照）。
[0061] 圖8是表示W序列編號11表示的膚的采用干擾素丫 ELISP0T測試的體外的CTL誘 導能力的評價結果的圖。縱軸表示每500000個接種細胞的斑點數。A表示利用HLA-A*02:01 基因導入小鼠的試驗結果，B表示利用化A-A*24:02基因導入小鼠的試驗結果。此外，黑柱 ("w/Peptide")和白柱（"w/o Peptide")分別表示將來源于給膚小鼠的脾細胞在存在給予 膚的條件下和不存在給予膚的條件下再次刺激培養的結果。即，黑柱和白柱的值的差表示 通過各膚的給予而在小鼠體內誘導的膚特異性CTL的數量。
[0062] 圖9是表示W序列編號11表示的膚的采用人外周血單核細胞的CTL誘導能力的評 價結果的圖。A表示利用來源于HLA-A*02:01陽性健康人的外周血單核細胞的試驗結果，B表 示利用來源于HLA-A巧4:02陽性健康人的外周血單核細胞的試驗結果。黑柱和白柱表示再 刺激和非再刺激的結果。即，黑柱和白柱的值的差表示通過膚的刺激培養而誘導的膚特異 性CTL的數量。縱軸表示各孔中確認的斑點數，橫軸表示陽性的各孔。此外，黑柱表示在膚刺 激條件下檢測到的斑點數，白柱表示在膚非刺激條件下檢測到的斑點數(對照）。
[0063] 實施發明的方式
[0064] (1)本發明的膚
[0065] 本發明中，"表位膚"是指與MHC(人為HLA)結合而被抗原遞呈至細胞表面的膚。表 位膚中包括作為與MHCI類結合而抗原遞呈并被CD8陽性T細胞識別的表位膚的CTL表位膚和 作為與MHCII類結合而抗原遞呈并被CD4陽性Τ細胞識別的表位膚的輔助表位膚。
[0066] 表位膚中來源于腫瘤細胞中特異性或過度表達的蛋白質的膚特別成為腫瘤抗原 膚。抗原遞呈是指細胞內存在的膚與MHC結合，該MHC/抗原膚復合物集中分布于細胞表面的 現象。如上所述，已知被遞呈至細胞表面的抗原被Τ細胞等識別后，激活細胞免疫或體液免 疫，被MCHI類遞呈的抗原激活細胞免疫的同時，被初始Τ細胞的Τ細胞受體識別，將初始Τ細 胞誘導為具有細胞毒性的CTL，因此作為用于免疫療法的腫瘤抗原膚，較好是與MHCI類結合 而抗原遞呈的膚。
[0067] 本發明中，"腫瘤（tumorT包括良性腫瘤和惡性腫瘤（癌，惡性新生物）。癌 (cancer)包括造血器官的腫瘤、上皮性的惡性腫瘤(癌，carcinoma)和非上皮性的惡性腫瘤 (肉瘤，sarcoma)。
[006引本發明的膚在一種形態中為序列編號2中記載的人0R7C1的部分膚，包括與MHC、特 另鳩HLA結合的膚，較好是被Μ肥、特別是HLA抗原遞呈的膚，更好是被Μ肥、特別是HLA抗原遞 呈的可誘導CTL的膚。HLA存在數種型，本發明的膚較好是可與HLAI類結合，更好是可與HLA-Α02結合，進一步更好是可與HLA-A02和HLA-A24兩者結合。本發明的膚可在與MHC結合之自IJ 經過加工(processing)等處理，運些結果后生成表位膚等膚也包括在本發明的膚內。因此， 本發明的膚只要是包含表位膚的氨基酸序列的序列即可，氨基酸長度無特別限定。然而，較 好是本發明的膚本身為表位膚，因此氨基酸長度較好是約9~約11個氨基酸左右。
[0069] 本發明的膚在優選的一種形態中包括由與序列編號3、序列編號4、序列編號5或序 列編號6中記載的氨基酸序列相同的氨基酸序列形成的膚，較好是運些氨基酸序列均為上 述0R7C1的部分膚。更好是由與序列編號3、序列編號4、序列編號5或序列編號6中記載的氨 基酸序列相同的氨基酸序列形成的膚。W序列編號3~6表示的膚分別為由上述0R7C1的氨 基酸位置117~126的10個氨基酸、276~285的10個氨基酸、118~126的9個氨基酸、34~34 的11個氨基酸形成的膚，本發明人發現運些膚均可與HLA-A02和HLA-A24兩者結合。
[0070] 本發明的膚可W是其N末端和/或C末端被修飾的膚。作為該修飾，具體可例舉N-燒 酷基化(例如乙酷基化）、N-烷基化(例如甲基化）、C末端烷基醋（例如乙醋)和C末端酷胺(例 如簇酷胺)等。
