達所述基因的條件下 培養宿主細胞。在一個實施方案中，將本發明的核酸整合至宿主細胞的基因組（例如染色 體）中。可W依據標準技術、通過包含促使與基因組重組的序列來促進整合。
[0089] 用于在各種不同宿主細胞中克隆和表達多膚的系統是已知的。合適的宿主細胞 包括細菌、哺乳動物細胞、植物細胞、昆蟲細胞、真菌、酵母W及轉基因植物和動物。本領域 中可用于表達異源性多膚的哺乳動物細胞系包括中國倉鼠卵巢（CHO)細胞、化La細胞、幼 倉鼠腎細胞、小鼠黑色素瘤細胞、大鼠骨髓瘤細胞、人胚腎細胞、人胚視網膜細胞，W及許 多其他細胞。在原核細胞（如大腸桿菌）中對抗體及抗體片段的表達在本領域中已充分 建立。綜述參見例如PlilckthunBio/Technology9:545-551(1991)。在培養的真核細胞 中進行表達對于本領域技術人員來說也是可行的，例如在Andersen等（2002)化rr.化in. Biotechnol. 13:117-23 中所評述的。
[0090] 抗體或其抗原結合片段可W是糖基化的，不論其是天然糖基化的或者是表達宿主 的選擇，所述表達宿主例如CHO或NSO(ECACC85110503)細胞；或者它們可W是未糖基化 的，例如當其是通過在原核細胞中表達而生產的時。也可W有目的性地對糖基化進行改變， 例如通過抑制巖藻糖基化從而增加所得抗體的ADCC活性。
[0091] 使用抗體或其抗原結合片段的方法
[0092] 本發明抗體或其抗原結合片段可用于治療或診斷人或動物身體的方法中，如在人 患者中治療（其可包括預防性治療）疾病或病癥的方法，該方法包括向所述患者施用有效 量。可治療的病況包括任何其中TGFP發揮作用的病況，例如纖維化疾病、癌癥、免疫介導 的疾病W及傷口愈合。
[0093]本發明抗體或其抗原結合片段可用于治療直接或間接由TGFP活性所致的疾病 與病況。本發明抗體或其抗原結合片段可W在體外或體內選擇性地抑制人TGFP同種型的 活性。TGFP同種型的活性包括但不限于TGFP介導的信號傳導、細胞外基質巧CM)沉積、 抑制上皮與內皮細胞增殖、促進平滑肌增殖、誘導III型膠原蛋白表達、誘導TGFP、纖維連 接蛋白、VEGFW及IL-Il表達、結合隱性相關膚(Xaten巧AssociatedPeptide)、腫瘤誘導 的免疫抑制、促進血管生成、活化肌成纖維細胞、促進轉移，和抑制NK細胞活性。例如，本發 明抗體或其抗原結合片段可用于治療局灶性節段性腎小球硬化（FSG巧、肝纖維化（HF)、急 性屯、肌梗死（AMI)、特發性肺纖維化（IPF)、硬皮病（SSc)W及馬方綜合征。
[0094]所述抗體或其抗原結合片段可用于治療疾病及病況，包括但不限于纖維化疾病 (諸如血管球性腎炎、神經癒痕、皮膚癒痕、肺纖維化（pulmonaryfibrosis)、肺部纖維 化（lungfibrosis)、福射誘導的纖維化、肝纖維化、骨髓纖維化）、燒傷、免疫介導的疾 病、炎性疾病（包括類風濕性關節炎）、移植排斥、癌癥、杜普伊特倫氏李縮值upuytren'S contrac化re)，W及胃潰瘍。