾餅。將粗固體經過用 Et0Ac(300mL)洗脫的短的硅膠墊（10g)純化，以提供黃色固體的醛肟2。
[0180]將醛聘 2(1.001g，4.0mmol)和一水合乙酸銅（II)(84.6mg，0.424mmol)在無水乙腈 (180mL)中攪拌回流12h。將完成的反應冷卻至室溫，過濾并且用H20洗滌濾墊以提供褐色固 體。將粗固體經過用DCM(lOOmL)洗脫的短的硅膠墊(約10g)純化，洗脫產物在真空中濃縮和 干燥后提供米白色固體的5-溴喹啉-8-甲腈3(0.783g，3.4mmo 1，收率為79.3%，經過兩步）。 ：Frederieric de Montigny,Gilles Argouarch,Claude Lapinte,Synthesis ,2006, 293〇
[0181] 化合物3-方案2
[0182] 在15 °C下向三水合乙酸鈉（31 · 6g，0 · 232mo 1)在Et0H( 0 · 498L)中的經攪拌的溶液 添加5-溴喹啉-8-甲醛(49 · 84g，0 · 21 lmol)，然后添加鹽酸羥胺（15 · 55g，0 · 223mol)。將所得 的混合物加熱至70°C持續3h，此后將反應冷卻至35°C，然后用水(250mL)稀釋。將混合物部 分濃縮至約250mL，此后添加水（250mL)、2-甲氧基-2-甲基丙烷（120mL)和庚烷（120mL)，然 后將混合物再濃縮至約250mL。用水(250mL)稀釋所獲得的漿料并且冷卻至0°C，此后添加1M NaOH水溶液(21 lmL)，并且將最終的混合物劇烈攪拌1 Omin。過濾懸浮液，用水(498mL)沖洗， 并且將濾餅在30°C下干燥18h以提供棕褐色粉末的醛肟2(49.75 8,0.198111〇1，93.9%收率）。
[0183] 在15 °C下向2 (48 · 21 g，0 · 192mo 1)在乙腈(386mL)中的經攪拌的懸浮液添加乙酸銅 (II) (0.523g，2.9mmo 1)，然后添加乙酸（13. lmL，0.229mo 1)。將獲得的混合物加熱至回流 21h，此后將完成的反應冷卻至50°C。添加水（0.39L)，并且將混合物部分濃縮，然后用水 (290mL)稀釋并冷卻至5°C。添加1M NaOH水溶液（230mL)，并且持續劇烈攪拌10min。過濾懸 浮液，用水（500mL)沖洗濾餅并且干燥以提供灰黑色粉末的化合物3(42.80g，0.183m 〇l， 95.6%收率）。
[0184] 使用方案3合成ER-888840
[0185] 化合物50:在17°C下向商購的5-甲基吡啶-3-胺48(17.52g，162. Olmmol)在EtOAc (52.6mL)中的經攪拌的溶液添加 DMAP(0.990g，8. lOmmol)，并且將混合物升溫至30°C，此后 將二碳酸二叔丁酯（39.5mL，170.11mmOl)在Et0A C(35.0mL)中的溶液在lh內緩慢添加至初 始反應混合物，同時控制C02釋放和溫度<40°C。將獲得的混合物在35-40Γ下再攪拌lh，然 后加熱回流18h。將最終的混合物冷卻至室溫，用甲苯（175mL)稀釋，然后添加硅膠 (17.52g)。將獲得的漿料在20-23°C下攪拌30h，然后過濾并且用Et0Ac(88mL)和甲苯(88mL) 的混合物沖洗濾餅。部分濃縮濾液至干燥以提供橙色/褐色固體的粗品（5-甲基吡啶-3-基） 氨基甲酸叔丁酯49。
[0186] 在20 °C下向粗品49在乙腈（175mL)中的經攪拌的溶液添加溴化芐（19.85mL， 167mmol)，然后加熱至回流2h。將完成的反應冷卻至室溫，用甲苯(315mL)稀釋，冷卻至0°C 并攪拌lh。過濾粗混合物，用甲苯（175mL)沖洗，并且將獲得的固體在45°C下在真空中干燥 17h以提供類白色粉末的1-芐基-3-((叔丁氧基羰基）氨基）-5-甲基吡啶-1鐵溴化物50 (35.59g，93.8mmo 1)。將濾液濃縮并懸浮于EtOAc (150mL)和乙醇（15mL)的混合物中，過濾所 獲得的固體，用EtOAc (50mL)沖洗并在真空中干燥以提供額外的50 (5.20g，13.7mmo 1，或2步 的總收率為66.4%)。
