于生物活性（即非經典活性）HRS參考多肽活性 的約1%、10%、25%或50%的活性，所述生物活性片段來源于所述HRS參考多肽。
[0125] 在其他說明性實施方案中，SEQIDN0:6、9或11的HRS片段的長度大小范圍可 以為約 20-30、20-40、20-50、20-60、20-70、20-80、20-90、20-100、20-125、20-150 或 20-175 個氨基酸。在其他實施方案中，所述片段的長度大小范圍為約30-40、30-50、30-60、30-70、 30-80、30-90、30-100、30-125、30-150或30-175個氨基酸。在其他實施方案中，所述片段的 長度大小范圍為約 40-50、40-60、40-70、40-80、40-90、40-100、40-125、40-150 或 40-175 個 氨基酸。在另一個說明性實施方案中，所述片段的長度大小范圍為約50-60、50-70、50-80、 50-90、50-100、50-125、50-150 或 50-175 個氨基酸。
[0126] 在其他實施方案中，本發明提供了HRS剪接變異體多肽（例如，SEQIDN0:6、9或 11)的活性變異體，其中，所述變異體基本上保留了SEQIDN0:6、9或11表現出的至少一 種非經典活性。SEQIDN0:6、9或11所示序列的某些說明性變異體，包括沿著其長度與 SEQIDN0:6、9 或 11 具有至少約 70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%95%、 96%、97%、98%或99%同一性（如下所述確定）的變異體。
[0127] 變異體可以通過一個或更多個取代、缺失、添加和/或插入區別于SEQIDN0:6、9 或11。這些變異體可以是天然存在的或可以是合成產生的，例如，通過使用本領域內眾所周 知的多種技術中的任何技術修飾SEQIDN0:6、9或11(或編碼SEQIDN0:6、9或11的多 核苷酸）并評估本文所述的生物活性。
[0128] 在某些實施方案中，變異體會含有保守取代。"保守取代"是這樣的一種取代，其 中，氨基酸被取代為具有類似性質的另一種氨基酸，這樣，肽化學領域內的技術人員會預期 所述多肽的二級結構和親水本質基本上不變。可以修飾本發明多核苷酸和多肽的結構，并 可仍然獲得編碼具有期望特性的變異體或衍生多肽的功能性分子。當期望改變多肽的氨基 酸序列，從而創造一個相當的甚至改進的本發明HRS剪接變異體多肽的變異體時，本領域 內技術人員，例如，可以根據表1，改變編碼DNA序列的一個或更多個密碼子。
[0129] 在蛋白質結構中，某些氨基酸可以被取代為其他氨基酸，而與例如抗體的抗原結 合區或底物分子的結合位點等結構的相互作用結合能力沒有可感知的損失。由于蛋白質的 相互作用能力和本質通常限定該蛋白質的生物功能活性，因此，可以在蛋白質序列中進行 某些氨基酸序列的取代，當然，也可以對其基本的DNA編碼序列進行取代，仍然獲得具有類 似性質的蛋白質。因此，考慮可以在所公開的組合物的多肽序列或編碼所述多肽的相應DNA 序列中進行各種變化，而不明顯損失其期望的效用或活性。
[0130]表1
[0131]
【主權項】
1. 分離的組氨酰-tRNA合成酶（HRS)剪接變異體多肽，其用于降低炎癥活性的方法中， 其中所述HRS多肽的長度為50-175個氨基酸，并且包含SEQ ID NO:6的至少50個連續氨 基酸，或其與SEQ ID N0:6具有至少95%序列同一性的變體，其中所述HRS多肽包含WHEP 結構域，且缺少功能性氨酰化結構域。
2. 根據權利要求1所述的分離的HRS多肽，其中所述HRS多肽的長度為至多約70個氨 基酸。
3. 根據權利要求2所述的分離的HRS多肽，其中所述HRS多肽包含SEQ ID NO:6的氨 基酸序列。