[0071] 本發明的另一種形態中，本發明的膚中包括由作為與MHC、特別是HLA結合的0R7C1 的部分膚的氨基酸序列中N末端和/或C末端添加有1個~數個氨基酸的氨基酸序列形成的 膚。特別優選的形態是由在W上述序列編號3、序列編號3、序列編號4、序列編號5或序列編 號6表示的氨基酸序列中N末端或C末端添加有1個~數個氨基酸的氨基酸序列形成的膚。N 末端或C末端添加的"1個~數個氨基酸"具體是指1~5個氨基酸，例如可例舉1個、2個、3 個、4個或5個氨基酸，特別好是1個。
[0072] 此外，本發明的另一種形態中，本發明的膚中也包括由作為與MHC、特別是HLA結合 的0R7C1的部分膚的氨基酸序列中將C末端的氨基酸、N末端的氨基酸和/或第2個氨基酸、較 好是C末端的氨基酸置換為疏水性氨基酸的氨基酸序列形成的膚。特別優選的形態是由在 W上述序列編號3、序列編號3、序列編號4、序列編號5或序列編號6表示的氨基酸序列中將C 末端的氨基酸和/或第2個氨基酸、較好是C末端的氨基酸置換為疏水性氨基酸的氨基酸序 列形成的膚。本發明中，"疏水性氨基酸"是指不具有分子內極性的氨基酸，其中較好是作為 天然氨基酸的甘氨酸、丙氨酸、鄉氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、甲硫氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸和色 氨酸。本發明中，運些疏水性氨基酸中特別好是亮氨酸、鄉氨酸和異亮氨酸。因此，該形態中 優選的膚包括C末端的氨基酸被置換為亮氨酸、鄉氨酸或異亮氨酸的膚，例如序列編號3的 膚中將C末端的鄉氨酸置換為異亮氨酸的膚(序列編號11)等。序列編號11的氨基酸序列與 由人0R7C1基因（Genbank登錄號NM_198944,序列編號1)的堿基序列中第376位的鳥嚷嶺(G) 被置換為腺嚷嶺(A)的單核巧酸多態性突變體的核巧酸序列所編碼的多膚（即，W序列編號 表示的氨基酸序列中126位的鄉氨酸(V)被置換為異亮氨酸的突變體）中的氨基酸位置117 ~126的部分膚的氨基酸序列一致。
[0073] 本領域技術人員應理解可將上述的N末端和/或C末端添加 1個~數個氨基酸的改 變和將C末端的氨基酸、N末端的氨基酸和/或第2個氨基酸置換為疏水性氨基酸的改變組 合。因此，本發明的膚中也包括由作為與MHC、特別是HLA結合的0R7C1的部分膚的氨基酸序 列中將C末端的氨基酸、N末端的氨基酸和/或第2個氨基酸、較好是C末端的氨基酸置換為疏 水性氨基酸的氨基酸序列形成的膚的N末端和/或C末端添加有1個~數個氨基酸的氨基酸 序列形成的膚。其中，較好是W序列編號11表示的膚的N末端和/或C末端添加有1個、2個、3 個、4個或5個氨基酸、特別好是1個氨基酸的膚。
[0074] 對于本發明的膚的合成，可按照通常的膚化學中所用的已知方法進行。作為所述 已知的方法，可例舉文獻（Peptide Synthesis，Interscience，New York，1966 ; The P;roteins，Vol 2，Academic Press Inc.，New 化rk，1976;膚合成，丸善株式會社，1975;膚 合成的基礎和實驗，丸善株式會社，1985;醫藥品的開發續第14卷；膚合成，廣川書店， 1991;運些文獻通過引用而構成本申請的一部分)等中所記載的方法。
[0075] 本發明的膚可通過后述的CTL誘導方法或供于采用人模型動物的測試（W002/ 47474號公報、Int J. Cancer: 100，565-570 (2002))等來確認體內的活性。
[0076] 本發明的膚中還包括將包含至少1條所述本發明的膚的多條表位膚連結而成的膚 (多表位膚）。因此，具有CTL誘導活性的該多表位膚也可作為本發明的膚的具體例子示例。
[0077] 本發明的多表位膚可定義為作為
[0078] (i)將本發明的膚(表位膚)和任意的除本發明的膚W外的1條或2條W上的CTL表 位膚直接或適當介W間隔物連結而成的膚、
[0079] (ii)將本發明的膚和任意的1條或2條W上的輔助表位膚直接或適當介W間隔物 連結而成的膚、或者
