r>[0064]所收集的組分在溫度40±2°C，真空度彡0. 09MPa，減壓濃縮至氯化鈉的飽和溶液， 直接上樣至葡聚糖凝膠G-25層析柱脫鹽，所收集產(chǎn)品在溫度40±2°C，真空度多0. 09MPa， 減壓濃縮至干。得到白色固體5. 75g?；厥章蕿?4. 4%。取樣HPLC檢測(cè)，純度為99. 7%， 譜圖見圖 4。所得化合物1HNMR數(shù)據(jù)為：（400MHz，CDC13)S= 3. 17-3. 25 (m，2H，Ac-H)，3 ? 35-3. 44 (m，5H)，3. 52-3. 63 (m，3H)，3. 70-3. 87 (m，5H)，3. 89-3. 92 (m，2H)，4. 09-4. 11 (m，4H ),4. 20-4. 40 (m, 6H), 4. 35 (d,J= 4. 0Hz, 1H), 4. 56 (d,J= 8. 0Hz, 1H,E(HI)), 4. 70 (d,J= 2. 8Hz, 1H,G(H5)), 4. 97 (d,J= 3. 6Hz, 1H,H(HI)), 5. 12 (d,J= 3. 6Hz, 1H,G(HI)), 5. 47 (d,J =3. 2Hz, 1H,F(HI)),5. 57 (d,J= 3. 6Hz, 1H,D(HI))〇
[0065] 實(shí)施例2
[0066] 取磺達(dá)肝癸鈉粗品15g，溶于15mL純化水，配制成lg/mL的水溶液，經(jīng)0. 22ym濾 膜過(guò)濾，取樣HPLC分析，磺達(dá)肝癸鈉粗品純度為58. 5%，譜圖見圖5AESourceQ(GL)色譜 柱（50X250)，固定相為Source15Q，流動(dòng)相為氯化鈉水溶液（2mol/L)和水，流速為14ml/ mim，檢測(cè)波長(zhǎng)為210nm。進(jìn)樣量5mL，按下表洗脫，收集46.OOmin~49.OOmin目標(biāo)組分；
[0067]
[0068] 所收集的組分在溫度40±2°C，真空度彡0. 09MPa，減壓濃縮至氯化鈉的飽和 溶液，直接上樣至葡聚糖凝膠G-25層析柱脫鹽，所收集產(chǎn)品在溫度40±2 °C，真空度 彡0. 09MPa，減壓濃縮至干。得到白色固體5. 57g?；厥章蕿?3. 4%。取樣HPLC檢測(cè)，純度 為99.8%，譜圖見圖6。
[0069] 實(shí)施例3
[0070] 取磺達(dá)肝癸鈉粗品15g，溶于15mL純化水，配制成lg/mL的水溶液，經(jīng)0. 22ym濾 膜過(guò)濾，取樣HPLC分析，磺達(dá)肝癸鈉粗品純度為64. 2%，譜圖見圖7AESourceQ(GL)色譜 柱（50X250)，固定相為Source15Q，流動(dòng)相為氯化鈉水溶液（3mol/L)和水，流速為14ml/ mim，檢測(cè)波長(zhǎng)為210nm。進(jìn)樣量5mL，按下表洗脫，收集46.OOmin~49.OOmin目標(biāo)組分；
[0071]
[0072] 所收集的組分在溫度40±2°C，真空度彡0. 09MPa，減壓濃縮至氯化鈉的飽和 溶液，直接上樣至葡聚糖凝膠G-25層析柱脫鹽，所收集產(chǎn)品在溫度40±2 °C，真空度 彡0. 09MPa，減壓濃縮至干。得到白色固體5. 58g。回收率為57. 9%。取樣HPLC檢測(cè)，純度 為99.8%，譜圖見圖8。
[0073] 實(shí)施例4、比較實(shí)驗(yàn)
[0074] 取磺達(dá)肝癸鈉粗品5g，溶于15mL純化水，取樣HPLC分析，磺達(dá)肝癸鈉粗品純度 為67. 5%，譜圖見圖9。以瓊脂糖凝膠為基質(zhì)的強(qiáng)陰離子交換層析柱（QSepharoseFast Flow)分離純化進(jìn)行第一次提純，先以0. 2NNaCl進(jìn)行沖柱，再以0.46NNaCl進(jìn)行除低電 荷雜質(zhì)，以0.8NNaCl回收磺達(dá)肝癸鈉。得到磺達(dá)肝癸鈉（2. 8g)，純度為83.3%，譜圖見圖 10。
