單個技術特征效果的簡單疊加。
【具體實施方式】
[0049] 下面通過具體的實施方案敘述本發明。除非特別說明,本發明中所用的技術手段 均為本領域技術人員所公知的方法。另外,實施方案應理解為說明性的,而非限制本發明的 范圍,本發明的實質和范圍僅由權利要求書所限定。對于本領域技術人員而言,在不背離本 發明實質和范圍的前提下,對這些實施方案中的物料成分和用量進行的各種改變或改動也 屬于本發明的保護范圍。
[0050] 本發明所述真空離心機為美國奧博塔公司生產的高速真空冷凍離心機, 產品型號為:HTC-30000I,最大轉速:30000RPM,最大離心力:101625Xg,最大容量: 1000mlX6Tubes。
[0051] 本發明所述產喊桿菌Alcaligenessp.S-XJ-1為中國專利CN101407769B所公 開的破乳菌,該菌已于2007年8月24日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生 物中心,保藏編號為CGMCCN0. 2142。
[0052] 本發明所述胞壁結合型生物破乳劑為中國專利CN103785196B所公開的生物破 乳劑。
[0053] 本發明所述葡萄籽原花青素購買于河南安陽晶森生物科技有限公司,有效成分: OPC/Polyphenol,Assay0PC95%/polyphenol90%〇
[0054] 本發明銀杏葉提取物購買于徐州恒凱銀杏制品有限公司,中國藥典2010版銀杏 葉提取物,總黃酮醇苷彡24%,產品注冊商標:公孫堂GinkgoTown。
[0055] 本發明所述迷迭香提取物購買于河南森源本草天然產物股份有限公司,主要成 分:迷迭香酸、迷迭香酚等,含量85%,注冊商標森源本草。
[0056] 本發明所述甘草提取物購買于西安源森生物科技有限公司,主要成分:甘草酸、甘 草甙等,含量98 %,注冊商標源森生物。
[0057] 本發明茶多酚購買于西安瑞林生物公司生產的綠茶茶多酚,茶多酚含量98%,注 冊商標瑞林生物。
[0058] 實施例1原料制備
[0059] 1.中草藥提取物的制備:
[0060] 所述中草藥提取物的制備方法,包括如下步驟:按重量份數計,稱取甘草16份,黃 芪15份,淫羊藿14份,干姜13份,白芷10份,黨參6份;置盛有0. 2 %碳酸氫鈉溶液的超 聲波清洗機中于200W、30KHz清洗12min,瀝干,將上述中草藥粉碎至粒徑為2mm以下,置容 器中均勻混合并添加5倍重量的水,得混合物料,控制溫度80°C保持3h,接著降溫至45°C, 用乳酸調節pH值為4. 0,在功率200W條件下進行微波提取12min,同時在功率250W,頻率 35KHz條件下進行超聲波輔助提取;然后加入混合物料總重量1. 0%的復合酶進行酶解,用 乳酸調節pH值為6. 2,酶解3h,最后添加混合物料2倍重量乙醇和丙醇的混合物,乙醇和丙 醇混合的質量比為1:2,控制溫度至70°C保持3h,過濾,得第一濾液;添加濾渣2倍重量的 水,控制溫度90°C保持2h,然后降溫至30°C,過濾,得第二濾液;將第一濾液和第二濾液按 照質量比3:2合并,均勻混合,即得中草藥提取物;
[0061] 所述復合酶為葡聚糖酶、戊聚糖酶、木聚糖酶、單寧酶按質量比3:3:2:2均勻混 合。
[0062] 以下實施例所使用的中草藥提取物均為實施例1制備,其它均為市購商品。
[0063] 實施例2
[0064] -種氰化物殘留量低的苦杏仁油的提取方法,包括如下步驟:
[0065] 1)微波輻照滅酶:將苦杏仁浸入質量百分比濃度為0. 1 %的碳酸氫鈉溶液中室溫 漂洗、瀝干,置容器中密封靜置潤濕3h,然后脫皮,將脫皮苦杏仁放入微波干燥機中于頻率 2450MHz、功率2000W、溫度85°C、料層厚度4cm條件微波輻照滅酶3min,其中微波輻照10s, 間隔20s;
