1.一種美拉諾坦Ⅰ的制備方法,其特征在于,包括如下步驟:
(a)液相合成法制備三肽片段:Fmoc-His(Trt)-D-Phe-Arg(Pbf)-OH;
(b)采用Fmoc固相合成法向載體樹脂上依序偶聯保護氨基酸及步驟(a)中的三肽片段,并進行N端乙酰化,制備美拉諾坦Ⅰ肽樹脂;
(c)美拉諾坦Ⅰ肽樹脂經裂解反應制備美拉諾坦Ⅰ粗肽;
(d)美拉諾坦Ⅰ粗肽經純化過程制備美拉諾坦Ⅰ精肽。
2.根據權利要求1所述的.一種美拉諾坦Ⅰ的制備方法,其特征在于,步驟(a)中,三肽片段的制備過程為:
(1)合成Fmoc-His(Trt)-OSu:Fmoc-His(Trt)-OH與HOSu在有機溶劑中,以DCC為活化劑,反應制備Fmoc-His(Trt)-OSu;所述Fmoc-His(Trt)-OH和HOSu的摩爾比為1:1.0~1.2;所述Fmoc-His(Trt)-OH和DCC的摩爾比為1:1.0~1.2;
(2)合成Fmoc-His(Trt)-D-Phe-OH:H-D-Phe-OH和Fmoc-His(Trt)-OSu在碳酸鈉溶液中反應,制備Fmoc-His(Trt)-D-Phe-OH;所述H-D-Phe-OH和碳酸鈉的摩爾比為1:1~2;所H-D-Phe-OH和Fmoc-His(Trt)-OSu的摩爾比為1:1.1~1.5;
(3)合成Fmoc-His(Trt)-D-Phe-OSu:Fmoc-His(Trt)-D-Phe-OH與HOSu在有機溶劑中,以DCC為活化劑,反應制備Fmoc-His(Trt)-D-Phe-OSu;所述Fmoc-His(Trt)-D-Phe-OH和HOSu的摩爾比為1:1.0~1.2;所述Fmoc-His(Trt)-D-Phe-OH和DCC的摩爾比為1:1.0~1.2;
(4)Fmoc-His(Trt)-D-Phe-Arg(Pbf)-OH的制備:H-Arg(Pbf)-OH和Fmoc-His(Trt)-D-Phe-OSu在碳酸鈉溶液中反應,制備Fmoc-His(Trt)-D-Phe-Arg(Pbf)-OH;所述H-Arg(Pbf)-OH和碳酸鈉的摩爾比為1:1~2;所述H-Arg(Pbf)-OH和Fmoc-His(Trt)-D-Phe-OSu的摩爾比為1:1.1~1.5。
3.根據權利要求2所述的一種美拉諾坦Ⅰ的制備方法,其特征在于,所述有機溶劑為四氫呋喃、二氧六環、丙酮中的一種或一種以上的混合液。
4.根據權利要求1所述的一種美拉諾坦Ⅰ的制備方法,其特征在于,步驟(b)中,所述美拉諾坦Ⅰ肽樹脂的制備過程為:
(1)保護氨基酸Fmoc-Val-OH在縮合試劑的作用下與載體樹脂進行偶聯反應,制備Fmoc-Val-Rink Amide resin或Fmoc-Val-Rink Amide AM resin;
(2)依次偶聯保護氨基酸Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Trp(Boc)-OH、Fmoc-His(Trt)-D-Phe-Arg(Pbf)-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Nle-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Tyr(tBu)-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH,然后進行N端乙酰化反應,制得美拉諾坦Ⅰ肽樹脂。
5.根據權利要求4所述的一種美拉諾坦Ⅰ的制備方法,其特征在于,所述Rink Amide resin或Rink Amide AM resin樹脂的替代度為0.3-1.0mmol/g。
6.根據權利要求4所述的一種美拉諾坦Ⅰ的制備方法,其特征在于,所述縮合試劑為DIC/HOBt、DIC/HOAt、TBTU/HOBt/DIEA、HBTU/HOBt/DIEA中的一種。
7.根據權利要求1所述的一種美拉諾坦Ⅰ的制備方法,其特征在于,步驟(c)中,美拉諾坦Ⅰ粗肽的制備過為:將美拉諾坦Ⅰ肽樹脂加入到裂解液中,在15~30℃下,裂解反應2~5h,反應結束,將裂解液過濾到甲基叔丁基醚或乙醚中沉降并洗滌,離心收集沉淀,真空干燥后得美拉諾坦Ⅰ粗肽。
8.根據權利要求7所述的一種美拉諾坦Ⅰ的制備方法,其特征在于,所述裂解液為加入體積比1-5%清除劑的TFA溶液;所述清除劑為苯甲醚、苯甲硫醚、乙二硫醇、巰基乙醇、苯酚、水中的一種或幾種。