它們可用于治療、預防腎功能不全并降低其發生的風險，腎 功能不全包括但不限于：（1型和II型）糖尿病腎病、福射誘導的腎病、阻塞性腎病、彌漫 性全身性硬化、肺纖維化、同種異體移植物排斥、遺傳性腎病（例如多囊性腎病、髓質海綿 腎、馬蹄形腎）、腎小球性腎炎、腎硬化、腎巧沉著癥、系統性紅斑性狼瘡、斯耶格倫氏綜合征 (Sjogren'ssyn化ome)、貝格爾氏病度erger'Sdisease)、全身性或腎小球性高血壓、腎小 管間質性腎病、腎小管性酸中毒、腎結核W及腎梗死。具體而言，當與腎素-血管緊張素-醒 固酬系統組合時，它們是有用的，所述腎素-血管緊張素-醒固酬系統包括但不限于：腎素 抑制劑、血管緊張素轉化酶（AC巧抑制劑、AngII受體括抗劑（也稱為"AngII受體阻斷 劑"），W及醒固酬括抗劑。將抗體或其抗原結合片段與此類括抗劑組合使用的方法如例如 WO 2004/098637中所示。
[0095]所述抗體或其抗原結合片段也可W用于治療與ECM沉積有關的疾病和病況，包括 全身性硬化、術后粘連、癒痕瘤與肥厚性癒痕、增生性玻璃體視網膜病變、青光眼引流手術、 角膜損傷、白內障、佩羅尼氏病（Peyronie' Sdisease)、成人呼吸窘迫綜合征、肝硬化、屯、 肌梗死后癒痕、血管成形術后再狹窄、蛛網膜下出血后癒痕、多發性硬化、椎板切除術后纖 維化、肌腫及其他修復后纖維化、因去除紋身所致的癒痕、膽汁性肝硬化（包括硬化性膽管 炎）、屯、包炎、胸膜炎、氣管造口術、穿透性中樞神經系統損傷、嗜酸性粒細胞性肌痛綜合征 (eosinophilic myalgic syn化ome)、血管再狹窄、靜脈阻塞性疾病、膜臟炎和牛皮癖性關 節病。
[0096]所述抗體或其抗原結合片段還可用于促進疾病和病況的上皮再形成，所述疾病和 病況如靜脈性潰瘍、缺血性潰瘍（稱瘡）、糖尿病潰瘍、移植部位、移植提供部位、擦傷與燒 傷、支氣管上皮疾病（如哮喘）、ARDS、小腸上皮疾病（如與細胞毒性治療有關的黏膜炎）、 食道潰瘍（回流性疾病）、胃潰瘍、小腸與大腸病損（炎癥性腸病）。
[0097]所述抗體或其抗原結合片段還可用于促進內皮細胞增殖，例如穩定動脈粥樣硬化 斑、促進血管愈合，或抑制平滑肌細胞增殖，如在動脈疾病、再狹窄W及哮喘中。
[0098]所述抗體或其抗原結合片段可用于增強針對巨隧細胞介導的感染的免疫響應。它 們還可用于降低例如由腫瘤、AIDS或肉芽腫性疾病所引起的免疫抑制。所述抗體或其抗原 結合片段可用于治療過度增生性疾病，如癌癥包括但不限于乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌、胃 癌、腎癌、膜腺癌、結腸直腸癌、皮膚癌、肺癌、宮頸癌與膀脫癌、膠質瘤、間皮瘤，W及各種白 血病與肉瘤（諸如卡波西氏肉瘤），且可用于治療或預防此類腫瘤的復發或轉移。所述抗體 或其抗原結合片段還可用于抑制環抱菌素介導的轉移。
[0099] 在癌癥療法的情況中，"治療"包括任何運樣的醫學干設，所述醫學干設導致腫瘤 生長減緩或腫瘤轉移降低W及癌癥的部分緩解W延長患者的生存期。
[0100] 治療方法包括施用所述抗體或其抗原結合片段或含有所述抗體或其抗原結合片 段的藥物組合物。所述抗體或其抗原結合片段可用于制造用于施用的藥物。例如，制造藥物 或藥物組合物的方法包括將抗體或其抗原結合片段與藥學上可的接受賦形劑配制在一起。 組合物可W單獨施用或與其他治療組合施用（同時或是序貫施用，取決于要治療的病況而 定）。