[0066] 2)冷凍破碎:經微波輻照滅酶后的苦杏仁在質量百分比濃度為0. 2%的檸檬酸溶 液中室溫浸泡1. 5h,清水漂洗2次,瀝干,于-23 °C、料層厚度9cm冷凍2h,破碎至粒徑0. 3mm 得苦杏仁粉;
[0067] 3)酶解:向苦杏仁粉中加入其質量4倍的pH值為5. 5的離子溶液,均勻混合,控 制混合物料溫度為50°C,向其中加入苦杏仁粉質量0. 04%的復配酶,攪拌均勻,保溫,酶解 50min;
[0068] 所述離子溶液為含有鈉離子30mg/L、鎂離子22mg/L、鋅離子22mg/L、鉀離子20mg/ L和鈣離子13mg/L的水溶液;
[0069] 所述復配酶的質量組成為:酸性蛋白酶:纖維素酶:果膠酶:β-葡聚糖酶:淀粉 酶=13:3:2:2:1. 5 ;
[0070] 4)真空離心:將酶解液置真空離心機中真空度-0. 02MPa、15°C、7000r/min真空離 心6min,自上而下分離得到游離油、乳狀液、水解液和苦杏仁渣,將得到的乳狀液控制溫度 為40°C,添加乳狀液質量6%的生物破乳菌培養液破乳50min,破乳后于真空度-0. 02MPa、 15°C、2500r/min再次真空離心12min得到游離油,合并所得的游離油,加入其質量0. 02% 的天然抗氧化劑,均勻混合即得苦杏仁油;
[0071] 所述生物破乳菌培養液的制備方法為:將產堿桿菌Alcaligenessp.S-XJ-1的試 管斜面菌種活化后接種1環于100mL肉湯培養基中,33°C、125r/min搖床培養30h,然后接 種于2000mL種子培養基中,33°C、115r/min搖床培養42h,得到種子液,將種子液以體積比 7%的接種量接種于裝有201^發酵培養基的氣升式發酵罐中,于37°(:、通氣量3171^11恒溫 敞口發酵5處,然后以0.7°(:/11的速率降溫至30°(:,繼續將種子液以體積比3%接種量追 加接種,閉罐發酵27h,保持罐壓0. 02MPa,最后以0. 9°C/h的速率升溫至37°C,通氣量2L/ min恒溫敞口發酵27h即得生物破乳菌培養液;
[0072] 所述肉湯培養基組成為:牛肉膏5. 0g,蛋白胨10. 0g,酵母膏5. 0g,NaC15. 0g,葡 萄糖10. 0g,蒸餾水1L,pH值7. 0 ;
[0073] 所述種子培養基組成為:ΝΗ4Ν034· 0g,Κ2ΗΡ044· 0g,ΚΗ2Ρ046 · 0g,MgS04 · 7H20 0· 2g, FeS04 · 7H201mg,NaCl25g,CaCl2 · 2H20 0· 8mg,乙二胺四乙酸 1. 3mg,中草藥提取物 2g,蒸 餾水1L,pH值7. 0,碳源為菜籽油,以培養基體積比2 %添加;
[0074]所述發酵培養基組成為:ΝΗ4Ν034· 0g,Κ2ΗΡ044· 0g,ΚΗ2Ρ046 · 0g,MgS04 · 7H200·2g, FeS04 · 7H201mg,NaCl25g,CaCl2 · 2H20 0· 8mg,乙二胺四乙酸 1. 3mg,中草藥提取物 3. 5g, 蒸餾水1L,pH值7. 0,碳源為菜籽油,以培養基體積比4 %添加;
[0075] 所述天然抗氧化劑的質量組成為:茶多酸:葡萄籽原花青素:Vc= 2. 5:2:1. 5。
[0076] 上述方法制備苦杏仁油的提取率為97% ;苦杏仁油中氰化物的殘留量為0.04mg/ kg;室溫、通風、避光條件下苦杏仁油的保質期為6年;生物破乳的破乳率為99. 3%。
[0077] 實施例3
[0078] -種氰化物殘留量低的苦杏仁油的提取方法,包括如下步驟:
