本申請大體涉及抗體藥物領域，具體而言，本申請提供了抗人I型干擾素受體亞基1(IFNAR1)的抗體及其醫學和生物學用途。
背景技術：
：干擾素(IFN)包括I型干擾素、II型干擾素和III型干擾素。其中人的I型干擾素包括IFN-α、IFN-β、IFN-ε、IFN-κ和IFN-ω。通常，當有病毒侵入機體時，人體內的成纖維細胞和單核細胞就分泌各種I型干擾素，以阻止和干擾病毒的DNA和RNA復制。而且，I型干擾素還有抗腫瘤和免疫調節的功能(CapobianchiM.R.,etal.,2015,CytokineGrowthFactorRev.,26:103；ZitvogelL.,etal.,2015,NatRevImmunol.,15:405)。所有的人I型干擾素都共用一組細胞表面的受體復合物，即IFNα/β受體復合物，該IFNα/β受體復合物包括IFNAR1和IFNAR2兩個跨膜蛋白亞基。其中IFNAR1單獨結合I型干擾素的能力較弱(KD約為10-7M),而IFNAR2單獨結合I型干擾素的能力較強(KD約為10-9M)。但此兩個受體亞基對I型干擾素功能實現都必不可少，而且都影響受體復合物對不同I型干擾素的高親和力(KD約為10-11M)和特異性(BekiszJ,etal.，2004，GrowthFactors,22:243)。早期對I型干擾素的功能研究主要都集中在抗病毒感染等先天性免疫。但近年來，更多的研究提示I型干擾素在適應性免疫也有很強的免疫調節作用，包括促進抗體分泌和支持T記憶細胞的功能活性和存活等。尤其有研究表明IFN-α可以促進樹突狀細胞(DC)的成熟或者激活(SantiniS.M.,etal.,2000,J.EXP.Med.,191:1777)。而且，有研究發現，多種自身免疫性疾病都表現出I型干擾素過表達。其中，胰島素依賴的糖尿病(IDDM)和系統性紅斑狼瘡(SLE)與IFN-α的表達升高相關，而IFN-β則可能與類風濕性關節炎(RA)相關。而且，有報道顯示臨床上I型IFN用藥導致一些自身免疫性疾病(包括銀屑病和多發性硬化癥等)的惡化，而且可能在沒有自身免疫病史的病人中誘導SLE樣癥狀。此外，研究顯示，TMPD在正常小鼠中能夠有效誘導系統性紅斑狼瘡癥狀，但不能在IFNAR1基因缺陷的小鼠中誘導特異的自身抗體(NacionalesD.C.,etal.,2007,ArthritisRheum,56:3770)。在BXSB模型小鼠體內，在疾病早期抗IFNAR1抗體表現出明顯的治療效果(BaccalaR.,etal.,2012,J.Immunol,189:5876)。因而，在臨床上，抑制I型干擾素受體(IFNAR)可能使某些自身免疫性疾病的病人受益，而且臨床上也需要一些能夠有效抑制I型干擾素受體的藥物用于多種自身免疫性疾病(包括系統性紅斑狼瘡)的治療。因此，探索和開發能抑制IFNAR的物質(例如，抗體)具有重要的生物學和醫學意義。技術實現要素：第一方面，本申請提供了特異性結合人I型干擾素受體亞基1(IFNAR1)的抗體，其包含含HCDR1、HCDR2和HCDR3序列的重鏈可變區，其特征在于：所述HCDR1序列為NYWVA(SEQIDNO:29)，所述HCDR2序列為IIYPGDSDTRYSPSFQG(SEQIDNO:30)，所述HCDR3序列為HDVTGYDY(SEQIDNO:31)；或者，所述HCDR1序列為NYWMA(SEQIDNO:32)，所述HCDR2序列為IIYPSDSDTRYSPSFQG(SEQIDNO:33)，所述HCDR3序列為HDVEGYDY(SEQIDNO:34)；或者，所述HCDR1序列為NYWVA(SEQIDNO:29)，所述HCDR2序列為IIYPSDSDTRYSPSFQG(SEQIDNO:33)，所述HCDR3序列為HDVHGYDY(SEQIDNO:35)；或者，所述HCDR1序列為NYWIG(SEQIDNO:36)，所述HCDR2序列為RIYPSDSNTSYSPSFQG(SEQIDNO:37)，所述HCDR3序列為DASSKTYDS(SEQIDNO:38)；或者，所述HCDR1序列為NYWIG(SEQIDNO:36)，所述HCDR2序列為RIYPGDSYTRYSPSFQG(SEQIDNO:39)，所述HCDR3序列為DGAPAKGDFDY(SEQIDNO:40)；其中HCDR序列根據Kabat定義。