[0187] 化合物52和化合物53:在-3°C下向50(9.85g，26. Ommol)在乙醇(89ml)中的經攪拌 的溶液添加 NaBH4( 3 · 013g，79 · 6mmo 1)在Ο · 1 OMNaOH( 20ml，2 · Ommo 1)中的冷卻溶液(0 °C )，維 持溫度<3°C，此后將反應在0_3°C下攪拌3h。用MTBE(O.IOL)和水(0.05L)稀釋完成的反應， 維持溫度<l〇°C，然后添加20wt%檸檬酸（50g)，同時控制出釋放和溫度<10°C。將獲得的混 合物在5-10°C下劇烈攪拌lOmin，然后部分濃縮至約50ml。在劇烈攪拌下添加 MTBE(lOOmL)， 并且將混合物再濃縮至約50ml。用MTBE(0.10LX 2)萃取獲得的混合物，并且用水（20ml)、 9wt%NaHC03(3g)洗滌合并的有機層，濃縮，并與乙醇（每次50ml)共沸兩次。用MTBE(50ml) 稀釋獲得的混合物并且過濾。將濾液濃縮并用乙醇稀釋以調整粗品51的50.0g總重，將所述 51不需進一步濃縮或純化用于下一步。
[0188] 用H2氣體經過氫化形成52和53:用乙醇（10ml)稀釋5.0g等分的51(上述總的 10%)，并且在1.04bar H2氣體下用10wt%Pd-C(0.272g)使其經受氫化。24h之后，通過 Celite(2g)墊過濾反應混合物。用乙醇（10ml)沖洗反應器和濾餅，并且將濾液濃縮干燥以 產生白色固體的（（3S，5R)-5-甲基哌啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯52和（（3R，5S)-5-甲基吡啶-3_基）氨基甲酸叔丁酯53(0.472g，2.21mmol，85%收率，52 :53的比例為l:5-6，通過lH-NMR)o
[0189] 經過轉移氫化形成52和53:將10g等分的51 (上述總的20%)濃縮并與水（10ml)混 合，然后添加甲酸銨（3.28g，52mmol)和乙醇（20ml)。在N2氣氛下添加5wt%Pd_C(0.548g)， 此后將獲得的混合物在25-30°C攪拌20h。將完成的反應通過Celite 545(4g)墊過濾，用乙 醇（20ml)沖洗濾餅并且將濾液濃縮至干燥。添加1.0M Na0H(6ml)并且用DCM(每次40ml)對 混合物萃取兩次。用25wt % NaCl (6ml)洗滌合并的有機層，經Na2S〇4( 4g)干燥，過濾并且濃縮 以產生黃白色固體的52和53(0.844g，3.94mmol，75%收率，順式/反式3:1)。
[0190] 還可以根據所報道的方法(W02010/009014,通過引用并入本文)制備化合物52。
[0191] 53的拆分：將52和53的外消旋混合物（84g，0.392mol)懸浮于丙酮/IPA 95:5 (1596ml和84ml)中。在環境溫度下添加（2R，3R)-2,3-二（（4-甲氧基苯甲酰)氧基）琥珀酸 (L-DATA; 164g，0.392mol)，并且將所獲得的混合物攪拌過夜(20h)。通過過濾收集白色沉淀 物，用預冷卻的丙酮（1600ml)沖洗，并在真空中干燥。使回收的非對映體鹽(dr = 94.9:5.1) 經受在丙酮（1000ml)中再漿化。過濾然后干燥，產生65g 53 V2L-DATA鹽(dr = 98.5:1.5， 0.15mol，39%收率）。手性HPLC條件：Lux 3u Cellulose-4柱（00G-4490-E0)，流動相使用 90 % A (MeCN+Ο · 1 % DEA)和 10 % B (Me0H+0 · 1 % DEA)的恒溶劑混合物。
[0192] 在環境溫度下，向53 V2L-DATA鹽（156g，0.368mol)在DCM( 1248ml)中的經攪拌的 懸浮液緩慢添加1. 〇M Na0H(624ml，0.624mol)。lh之后，層被分配。用DCM( 1200ml)萃取水 層。用水（1500ml)洗滌合并的有機層，并且濃縮以產生白色固體的53(75g，0.350mol，95% 收率)。
[0193] 化合物55(ER-888840):向53(2.52g，ll .74mmol)和3(2.288,9.78臟〇1)在01^ (6.84ml)中的經攪拌的懸浮液添加 DIPEA(3.42ml)，然后加熱并回流3h。將完成的反應冷卻 至室溫，在EtOAc/正庚烷2:1 (180ml)和5wt%NaCl(60ml)之間分配，并且通過Celite 545 (5g)墊過濾。用5wt %NaCl (60ml)洗滌有機層，用Florisi 1 (7 · 7g)處理，過濾，用EtOAc (30ml)沖洗并濃縮。經過硅膠(40g，用DCM/MeOH 19:1、9:1和4:1進行逐步洗脫)純化由此所 獲得的粗產物，以提供橙色固體的（（3R，5S)-1-(8-氰基喹啉-5-基)-5-甲基哌啶-3-基)氨 基甲酸叔丁酯54,其直接用于下一反應。
[0194] 向54在DCM(20ml)中的經攪拌的溶液緩慢添加 TFA(20ml)，并再攪拌30min。將完成 的反應濃縮，在DCM( 500ml)和飽和的NaHC03 (220g)之間分配。用飽和的NaHC03 (22