1.一種絨促性素純化方法,采用三次層析進(jìn)行純化,所述三次層析依次為親和層析、疏水層析和離子交換層析,最終得到高純度絨促性素固體。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的絨促性素純化方法,其特征在于:所述親和層析的填料為 capto blue(high sub)、所述疏水層析的填料為Phenyl Sepharose 6 Fast Flow(high sub)、所述離子交換層析的填料為DEAE Sepharose Fast Flow。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的絨促性素純化方法,其特征在于:包括以下各步驟:
(1)預(yù)處理:絨促性素粗品溶于溶解液中,再加入乙醇溶液至混合溶液中存在低濃度乙醇后沉淀、取上清液,所述上清液再加入乙醇溶液至混合溶液中存在高濃度乙醇,取沉淀得固體;
(2)第一步層析:步驟(1)得到的固體進(jìn)行capto blue(high sub)親和層析得蛋白溶液A;
(3)第二步層析:步驟(2)得到的蛋白溶液A經(jīng)Phenyl Sepharose 6 Fast Flow(high sub)疏水層析得蛋白溶液B;
(4)第三步層析:將步驟(3)得到的蛋白溶液B經(jīng)DEAE Sepharose Fast Flow離子交換層析得蛋白溶液C;
(5)后處理:步驟(4)得到的蛋白溶液C加乙醇溶液至混合溶液中存在高濃度乙醇,沉淀后收集固體,即得絨促性素固體。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的絨促性素純化方法,其特征在于:步驟(1)預(yù)處理:絨促性素粗品溶于溶解液中,加濃度為100%乙醇至混合溶液中乙醇濃度為45-55%,攪拌、沉淀后取上清液,所述上清液加濃度為100%乙醇至混合溶液中乙醇濃度為80-90%,取沉淀,離心,常溫減壓干燥,得固體。