[0101] 優選的施用是W足夠對患者顯示出益處的"治療有效量"施用。該益處可W是至 少改善具體疾病或病況的至少一個癥狀。確切的施用量和施用速率和時間表將取決于要治 療的疾病或病況的性質和嚴重程度。治療處方（例如決定的劑量等）可根據臨床前和臨床 研究來決定，而臨床前和臨床研究的設計是在本領域技術人員能力范疇內的。
[0102] 精確劑量將取決于一些因素，包括所述抗體或其抗原結合片段是用于診斷還是用 于治療、要治療區域的大小和位置、抗體或其抗原結合片段的確切性質（例如完整抗體、 F油或SCFv片段），W及任何可檢測標志物或附接至抗體或其抗原結合片段的其他分子的 性質。例如，完整抗體的典型劑量可W在IOOyg至Igm的范圍內供全身性施用，而1Jig至 Img供局部施用。用于成年患者單次治療的劑量可W按比例調整W供用于兒童與嬰孩，并且 還可針對其他抗體形式根據分子量和活性按比例來調整。按照臨床醫師的判斷，可W每天、 每周兩次、每周、每月或按其他間隔來重復治療。治療可W是周期性的，并且施用之間的時 段可W是約兩周或更長，優選為約=周或更長，更優選為約四周或更長，或約每月一次。
[010引每kg患者體重約0. 1、0. 3、1、3、10或15mg的劑量水平預期是有用且安全的。例 如，大鼠和小鼠中對于急性情況來說0. 5-5mg/kg是有效劑量。因此，就長期給藥而言，基于 預期21天的半衰期，可向人施用0. 3-lOmg/kg。劑量可W是足W產生效力的，而同時低至 足夠有助于最佳施用。例如，少于50mg的劑量有助于皮下施用。靜脈內施用可用作為重病 的遞送途徑，其中可能需要高劑量和長給藥間隔。皮下注射可增加對產品的潛在免疫響應。 針對局部性疾病的局部施用可能降低施用的產品的量并增加其在作用部位的濃度，運可W 提高安全性。
[0104] 抗體或其抗原結合片段可通過注射來施用，所述注射例如皮下、靜脈內、腔內（例 如在腫瘤切除后）、病灶內、腹膜內或肌內的。抗體或其抗原結合片段也可W通過吸入或局 部（例如眼內、鼻內、直腸、至傷口內、皮膚上）或經口來遞送。
[0105] 抗體或其抗原結合片段通常會W藥物組合物的形式施用，其除了抗體或其抗原結 合片段W外還可包含至少一種組分。因此，藥物組合物可包含藥學上可接受的賦形劑、載 劑、緩沖劑、穩定劑或其他本領域技術人員已知的材料。此類材料應該是無毒的且不應干擾 活性成分的效力。此類材料可W包括，例如任意和所有的溶劑、分散介質、包衣、抗菌劑和抗 真菌劑、等張劑和吸收延遲劑。藥學上可接受的載劑的一些實例是水、鹽水、憐酸鹽緩沖鹽 水、右旋糖、甘油、乙醇等等，及其組合。在許多情況下，優選為組合物中包含等張劑，例如 糖、多元醇（如甘露醇、山梨糖醇）或氯化鋼。藥學上可接受的物質的其他實例為潤濕劑或 輔助物質，如乳化劑、防腐劑或緩沖劑，其增加儲存期限或有效性。
[0106] 載劑或其他材料的確切性質取決于施用途徑。對于靜脈內注射或在罹病部位處 的注射，活性成分會呈腸道外可接受的水溶液形式，其是無熱原的且具有合適的地、等張性 和溶解性。本領域相關技術人員能夠使用例如等張介質（如氯化鋼注射劑、林格氏注射劑 巧inger'Sinjection)和乳酸林格氏注射劑QactatedRinger'sinjection))來制備合 適的溶液。可W包含防腐劑、穩定劑、緩沖劑、抗氧化劑和/或其他添加劑。
