奧比特嗪-富馬酸鹽、水合物、晶型及其制備方法
【技術領域】
[0001] 本發明屬于藥物化學領域，具體涉及奧比特嗪-富馬酸鹽、水合物、晶型及其制備 方法。
【背景技術】
[0002] 惡性腫瘤是臨床上一大類嚴重危害人類生命健康的疾病。針對腫瘤的治療人們已 經開發了許多不同類型的藥物應用于臨床。其中，分子靶向抗腫瘤藥因其療效肯定，不良反 應小而受到廣泛關注。但是，現有的分子靶向藥物應用于臨床后已經出現較多的耐藥性問 題，從而影響了這些藥物的效果。
[0003] Caspase-3是介導細胞凋亡的一類蛋白水解酶，是細胞凋亡的關鍵執行分子。作為 效應蛋白，其功能執行需要激活酶原Procaspase-3成為有活性的Caspase-3,才能將細胞 內的重要蛋白降解引起細胞凋亡。因此，特異性激活Procaspase-3誘導細胞凋亡是一種新 型而十分有效的抗腫瘤策略。
[0004] 專利W02006128173公開了一類哌嗪乙酰肼雜環化合物，它能選擇性地誘導癌細 胞凋亡，表明這類化合物可以作為潛在的抗腫瘤的分子靶向藥物。這類化合物的作用機理 就是通過激活酶原Procaspase-3,使其成為有活性的Caspase-3而發揮作用。
[0005] 本發明人在中國專利CN101503394A中公開了一類高哌嗪乙酰肼雜環化合物，它 們的抗腫瘤活性也是通過激活酶原Procaspase-3,使其成為有活性的Caspase-3而發揮作 用，因此有可能開發成為抗腫瘤藥物。其中公開了化合物奧比特嗪一富馬酸鹽的制備方法 和抗腫瘤活性。奧比特嗪化學名為：
[0006] (E) -N' - (3-烯丙基-2-羥基苯甲烯基）-2- (4-芐基-1，4-二氮雜環庚烷-1-基） 乙酰肼。化學結構為：
[0007]
[0008] 由于不同配比的鹽、溶劑合物、多晶型可能引起理化性質的不同，進而影響藥物的 療效和不良反應，因此，制備藥物不同配比的鹽、溶劑合物、多晶型是藥物研發過程中的重 要問題。然而目前尚未有奧比特嗪上述方面的相關報導。
【發明內容】
[0009] 本發明的發明人對奧比特嗪-富馬酸鹽進行了大量研究，令人欣喜地發現了其水 合物及不同晶型結構，這為獲得更高藥學效果、易于制備、以及更好存儲穩定性的化合物提 供了可能，本發明即基于以上發現完成。
[0010] 本發明第一方面涉及奧比特嗪-富馬酸鹽的晶型，其中，奧比特嗪-富馬酸鹽結構 如式I所示，n值約為1或2。
[0011]
[0012] 根據本發明第一方面所述的奧比特嗪-富馬酸鹽的晶型，其包括以下幾項：
[0013] 1.奧比特嗪-富馬酸鹽的晶型，其在使用Cu-K a輻射、以2 0角度表示的X射線 粉末衍射圖中，至少包含以下位置處的峰：5. 9±0. 2,16. 8±0. 2和18. 1±0. 2。
[0014] 在本發明的一個實施方案中，所述晶型在使用Cu-Ka輻射、以2 0角度表示的X 射線粉末衍射圖中，還包含至少一個（例如一個、兩個或者三個）選自以下位置處的峰： 10. 1±0. 2,14. 2±0. 2 和 22. 4±0. 2。
[0015] 在本發明的一個實施方案中，所述晶型在使用Cu-Ka輻射、以2 0角度表示的X 射線粉末衍射圖中，還包含至少一個（例如一個、兩個或者三個）選自以下位置處的峰： 11. 4±0. 2,20. 8±0. 2 和 23. 8±0. 2。
[0016] 在本發明的一個實施方案中，所述晶型利用差示掃描量熱法測定的熔點為 156. 27°C ±3. 0°C。
[0017] 在本發明的一個實施方案中，所述晶型的n值約為1。
[0018] 在本發明的一個實施方案中，所述晶型為Form A。
[0019] 在本發明的一個實施方案中，所述Form A的典型的XRPD圖如圖2所示。