[0075] 將2. 8g磺達(dá)肝癸鈉粗品溶于28mL7K，加入〇. 28g活性炭，室溫?cái)嚢鑳蓚€(gè)小時(shí)，過(guò) 濾，將濾液在溫度40 ± 2°C，真空度多0. 09MPa，減壓濃縮至氯化鈉的飽和溶液，直接上樣至 葡聚糖凝膠G-25層析柱脫鹽，所收集產(chǎn)品在溫度40±2°C，真空度多0. 09MPa，減壓濃縮至 干。得到白色固體1.6g?；厥章蕿?7.4%。取樣HPLC檢測(cè)，純度為97.7%，譜圖見圖11。
[0076] 通過(guò)上述實(shí)驗(yàn)可以進(jìn)一步說(shuō)明：
[0077] 本發(fā)明的制備方法：1.能夠得到高純度的磺達(dá)肝癸鈉，并且有較高的回收率； 2.生產(chǎn)成本降低，避免用到了大量的價(jià)格昂貴的柱層析介質(zhì)；3.操作簡(jiǎn)單，易于生產(chǎn)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種制備高純度磺達(dá)肝癸鈉的精制方法，其特征在于，包括如下步驟： (1) 將磺達(dá)肝癸鈉粗品溶于純化水中，濃度為0. 5~lg/mL; (2) 用高效液相色譜系統(tǒng)梯度洗脫制備磺達(dá)肝癸鈉，收集純度較高的產(chǎn)品； 制備液相：waters制備純化儀；流速：14mL/min ;紫外波長(zhǎng)：210nm ;進(jìn)樣量：5mL ;流 動(dòng)相A、B進(jìn)行梯度洗脫，流動(dòng)相A:氯化鈉溶液，流動(dòng)相B :注射用水，收集46. OOmin~ 49. OOmin目標(biāo)組分； (3) 濃縮，脫鹽，干燥得到高純度的磺達(dá)肝癸鈉。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的精制方法，其特征在于，梯度洗脫過(guò)程如下：3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的精制方法，其特征在于，磺達(dá)肝癸鈉粗品屬于現(xiàn)有產(chǎn)品，可以 在市場(chǎng)上購(gòu)買到，其純度大于50%。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的精制方法，其特征在于，流動(dòng)相A為1~3mol/L氯化鈉水溶 液，優(yōu) 選為2mol/L氯化鈉水溶液。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的精制方法，其特征在于，高效液相色譜系統(tǒng)所用色譜柱為GE MonoQ色譜柱，以強(qiáng)堿型陰離子樹脂為固定相，優(yōu)選SOURCE系列，色譜柱填料粒度為3~ 30ym，優(yōu)選為粒徑范圍為10~15ym。6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的精制方法，其特征在于，步驟3所述濃縮，脫鹽，干燥的具體過(guò) 程為：將所收集的組分在溫度40±2°C，真空度多0. 09MPa的條件下，減壓濃縮至氯化鈉的 飽和溶液，直接上樣至葡聚糖凝膠G-25層析柱脫鹽，將所收集產(chǎn)品在溫度40 ±2°C，真空度 彡0. 09MPa的條件下，減壓濃縮至干。7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的精制方法，其特征在于，包括以下步驟： (1) 取磺達(dá)肝癸鈉粗品溶于純化水，配制成lg/mL的水溶液， (2) 用高效液相色譜系統(tǒng)梯度洗脫制備磺達(dá)肝癸鈉，色譜條件如下： GEMonoQ色譜柱，色譜柱的型號(hào)為10X100mm，固定相為Source15Q，填料粒徑10um， 流動(dòng)相A為1~3mol/L氯化鈉水溶液，流動(dòng)相B為注射用水，流速為檢測(cè)波長(zhǎng)為 210nm，進(jìn)樣量5mL，按下表洗脫，收集46.OOmin~49.OOmin目標(biāo)組分；(3)所收集的組分在溫度40±2°C，真空度彡0.09MPa，減壓濃縮至氯化鈉的飽和溶液， 直接上樣至葡聚糖凝膠G-25層析柱脫鹽；所收集產(chǎn)品在溫度40±2°C，真空度多0. 