la-Leu-Ser-Pr〇-Gly-Pr〇-Ala-Leu-Gly-Ala-Gly、Gln-Pr〇-Gly-Ala-Val-Ser-Gly-Ser-Ala-Ser-Thr_Pr〇-Gly、Lys_Gly_ Gly-Pr〇-Gly-Ala-Gly-Ser-Ala-Gly-Gly-Thr-Pr〇-Gly-Ala-Pr〇-Gln>Arg-Thr-Leu-Pr〇-Gly-Ser-Pr〇-Ala-Val-Leu-Leu-Gly-Gly-Gly-Pr〇-Val-Ala 、Pr〇-Gly-Gly-Ala_Gly-Val-Pro-Ala-Pro-Gly-Ala-Pro-Gln-Gly-Glu 六種小肽，總含量為 50% ~90%。
[0013] (2)鰲合反應:將氯化鋅(或葡萄糖酸鋅，或乳酸鋅，或檸檬酸銅，或葡萄糖酸銅，或 硫酸銅)溶于蒸餾水配成濃度為10~15mg/ml鹽溶液，以稀鹽酸調節pH值2~4,按鹽溶液與 豬皮小肽提取物比例8~10:1比例加入豬皮小肽提取物，攪拌溶解，在溫度為50~60 °C條件 下，螯合反應60~90分鐘，用納濾膜(截留相對分子質量為150~300Da)納濾除鹽，得到豬皮 小肽螯合物溶液。
[0014] (3)噴霧干燥得螯合物:將豬皮小肽螯合物溶液減壓濃縮至60°C相對密度為1.10 ~1.15,噴霧干燥(進風溫度為180~200°C，出風溫度為90~100°C)，得到豬皮小肽螯合物。
[0015] 經過上述方法制備的豬皮小肽螯合物，用于制備成下述制劑：： (1) 取純凈水，加入卡波姆-980NF，潤漲12h，加三乙胺調pH7.5，熟化12h，加入豬皮小肽 螯合物，加入尼泊金乙酯，吐溫-80、甘油，攪勻，制備成凝膠劑； (2) 按豬皮小肽螯合物:玉米油：蜂錯:卵磷脂比例為10:36:3:1混合物料，經膠體磨研 磨，制備成軟膠囊劑； (3) 按豬皮小肽螯合物:聚乙二醇400:丙二醇比例為10:38:2混合物料，經膠體磨研磨， 制備成軟膠囊劑； (4) 豬皮小肽螯合物，加入常規輔料，制備成口服液、膠囊劑、片劑、顆粒劑； (5)按以下處方配比，制備成乳霜化妝品： 豬皮小肽螯合物 1〇份， 乳木果油 2份， 霍霍巴油 2份， 305乳化劑(法國賽比克）2份， 甘油 10份， 卡波姆2020 0.1份， 三乙醇胺 0.1份， D-泛醇 1份， EDTA-2Na 0.1份， 水溶性氮酮 1份， 香水百合香精 0.05份， 純水 71.65份。
[0016] 但本發明不限于上述劑型。成型工藝所用的常規藥劑輔料可以用其他的性質類似 的輔料代替，如糖粉、蜂蜜、羧甲基纖維素鈉等輔助成型藥用輔料;也可與其他藥用物質合 用，共同達到促創口愈合及美容祛皺的作用。
[0017] 本發明的第二目的是提供上述豬皮小肽螯合物的用途，其具有促創口愈合及美容 祛皺的作用，其可在制備用于促創口愈合及美容祛皺的食品、保健食品、藥品及化妝品中應 用。
[0018] 本發明的有益效果是:本發明豬皮小肽螯合物，制備簡便，成本低;豬皮小肽與微 量元素協同發揮促創口愈合及美容祛皺的作用，同時具有毒副作用小、無耐藥性、不易殘留 等優點，達到綠色食品純天然的要求，能獲得良好的經濟效益。
[0019] 藥效試驗 為進一步驗證本發明豬皮小肽螯合物的促創口愈合及美容祛皺的作用，發明人進行了 藥效試驗考察，試驗方法及結果如下： 1.對大鼠皮膚機械創傷愈合的影響 (1)受試藥物 豬皮小肽銅螯合物，自制，含豬皮小肽（以總肽量計）71.8%，含銅1.37%。臨用前采用 CMC-Na溶液配成相應濃度藥液。
[0020] 豬皮小肽鋅螯合物，自制，含豬皮小肽（以總肽量計）72.4%，含鋅1.40%。臨用前采 用滅菌蒸餾水配成相應濃度藥液。
[0021 ]豬皮小肽，自制，含豬皮小肽（以總肽量計)73.8%。臨用前采用滅菌蒸餾水配成相 應濃度藥液。
[0022] 葡萄糖酸鋅，食品級，鋅含量為14.3%。臨用前采用滅菌蒸餾水配成相應濃度藥液 供灌胃。
[0023] 葡萄糖酸銅，食品級，銅含量為14.1%。臨用前采用滅菌蒸餾水配成相應濃度藥液 供灌胃。
[0024] (2)動物及飼養 ①動物種屬、來源 SD大鼠，雄性，體重180~220g，購自由山東大學試驗動物中心提供，動物合格證號： SCXK(魯）20130004。