[0020] 在本發明的一個實施方案中，所述Form A的典型的DSC圖如圖3所示。
[0021] 2.奧比特嗪-富馬酸鹽的晶型，其在使用Cu-K a輻射、以2 0角度表示的X射線 粉末衍射圖中，至少包含以下位置處的峰：6. 5±0. 2, 20. 0±0. 2和24. 9±0. 2。
[0022] 在本發明的一個實施方案中，所述晶型在使用Cu-Ka輻射、以2 0角度表示的X 射線粉末衍射圖中，還包含至少一個（例如一個、兩個或者三個）選自以下位置處的峰： 5. 3±0. 2,13. 3±0. 2 和 19. 5±0. 2。
[0023] 在本發明的一個實施方案中，所述晶型在使用Cu-Ka輻射、以2 0角度表示的X 射線粉末衍射圖中，還包含至少一個（例如一個、兩個或者三個）選自以下位置處的峰： 12. 0±0. 2,14. 8±0. 2 和 26. 7±0. 2。
[0024] 在本發明的一個實施方案中，所述晶型利用差示掃描量熱法測定的熔點為 171. 45°C ±3. 0°C。
[0025] 在本發明的一個實施方案中，所述晶型的n值約為2。
[0026] 在本發明的一個實施方案中，所述晶型為Form C。
[0027] 在本發明的一個實施方案中，所述Form C的典型的XRPD圖如圖28所示。
[0028] 在本發明的一個實施方案中，所述Form C的典型的DSC圖如圖29所示。
[0029] 3.奧比特嗪-富馬酸鹽的晶型，其在使用Cu-K a輻射、以2 0角度表示的X射線 粉末衍射圖中，至少包含以下位置處的峰：5. 7±0. 2,9. 5±0. 2和10. 0±0. 2。
[0030] 在本發明的一個實施方案中，所述晶型在使用Cu-Ka輻射、以2 0角度表示的X 射線粉末衍射圖中，還包含至少一個（例如一個、兩個或者三個）選自以下位置處的峰： 14. 7±0. 2,19. 2±0. 2 和 26. 7±0. 2。
[0031] 在本發明的一個實施方案中，所述晶型在使用Cu-Ka輻射、以2 0角度表示的X 射線粉末衍射圖中，還包含至少一個（例如一個、兩個或者三個）選自以下位置處的峰： 13. 3±0. 2,22. 2±0. 2 和 23. 6±0. 2。
[0032] 在本發明的一個實施方案中，所述晶型利用差示掃描量熱法測定的熔點為 156. 93°C ±3. 0°C。
[0033] 在本發明的一個實施方案中，所述晶型的n值約為2。
[0034] 在本發明的一個實施方案中，所述晶型為Form D。
[0035] 在本發明的一個實施方案中，所述Form D的典型的XRPD圖如圖34所示。
[0036] 在本發明的一個實施方案中，所述Form D的典型的DSC圖如圖35所示。
[0037] 本發明的第二方面涉及奧比特嗪-富馬酸鹽水合物的晶型，其中，奧比特嗪-富馬 酸鹽水合物的結構如式II所示，n值約為1，m值約為1。
[0038]
[0039] 在本發明的一個實施方案中，所述晶型在使用Cu-Ka輻射、以2 0角度表示的X 射線粉末衍射圖中，至少包含以下位置處的峰：7. 0±0. 2,17. 3±0. 2和21. 3±0. 2。
[0040] 在本發明的一個實施方案中，所述晶型在使用Cu-Ka輻射、以2 0角度表示的X 射線粉末衍射圖中，還包含至少一個（例如一個、兩個或者三個）選自以下位置處的峰： 12. 9±0. 2,17. 9±0. 2 和 19. 7±0. 2。
[0041] 在本發明的一個實施方案中，所述晶型在使用Cu-Ka輻射、以2 0角度表示的X 射線粉末衍射圖中，還包含至少一個（例如一個、兩個或者三個）選自以下位置處的峰： 13. 4±0. 2,14. 7±0. 2 和 23. 5±0. 2。