09MPa， 減壓濃縮至干，得到白色固體，即得高純度磺達(dá)肝癸鈉。8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的精制方法，其特征在于，包括以下步驟： (1) 取磺達(dá)肝癸鈉粗品溶于純化水，配制成lg/mL的水溶液，經(jīng)0. 22ym濾膜過(guò)濾， (2) 用高效液相色譜系統(tǒng)梯度洗脫制備磺達(dá)肝癸鈉， 色譜條件如下：GEMonoQ色譜柱，型號(hào)為50X250mm，固定相為Source15Q，填料粒 徑10um，流動(dòng)相A為lmol/L氯化鈉水溶液，流動(dòng)相B為水，流速為檢測(cè)波長(zhǎng)為 210nm，進(jìn)樣量5mL，收集46.OOmin~49.OOmin目標(biāo)組分，洗脫方式如下：(3) 所收集的組分在溫度40±2°C，真空度彡0.09MPa，減壓濃縮至氯化鈉的飽和溶液， 直接上樣至葡聚糖凝膠G-25層析柱脫鹽，所收集產(chǎn)品在溫度40±2°C，真空度多0. 09MPa， 減壓濃縮至干，得到白色固體，即可。9. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的精制方法，其特征在于，包括以下步驟： (1) 取磺達(dá)肝癸鈉粗品溶于純化水，配制成lg/mL的水溶液，經(jīng)0. 22ym濾膜過(guò)濾， (2) 用高效液相色譜系統(tǒng)梯度洗脫制備磺達(dá)肝癸鈉， 色譜條件如下：GEMonoQ色譜柱，型號(hào)為50X250mm，固定相為Source15Q，填料粒 徑15um，流動(dòng)相A為2mol/L氯化鈉水溶液，流動(dòng)相B為水，流速為檢測(cè)波長(zhǎng)為 210nm，進(jìn)樣量5mL，收集46.OOmin~49.OOmin目標(biāo)組分，洗脫方式如下：(3)所收集的組分在溫度40±2°C，真空度彡0.09MPa，減壓濃縮至氯化鈉的飽和溶液， 直接上樣至葡聚糖凝膠G-25層析柱脫鹽；所收集產(chǎn)品在溫度40±2°C，真空度多0. 09MPa， 減壓濃縮至干，得到白色固體，為高純度磺達(dá)肝癸鈉。10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的精制方法，其特征在于，包括以下步驟： (1) 取磺達(dá)肝癸鈉粗品溶于純化水，配制成lg/mL的水溶液，經(jīng)0. 22ym濾膜過(guò)濾 (2) 用高效液相色譜系統(tǒng)梯度洗脫制備磺達(dá)肝癸鈉， 色譜條件如下：GEMonoQ色譜柱，型號(hào)為50X250mm，固定相為Source15Q，填料粒 徑10um，流動(dòng)相為3mol/L氯化鈉水溶液和水，流速為14ml/mim，檢測(cè)波長(zhǎng)為210nm，進(jìn)樣量 5mL，收集46.OOmin~49.OOmin目標(biāo)組分，洗脫方式如下：(3) 所收集的組分在溫度40±2°C，真空度彡0.09MPa，減壓濃縮至氯化鈉的飽和溶液， 直接上樣至葡聚糖凝膠G-25層析柱脫鹽；所收集產(chǎn)品在溫度40±2°C，真空度多0. 09MPa， 減壓濃縮至干，得到白色固體，為高純度磺達(dá)肝癸鈉。
【專利摘要】一種快速制備高純度磺達(dá)肝癸鈉的精制方法，本發(fā)明提供一種生產(chǎn)成本低，操作簡(jiǎn)單并且能達(dá)到高純度和高回收率的制備方法。通過(guò)高效液相色譜制備法，可以將含量為50％以上的磺達(dá)肝癸鈉粗品經(jīng)過(guò)一次制備達(dá)到99％以上純度。
【IPC分類】C07H1/06, C07H15/04
【公開號(hào)】CN105037452
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510345431
【發(fā)明人】姚小青, 孫長(zhǎng)海, 韓建, 干浩, 韓芙蓉, 閆建和, 袁海新, 侯文峰, 周喜澤, 孫福亮
【申請(qǐng)人】天津紅日藥業(yè)股份有限公司
【公開日】2015年11月11日
【申請(qǐng)日】2015年6月19日