4. 根據權利要求1所述的分離的HRS多肽，其中所述HRS多肽的長度為至多約175個 氨基酸，并包含SEQ ID NO:9的至少120個連續氨基酸。
5. 根據權利要求4所述的分離的HRS多肽，其中所述HRS多肽包含SEQ ID NO:9的氨 基酸序列。
6. 根據權利要求1所述的分離的HRS多肽，其中所述HRS多肽的長度為約60個氨基 酸，并且與SEQ ID NO:6具有至少95%的序列同一性。
7. 根據權利要求1所述的分離的HRS多肽，其中所述HRS多肽的長度為約171個氨基 酸，并且與SEQ ID NO:9具有至少95%的序列同一性。
8. 根據權利要求1所述的分離的HRS多肽，其中所述HRS多肽的長度為約60個氨基 酸，并且包含SEQ ID N0:6的氨基酸序列。
9. 根據權利要求1所述的分離的HRS多肽，其中所述HRS多肽的長度為約171個氨基 酸，并且包含SEQ ID N0:9的氨基酸序列。
10. 分離的組氨酰-tRNA合成酶（HRS)剪接變異體多肽，其用于降低炎癥活性的方法 中，其中所述HRS多肽包含SEQ ID N0:11的氨基酸序列，或其與SEQ ID N0:11具有至少 95%序列同一性的變體，其中所述HRS多肽包含WHEP結構域，且缺少功能性氨酰化結構域。
11. 根據權利要求10所述的分離的HRS多肽，其中所述HRS多肽包含SEQ ID NO: 11的 氨基酸序列。
12. 根據權利要求10所述的分離的HRS多肽，其中所述HRS多肽的長度為約211個氨 基酸。
13. 根據權利要求12所述的分離的HRS多肽，其中所述HRS多肽與SEQ ID NO: 11具有 至少95 %的序列同一性。
14. 根據權利要求12所述的分離的HRS多肽，其中所述HRS多肽包含SEQ ID NO: 11的 氨基酸序列。
15. 分離的重組組氨酰-tRNA合成酶（HRS)，其用于降低炎癥活性的方法中，其中所述 HRS多肽基本上由SEQ ID NO:6, 9或11的氨基酸序列組成。
16. 根據權利要求1所述的分離的HRS多肽，其還包含異源融合伴侶。
17. 根據權利要求10所述的分離的HRS多肽，其還包含異源融合伴侶。
18. 根據權利要求15所述的分離的HRS多肽，其還包含異源融合伴侶。
19. 根據權利要求16所述的分離的HRS多肽，其中所述異源融合伴侶包含多組氨酸標 簽。
20. 根據權利要求16所述的分離的HRS多肽，其中所述異源融合伴侶包含Fc片段。
21. 根據權利要求1所述的分離的HRS多肽，其中所述HRS多肽是通過聚乙二醇化修飾 的。
22. 根據權利要求10所述的分離的HRS多肽，其中所述HRS多肽是通過聚乙二醇化修 飾的。
23. 根據權利要求15所述的分離的HRS多肽，其中所述HRS多肽是通過聚乙二醇化修 飾的。
24. 根據權利要求1所述的分離的HRS多肽，其中所述HRS多肽在一個或多個組成性氨 基酸處包含至少一個化學或酶促衍生，其中所述至少一個化學或酶促衍生選自乙酰化、羥 基化、甲基化、酰胺化、糖基化以及脂化。
25. 根據權利要求10所述的分離的HRS多肽，其中所述HRS多肽在一個或多個組成性 氨基酸處包含至少一個化學或酶促衍生，其中所述至少一個化學或酶促衍生選自乙酰化、 羥基化、甲基化、酰胺化、糖基化以及脂化。
26. 根據權利要求15所述的分離的HRS多肽，其中所述HRS多肽在一個或多個組成性 氨基酸處包含至少一個化學或酶促衍生，其中所述至少一個化學或酶促衍生選自乙酰化、 羥基化、甲基化、酰胺化、糖基化以及脂化。
27. 分離的重組組氨酰-tRNA合成酶（HRS)多肽，其用于降低炎癥活性的方法中，其中 所述HRS多肽的長度為50-175個氨基酸，并且包含SEQ ID NO: 6的至少50個連續氨基酸， 或其與SEQ ID N0:6具有至少95%序列同一性的變體，其中所述HRS多肽包含WHEP結構 域，且缺少功能性氨酰化結構域。
