本發明屬于醫藥生產領域，具體地說明運用三次層析技術來純化絨促性素的方法。
背景技術：
絨促性素是從孕婦尿中提取的一種生物活性物質，具有促進胚胎發育、維持妊娠的功能。絨促性性素與促甲狀腺激素、促卵泡激素、黃體生成素等同為糖蛋白激素家庭一員。在臨床上，絨促性素能治療習慣性流產和促卵泡激素分泌過多或黃體生成素分泌不足引起的不孕癥等疾病。此外，在水產養殖和畜牧業生產上也有廣泛應用。絨促性素是我國的主要出口生化藥物，用于純化絨促性素的方法有很多，但現行方法工藝流程較繁瑣、絨促性素產品效價較低。
技術實現要素：
本發明提供了一種利用三次層析來純化絨促性素的方法。該方法優化了純化工藝，使純化過程簡單，收率明顯提高，效價高于現有工藝。
為解決上述技術問題，本發明采用以下技術方案予以實現：
一種提高絨促性素效價的方法，其特征在于：采用三次層析進行純化，所述三次層析依次為親和層析、疏水層析和離子交換層析，最終得到高純度絨促性素固體。
在發明的技術方案中，還具有以下技術特征：包括如下步驟：
（1）預處理：絨促性素粗品溶于溶解液中，加入乙醇溶液至混合溶液中存在低濃度乙醇后沉淀、取上清液，所述上清液再加入乙醇溶液至混合溶液中存在高濃度乙醇，取沉淀得固體；
（2）第一步層析：步驟（1）得到的固體進行capto blue（high sub）親和層析得蛋白溶液A；
（3）第二步層析：步驟（2）得到的蛋白溶液A經Phenyl Sepharose 6 Fast Flow（high sub）疏水層析得蛋白溶液B；
（4）第三步層析：將步驟（3）得到的蛋白溶液B經DEAE Sepharose Fast Flow離子交換層析得蛋白溶液C；
（5）后處理：步驟（4）得到的蛋白溶液C加乙醇溶液至混合溶液中存在高純度乙醇，沉淀后收集固體，即得絨促性素固體。
與現有技術相比，本發明的優點和積極效果是：
優化了純化工藝，使純化過程簡單化，收率明顯提高，效價高于現有工藝，另外設備占地面積縮小，車間耗能變小。本發明中，預處理后絨促性素的效價為300iu/mg左右，而經三次層析處理后絨促性素的效價可達9000iu/mg左右，效價顯著提高。
具體實施方式
為了進一步了解本發明的技術特征，下面結合具體實施例對本發明作進一步說明。
實施例1
（1）預處理：絨促性素粗品溶于溶解液中，再加入乙醇溶液至混合溶液中存在低濃度乙醇后沉淀、取上清液，所述上清液再加入乙醇溶液至混合溶液中存在高濃度乙醇，取沉淀得固體；
（2）第一步層析：步驟（1）得到的固體進行capto blue（high sub）親和層析得蛋白溶液A；
（3）第二步層析：步驟（2）得到的蛋白溶液A經Phenyl Sepharose 6 Fast Flow（high sub）疏水層析得蛋白溶液B；
（4）第三步層析：將步驟（3）得到的蛋白溶液B經DEAE Sepharose Fast Flow離子交換層析得蛋白溶液C；
（5）后處理：步驟（4）得到的蛋白溶液C加乙醇溶液至混合溶液中存在高濃度乙醇，沉淀后收集固體，即得絨促性素固體。
實施例2
（1）預處理：絨促性素粗品溶于溶解液中，再加入乙醇溶液至混合溶液中存在低濃度乙醇后沉淀、取上清液，所述上清液再加入乙醇溶液至混合溶液中存在高濃度乙醇，取沉淀得固體；
（2）第一步層析：步驟（1）得到的固體進行capto blue（high sub）親和層析得蛋白溶液A；
（3）第二步層析：步驟（2）得到的蛋白溶液A經Phenyl Sepharose 6 Fast Flow（high sub）疏水層析得蛋白溶液B；
（4）后處理：步驟（3）得到的蛋白溶液C加乙醇溶液至混合溶液中存在高濃度乙醇，沉淀后收集固體，即得絨促性素固體。
以上所述，實施例僅是本發明的較佳實施例而已，并非是對本發明作其它形式的限制，任何熟悉本專業的技術人員可能利用上述揭示的技術內容加以變更或改型為等同變化的等效實施例。但是凡是未脫離本發明技術方案內容，依據本發明的技術實質對以上實施例所作的任何簡單修改、等同變化與改型，仍屬于本發明技術方案的保護范圍。