[0042] 在本發明的一個實施方案中，所述晶型具有雙熔點特性。
[0043] 在本發明的一個實施方案中，所述晶型利用差示掃描量熱法測定的兩個熔點分別 為 102. 18°C ±3. 0°C和 153. 72°C ±3. 0°C。
[0044] 在本發明的一個實施方案中，所述晶型為Form B。
[0045] 在本發明的一個實施方案中，所述Form B的典型的XRPD圖如圖16所示。
[0046] 在本發明的一個實施方案中，所述Form B的典型的DSC圖如圖17所示。
[0047] 本發明第三方面涉及奧比特嗪-富馬酸鹽的無定型，其中，奧比特嗪-富馬酸鹽結 構如式I所示，其中n值約為1。
[0048]
[0049] 在本發明的一個實施方案中，所述無定型利用差示掃描量熱法測定的玻璃化轉變 溫度為 51. 12°C ±3.0°C。
[0050] 本發明第四方面涉及奧比特嗪-富馬酸鹽水合物，其中，奧比特嗪-富馬酸鹽結構 如式II所示，其中n值約為1，m值約為1。
[0051]
[0052] 本發明第五方面涉及本發明第一方面第1項所述的晶型的制備方法，其包含以下 步驟：
[0053] 奧比特嗪一富馬酸鹽、本發明第一方面第2~3項或本發明第二方面任一項所述 的晶型在溶劑中結晶，得到本發明第一方面第1項所述的晶型。
[0054] 在本發明的一個實施方案中，所述奧比特嗪一富馬酸鹽為奧比特嗪一富馬酸鹽晶 型 Form A0
[0055] 在本發明的一個實施方案中，所述溶劑選自水，醇類（例如甲醇、乙醇、丙醇、異丙 醇、丁醇、異丁醇、叔丁醇、戊醇、異戊醇等）、酮類（例如丙酮、丁酮等）、烷烴或鹵代烷烴 (例如正己烷、環己烷、正庚烷、二氯甲烷（DCM)、氯仿（CHCl 3)等）、酯類（例如乙酸乙酯、乙 酸異丙酯、乙酸叔丁酯等）、醚類（例如異丙醚、甲基叔丁基醚、石油醚等）、四氫呋喃（THF)、 1，4-二氧六環、甲苯、乙腈、N，N-二甲基甲酰胺（DMF)、N，N-二甲基乙酰胺（DMA)、N-甲基 吡咯烷酮（NMP)、二甲亞砜（DMSO)等、或上述溶劑的組合。
[0056] 在本發明的一個實施方案中，奧比特嗪一富馬酸鹽可通過揮發結晶得到本發明第 一方面第1項所述晶型。優選地，用于揮發結晶的溶劑選自醇類（例如甲醇、乙醇、正丙醇、 異丙醇、丁醇、異丁醇、仲丁醇、叔丁醇、正戊醇、異戊醇等）、酮類（例如丙酮、丁酮等）、鹵代 烷烴（如DCM、01(：1 3等）、酯類（例如乙酸乙酯、乙酸異丙酯、乙酸叔丁酯等，其中不包含甲 酸叔丁酯）、1，4_二氧六環、甲苯、乙腈、DMF等，或上述溶劑的組合（例如甘油/乙醇（1 :1， V/V)，例如甲醇或乙醇/庚烷（1 :1，V/V)，例如THF/庚烷（2 :1，V/V)，THF/乙腈（1 :1，V/ V)，THF/ 乙酸異丙酯（1 :1，V/V)，THF/DCM(1 :1，V/V)，THF/ 丙酮（1 :1，V/V)，THF/ 乙酸乙 酯（1 :1，V/V)，THF/甲酸丁酯（1 :1，V/V)等）；優選地，所述揮發結晶在室溫下進行。
[0057]在本發明的一個實施方案中，奧比特嗪一富馬酸鹽可通過重結晶得到本發明第一 方面第1項所述的晶型。優選地，用于重結晶的溶劑選自醇類（如甲醇、乙醇、正丙醇、異丙 醇、正丁醇、異丁醇、仲丁醇、叔丁醇、正戊醇、異戊醇等）、酮類（如丙酮、丁酮等）、酯類（如 乙酸乙酯、乙酸異丙酯等，其中不包含甲酸丁酯）、乙腈、THF等，或上述溶劑的組合（例如甲 醇/水（1 :4, V/V)，甲醇/甲基叔丁基醚（1 :4, V/V)，甲醇/乙酸異丙酯（1 :4, V/V)，乙醇 /正己烷（3 :2，V/V));優選地，奧比特嗪一富馬酸鹽溶解溫度為25°C~90°C，例如為30°C、 40°C、50°C、60°C、70°C