[0025] ②飼養條件 大鼠飼養于獨立送風籠具（IVC)中，空氣潔凈度10000級，實驗室溫度24±2°C;相對濕 度60%~80%;每小時空氣交換次數：10-15次/小時;光照周期：12(日）/12(夜）小時。雌雄分開 飼養，每籠不超過5只。
[0026] 飼料：鼠全價顆粒飼料，購自江蘇省協同醫藥生物工程有限責任公司，其質量符合 GB14924.1-2001《實驗動物配合飼料通用質量標準》。
[0027] 墊料:滅菌顆粒墊料，購自江蘇省協同醫藥生物工程有限責任公司。
[0028] 飲水:飲用純化水，經酸化后自由飲用。
[0029] (3)試驗方法及結果 動物造模及分組取大鼠60只，按0.4ml/100g腹腔注射1%戊巴比妥鈉溶液麻醉，局部剪 毛備皮，消毒酒精消毒，于大鼠背部手術剪剪取直徑為2cm的圓形切口，剪開皮膚全層，至皮 下筋膜，造成機械創傷模型。
[0030] 將模型大鼠隨機分為6組，每組10只，即豬皮小肽銅螯合物組（100mg/kg)、豬皮小 肽鋅螯合物組（1 〇 〇mg/kg )、豬皮小肽組（100mg/kg )、梓檬酸銅組（1 Omg/kg )、葡萄糖酸鋅組 (10mg/kg)、空白對照組(生理鹽水）。
[0031] 給藥方式于模型造好后次日，開始給予藥物:各試驗組分別于創面涂抹(或覆以） 相應藥物，空白組于創面涂抹生理鹽水，每日2次，連續10d。
[0032] 創面愈合情況的評價每天觀察傷口愈合情況，于第10天記錄創面面積(將創面描 記在半透明紙上，再以此為模板，將質地均勻的硬紙片剪成圖樣大小，以硬紙片重量間接表 示創面面積大小，以下式計算:創面愈合率(％) =(開始創傷面積-未愈合創面面積)/開始創 傷面積)并處死大鼠，切取部分愈合創面處組織，用福爾馬林溶液固定并進行組織學檢查。 [0033]實驗結果計量資料以平均值±標準差（土S)表示，兩組樣本均數間比較用單因素 方差分析;記數資料以卡方檢驗。各實驗組的創面愈合率見表1。
[0034] 表1對大鼠皮膚機械創傷愈合的影響（土S)
注:與空白對照組比較，*P〈〇 · 05，#P〈0 · 01。
[0035] 以上試驗結果表明：豬皮小肽銅螯合物組、豬皮小肽鋅螯合物組，能明顯促進傷口 愈合，與空白對照組比較差異有顯著性意義(P〈〇.01);能明顯延長小鼠在l〇°C冷水中的游 泳時間，與空白對照組比較差異有顯著性意義(P〈〇.05)，豬皮小肽組、檸檬酸銅組、葡萄糖 酸鋅組與空白對照組比較能促進傷口愈合，且效果豬皮小肽組 > 檸檬酸銅組 > 葡萄糖酸鋅 組，但差異不顯著(P>〇.05)。說明蠶豬皮小肽螯合物作用明顯增強。
【具體實施方式】
[0036]下面列舉實施例，進一步說明本發明，各實施例僅用于說明本發明，并不限制本發 明： 實施例1 將鮮豬皮切塊，加10倍量2%碳酸鈉溶液浸泡6小時，棄去堿液，以水沖洗至近中性，加10 倍量水勻漿，加熱煮沸，待冷至約40°C，調節pH值2.0，加入1%胃蛋白酶，保溫1小時，調節pH 值8.0，加入1%胰蛋白酶，保溫3小時，煮沸15分鐘，離心，上清液通過相對分子質量為3KD的 超濾膜超濾，透過液加于DA201-C大孔吸附樹脂柱上，以水洗脫，棄去水洗液，再以90%乙醇 洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收乙醇并繼續濃縮至60°C相對密度為1.10~1.15的清膏，噴 霧干燥(進風溫度為180~200°C，出風溫度為90~100°C)，得到豬皮小肽提取物。
[0037]將檸檬酸銅溶于蒸餾水配成濃度為15mg/ml鹽溶液，以稀鹽酸調節pH值3,按鹽溶 液與豬皮小肽提取物比例8:1比例加入豬皮小肽提取物，攪拌溶解，在溫度為60°C條件下， 螯合反應90分鐘，用相對分子質量3KD的納濾膜納濾除鹽，得到豬皮小肽螯合物溶液，減壓 濃縮至60°C相對密度為1.10~1.15,噴霧干燥(進風溫度為180~200°C，出風溫度為90~ 100°C)，得到豬皮小肽螯合物。
[0038] 實施例2 將鮮豬皮切塊，加12倍量3%碳酸鈉溶液浸泡6小時，棄去堿液，以水沖洗至近中性，加12 倍量水勻漿，加熱煮沸，待冷至約45°C，調