[0107] 抗體或其抗原結合片段可W配制為液體、半固體或固體形式，如液體溶液（例如 可注射與可輸注溶液）、分散液或懸浮液、粉劑、脂質體W及栓劑。優選的形式取決于所要的 施用模式、治療應用、分子的物理化學特性，W及遞送路徑。制劑可包含賦形劑或賦形劑的 組合，例如：糖、氨基酸和表面活性劑。液體制劑可包括廣泛范圍的抗體濃度和抑。固體制 劑可W通過凍干、噴霧干燥或通過例如超臨界流體技術來干燥來制成。
[0108] 治療組合物可W配制成溶液、微乳液、分散液、脂質體，或其他適于高藥物濃度的 有序結構。可W通過將抗體或其抗原結合片段與上述列舉成分之一或組合一起并入適當溶 劑中，然后無菌過濾來制備無菌注射溶液。一般來說，分散液是通過將活性化合物并入含有 基本分散介質和來自上文所列成分的其他成分的無菌介質中來制備的。對于用于制備無菌 注射溶液的無菌粉劑而言，其優選的制備方法是真空干燥與冷凍干燥，其由預先經無菌過 濾的溶液產生活性成分加其他所需成分的粉劑。例如，通過使用包衣（如卵憐脂）、通過維 持分散液的顆粒尺寸，或通過使用表面活性劑可維持合適的溶液流動性。可W通過將延遲 吸收的藥劑（例如單硬脂酸鹽與明膠）納入組合物而帶來注射組合物的延長吸收。
[0109] 在一些實施方案中，活性化合物可W與保護抗體或其抗原結合片段對抗快速釋放 的載劑一起制備，如控釋制劑，包括植入物、透皮貼片和微囊化投遞系統。可使用生物可分 解、生物相容的聚合物，如乙締乙酸乙締醋、聚酢類、聚乙醇酸、膠原、聚原酸醋和聚乳酸。用 W制備此類制劑的許多方法已申請專利或為本領域技術人員所公知。
[0110] 使用抗體或其抗原結合片段的方法可包括引起或允許其結合至TGFP。運種結合 可在體內發生（例如在對患者施用抗體或其抗原結合片段之后），或是可在體外發生（例如 在化ISA、Western印跡、免疫細胞化學、免疫沉淀、親和力色譜或W基于細胞的測定中），或 在基于離體的治療方法中（例如細胞或體液與抗體或其抗原結合片段離體接觸并隨后施 用于患者的方法）。
[0111] 提供了包含抗體或其抗原結合片段的試劑盒。所述抗體或其抗原結合片段可W是 帶標志物的，W允許在樣品中確定其反應性。可在例如診斷分析中采用試劑盒。試劑盒可 W含有使用所述組分的說明。可W將有助于或能夠實行運種方法的輔助材料包含在所述試 劑盒內。
[0112] 樣品中抗體或其抗原結合片段的反應性可W通過任何適當方法（例如放射性免 疫測定法巧IA))來確定。放射性標記的抗原可W與未經標記的抗原（測試樣品）混合并 可W結合至抗體或其抗原結合片段。W物理方式將已結合的抗原與未結合的抗原分離并且 測定結合至抗體或其抗原結合片段的放射性抗原的量。也可W使用競爭性結合分析，其采 用非放射性抗原，使用連接至報告分子的抗原或類似物。報告分子可W是巧光染料、憐或染 料。合適的巧光染料包括巧光素、羅丹明、藻紅素和德克薩斯紅。合適的發色染料包括二氨 基聯苯胺。
[0113] 其他報告子包括大分子膠粒或顆粒物質，如乳膠珠粒，其為有色、磁性或偏磁性， 并且是可直接或間接產生可檢測信號的生物或化學活性劑，所述可檢測信號能夠視覺觀察 至IJ、電子偵測到或W其他方式記錄。