28. 根據權利要求27所述的分離的HRS多肽，其還包含異源融合伴侶。
29. 根據權利要求28所述的分離的HRS多肽，其中所述異源融合伴侶包含多組氨酸標 簽。
30. 根據權利要求28所述的分離的HRS多肽，其中所述異源融合伴侶包含Fc片段。
31. 根據權利要求27所述的分離的HRS多肽，其中所述HRS多肽是通過聚乙二醇化修 飾的。
32. 藥物組合物，其包含生理上可接受的載體和權利要求1所述的HRS多肽。
33. 藥物組合物，其包含生理上可接受的載體和權利要求10所述的HRS多肽。
34. 藥物組合物，其包含生理上可接受的載體和權利要求15所述的HRS多肽。
35. 藥物組合物，其包含生理上可接受的載體和權利要求27所述的HRS多肽。
36. 根據權利要求32所述的藥物組合物，其中所述組合物被與組氨酸配制。
37. 根據權利要求33所述的藥物組合物，其中所述組合物被與組氨酸配制。
38. 根據權利要求34所述的藥物組合物，其中所述組合物被與組氨酸配制。
39. 根據權利要求35所述的藥物組合物，其中所述組合物被與組氨酸配制。
40. 治療有需要的個體的炎性狀況或自身免疫狀況的方法,其包括給予所述個體包含 藥學上可接受的載體和組氨酰-tRNA合成酶（HRS)多肽剪接變異體的藥物組合物，其中所 述HRS多肽的長度為約50-175個氨基酸，并且包含SEQ ID NO:6的50或更多個連續氨基 酸，或其與SEQ ID N0:6具有至少95%序列同一性的變體，以及其中所述HRS多肽包含WHEP 結構域，且缺少功能性氨酰化結構域。
41. 治療有需要的個體的炎性狀況或自身免疫狀況的方法,其包括給予所述個體包含 藥學上可接受的載體和組氨酰-tRNA合成酶（HRS)多肽的藥物組合物，其中所述HRS多肽 的長度為約212個氨基酸，并且包含SEQ ID NO: 11的50或更多個連續氨基酸，或其與SEQ ID NO: 11具有至少95%序列同一性的變體，以及其中所述HRS多肽包含WHEP結構域，且缺 少功能性氨酰化結構域。
42. 治療有需要的個體的炎性狀況或自身免疫狀況的方法,其包括給予所述個體包含 藥學上可接受的載體和組氨酰-tRNA合成酶（HRS)多肽的藥物組合物，其中所述HRS多肽 的長度為約40-80個氨基酸，并且包含SEQ ID NO:6的約40或更多個連續氨基酸，或其與 SEQ ID N0:6具有至少95%序列同一性的變體，其中所述HRS多肽包含WHEP結構域。
43. 治療有需要的個體的炎性狀況或自身免疫狀況的方法，其包括給予所述個體包含 藥學上可接受的載體和組氨酰-tRNA合成酶（HRS)多肽的藥物組合物，其中所述HRS多肽 基本上由來自人組氨酰-tRNA合成酶（HRS)的WHEP結構域組成。
【專利摘要】提供了具有非經典生物活性的分離的組氨酰-tRNA合成酶剪接變異體多核苷酸和多肽，及其相關組合物和方法。
【IPC分類】A61P29-00, A61K38-53, C12N9-00, A61P37-02
【公開號】CN104830812
【申請號】CN201510024397
【發明人】周潔, 劉靜芬, 許志雯, 羅詠詩, 克瑞斯蒂·海倫·派爾, 萊斯利·安·格林
【申請人】盤古生物制藥有限公司, Atyr 醫藥公司
【公開日】2015年8月12日
【申請日】2010年3月16日
【公告號】CA2755784A1, CN102428175A, EP2408905A2, EP2408905A4, US8404242, US8753638, US20100297149, US20130243766, US20140371294, WO2010107825A2, WO2010107825A3