[0080] (iii)在上述（i)中記載的多表位膚上進一步直接或適當介W間隔物連結1條或2 條W上的輔助表位膚而成的膚，
[0081] 在抗原遞呈細胞內接受加工，生成的表位膚被遞呈至抗原遞呈細胞，從而產生CTL 誘導活性的膚。
[0082] 在此，作為（i)中的除本發明的膚W外的CTL表位膚，無特別限定，具體可例舉來源 于0R7C1的膚(例如，國際公開文本:W02010/050190中所記載的膚）。
[0083] 作為間隔物，只要是不對抗原遞呈細胞內的加工產生不良影響即可，無特別限定， 較好是與各表位膚通過膚鍵連結的連接物，可例舉例如若干個氨基酸連結而成的膚連接序 列或兩端具有氨基和簇基的連接物等。具體來說，可例舉甘氨酸連接物和PEG(聚乙二醇)連 接物等，甘氨酸連接物可例舉聚甘氨酸（例如由6個甘氨酸形成的膚;Cancer Sci，103卷， 150-153頁），PEG連接物可例舉來源于PEG的兩端具有氨基和簇基的化合物的連接物(例如 出N-(CH2)廣（OOfcC出）3-COOH;Angew. Chem. Int.Ed. 2008，47，7551-7556)。
[0084] 本發明的多表位膚所包含的本發明的表位膚可選擇1種或巧中W上。即，可W是多 條同樣的表位膚連結而成，也可W是多條不同的表位膚連結而成。選擇巧巾W上的表位膚的 情況下，當然也可W是所選擇的表位膚中的1種或2種W上多條連結。對于除本發明的膚W 外的表位膚，同樣也可W是多種和/或多條表位膚連結。本發明的多表位膚可W是2~12條 表位膚連結而成,較好是2條、3條、4條、5條、6條、7條、8條、9條、10條、11條、12條表位膚連結 而成，最好是2條表位膚連結而成。
[0085] 在此，與本發明的膚連結的表位膚為輔助表位膚的情況下，作為所用的輔助表位 膚，可例舉例如來源于乙型肝炎病毒的皿VC128-140和來源于破傷風毒素的TT947-967等。 此外，作為該輔助表位膚的長度，可例舉13~30個氨基酸左右、較好是13~17個氨基酸左 -6" 〇
[0086] 運樣的使多條表位膚連結而成的膚（多表位膚)也可如前所述通過通常的膚合成 法制造。此外，還可基于編碼運些使多條表位膚連結而成的多表位膚的多聚核巧酸的序列 信息，用通常的DNA合成和基因工程的方法制造。
[0087] 目P，可通過將該多聚核巧酸插入周知的表達載體，培養用所得的重組表達載體轉 化宿主細胞而制成的轉化體，從培養物中回收作為目標的使多個表位連結而成的多表位膚 來制造。運些方法可如前所述按照文獻（Molecular Cloning , T . Maniati S等，CSH Laboratory(1983)、DNA Cloning,DM.Glover，IRL PRESS( 1985))中記載的方法等進行。
[0088] 如上制成的時多條表位膚連結而成的多表位膚可通過供于所述的體外測試或者 W002/47474號公報和Int J.Cancer:100,565-570(2002)(運些文獻通過引用而構成本申請 的一部分）中記述的采用人模型動物的體內測試等來確認CTL誘導活性。
[0089] 如本說明書中所記載，本發明的膚(包括多表位膚)對癌癥的預防和/或治療有用， 可作為醫藥組合物的有效成分。此外，本發明的膚可用于癌癥的預防和/或治療。另外，本發 明還設及用于癌癥的預防和/或治療的醫藥品的制造中的本發明的膚的用途。
[0090] (2)本發明的多聚核巧酸
[0091] 本發明的多聚核巧酸包括編碼所述本發明的膚中的至少1個的多聚核巧酸。本發 明的多聚核巧酸可W是cDNA或mRNA、cRNA或者合成DNA中的任一種。此外，可W是單鏈和雙 鏈中的任一種形態。具體來說，可例舉例如由編碼序列編號3、序列編號4、序列編號5、序列 編號6或序列編號11中記載的氨基酸序列的核巧酸序列形成的多聚核巧酸W及由分別W可 表達的方式編碼選自序列編號3、4、5、6和11的任意2條W上的膚或使選自序列編號3、4、5、 6和11的膚與輔助表位連結而成的多表位膚的核巧酸序列形成的多聚核巧酸等。
[0092] 本發明的多聚核巧酸可呈單鏈和雙鏈中的任一種形態。本發明的多聚核巧酸為雙 鏈的情況下，可通過將所述本發明的多