[0079] 1)微波輻照滅酶:將苦杏仁浸入質量百分比濃度為0. 05%的碳酸氫鈉溶液中室 溫漂洗、瀝干,置容器中密封靜置潤濕2h,然后脫皮,將脫皮苦杏仁放入微波干燥機中于頻 率2450MHz、功率1000W、溫度80°C、料層厚度3cm條件微波輻照滅酶2min,其中微波輻照 10s,間隔 20s;
[0080] 2)冷凍破碎:經微波輻照滅酶后的苦杏仁在質量百分比濃度為0. 1 %的檸檬酸溶 液中室溫浸泡lh,清水漂洗1次,瀝干,于-20°C、料層厚度8cm冷凍1. 5h,破碎至粒徑0. 2mm 得苦杏仁粉;
[0081] 3)酶解:向苦杏仁粉中加入其質量3倍的pH值為4. 5的離子溶液,均勻混合,控 制混合物料溫度為45°C,向其中加入苦杏仁粉質量0. 03%的復配酶,攪拌均勻,保溫,酶解 40min;
[0082] 所述離子溶液為含有鈉離子28mg/L、鎂離子20mg/L、鋅離子20mg/L、鉀離子18mg/ L和鈣離子12mg/L的水溶液;
[0083] 所述復配酶的質量組成為:酸性蛋白酶:纖維素酶:果膠酶:β-葡聚糖酶:淀粉 酶=10:2:1:1:1 ;
[0084] 4)真空離心:將酶解液置真空離心機中溫度10°C、真空度-0. 01MPa、6000r/min真 空離心5min,自上而下分離得到游離油、乳狀液、水解液和苦杏仁渣,將得到的乳狀液控制 溫度為30°C,添加乳狀液質量5%的生物破乳菌培養液破乳40min,破乳后于溫度10°C、真 空度-0. 01MPa、2000r/min再次真空離心10min得到游離油,合并所得的游離油,加入其質 量0. 01 %的天然抗氧化劑,均勻混合即得苦杏仁油;
[0085] 所述生物破乳菌培養液的制備方法為:將產堿桿菌Alcaligenessp.S-XJ-1的試 管斜面菌種活化后接種1環于100mL肉湯培養基中,30°C、120r/min搖床培養24h,然后接 種于2000mL種子培養基中,30°C、110r/min搖床培養36h,得到種子液,將種子液以體積比 7%的接種量接種于裝有201^發酵培養基的氣升式發酵罐中,于35°(:、通氣量2171^11恒溫 敞口發酵481!,然后以0.6°(:/11的速率降溫至28°(:,繼續將種子液以體積比3%接種量追 加接種,閉罐發酵24h,保持罐壓0.OIMPa,最后以0. 8°C/h的速率升溫至35°C,通氣量1L/ min恒溫敞口發酵24h即得生物破乳菌培養液;
[0086] 所述肉湯培養基組成為:牛肉膏5. 0g,蛋白胨10. 0g,酵母膏5. 0g,NaC15. 0g,葡 萄糖10. 0g,蒸餾水1L,pH值7. 0;
[0087] 所述種子培養基組成為:ΝΗ4Ν034· 0g,Κ2ΗΡ044· 0g,ΚΗ2Ρ046 · 0g,MgS04 · 7H20 0· 2g, FeS04 · 7H201mg,NaCl25g,CaCl2 · 2H20 0· 8mg,乙二胺四乙酸 1. 3mg,中草藥提取物lg,蒸 餾水1L,pH值7. 0,碳源為菜籽油,以培養基體積比2 %添加;
[0088] 所述發酵培養基組成為:ΝΗ4Ν034· 0g,Κ2ΗΡ044· 0g,ΚΗ2Ρ046 · 0g,MgS04 · 7H20 0· 2g, FeS04 · 7H201mg,NaCl25g,CaCl2 · 2H20 0· 8mg,乙二胺四乙酸 1. 3mg,中草藥提取物 2g,蒸 餾水1L,pH值7. 0,碳源為菜籽油,以培養基體積比4 %添加;
[0089] 所述天然抗氧化劑的質量組成為:茶多酸:葡萄籽原花青素:Vc= 2:1:1。
[0090] 上述方法制備苦杏仁油的提取率為96. 5 %;苦杏仁油中氰化物的殘留量為 0. 05mg/kg;室溫、通風、避光條件下苦杏仁油的保質期為6年;生物破乳的破乳率為 98. 6%〇
[0