在一些實施方案中，所述抗體的重鏈可變區序列如SEQIDNO:19、20、23、24或者25的氨基酸序列所示。第二方面，本申請提供了特異性結合人IFNAR1的抗體，其包含含LCDR1、LCDR2和LCDR3序列的輕鏈可變區，其特征在于：所述LCDR1序列為RASQNVGNYLN(SEQIDNO:41)，所述LCDR2序列為RASNLAS(SEQIDNO:42)，所述LCDR3序列為QQMEHAPPT(SEQIDNO:43)；或者，所述LCDR1序列為RASQSVIGYYLA(SEQIDNO:44)，所述LCDR2序列為SVSTLAS(SEQIDNO:45)，所述LCDR3序列為QQYYRFPIT(SEQIDNO:46)；或者，所述LCDR1序列為RASQNVSNYLN(SEQIDNO:47)，所述LCDR2序列為RASNLQS(SEQIDNO:48)，所述LCDR3序列為QQMMDAPPT(SEQIDNO:49)；或者，所述LCDR1序列為SGSSSNIGTNAVN(SEQIDNO:50)，所述LCDR2序列為SKNQRPP(SEQIDNO:51)，所述LCDR3序列為AAWDDSQNGYVV(SEQIDNO:52)；或者，所述LCDR1序列為RASEGIGNHLN(SEQIDNO:53)，所述LCDR2序列為TASNLQS(SEQIDNO:54)，所述LCDR3序列為QQTYITPLT(SEQIDNO:55)；其中LCDR序列根據Kabat定義。在一些實施方案中，所述抗體的輕鏈可變區序列如SEQIDNO:21、22、26、27或者28的氨基酸序列所示。第三方面，本申請提供了特異性結合人IFNAR1的抗體，其包含含HCDR1、HCDR2和HCDR3序列的重鏈可變區及含LCDR1、LCDR2和LCDR3序列的輕鏈可變區，其特征在于：所述HCDR1序列為NYWVA(SEQIDNO:29)，所述HCDR2序列為IIYPGDSDTRYSPSFQG(SEQIDNO:30)，所述HCDR3序列為HDVTGYDY(SEQIDNO:31)，所述LCDR1序列為RASQNVGNYLN(SEQIDNO:41)，所述LCDR2序列為RASNLAS(SEQIDNO:42)，所述LCDR3序列為QQMEHAPPT(SEQIDNO:43)；或者，所述HCDR1序列為NYWVA(SEQIDNO:29)，所述HCDR2序列為IIYPGDSDTRYSPSFQG(SEQIDNO:30)，所述HCDR3序列為HDVTGYDY(SEQIDNO:31)，所述LCDR1序列為RASQSVIGYYLA(SEQIDNO:44)，所述LCDR2序列為SVSTLAS(SEQIDNO:45)，所述LCDR3序列為QQYYRFPIT(SEQIDNO:46)；或者，所述HCDR1序列為NYWMA(SEQIDNO:32)，所述HCDR2序列為IIYPSDSDTRYSPSFQG(SEQIDNO:33)，所述HCDR3序列為HDVEGYDY(SEQIDNO:34)，所述LCDR1序列為RASQNVGNYLN(SEQIDNO:41)，所述LCDR2序列為RASNLAS(SEQIDNO:42)，所述LCDR3序列為QQMEHAPPT(SEQIDNO:43)；或者，所述HCDR1序列為NYWMA(SEQIDNO:32)，所述HCDR2序列為IIYPSDSDTRYSPSFQG(SEQIDNO:33)，所述HCDR3序列為HDVEGYDY(SEQIDNO:34)，所述LCDR1序列為RASQSVIGYYLA(SEQIDNO:44)，所述LCDR2序列為SVSTLAS(SEQIDNO:45)，所述LCDR3序列為QQYYRFPIT(SEQIDNO:46)；或者，所述HCDR1序列為NYWVA(SEQIDNO:29)，所述HCDR2序列為IIYPSDSDTRYSPSFQG(SEQIDNO:33)，所述HCDR3序列為HDVHGYDY(SEQIDNO:35)，所述LCDR1序列為RASQNVSNYLN(SEQIDNO:47)，所述LCDR2序列為RASNLQS(SEQIDNO:48)，所述LCDR3序列為QQMMDAPPT(SEQIDNO:49)；或者，所述HCDR1序列為NYWIG(SEQIDNO:36)，所述HCDR2序列為RIYPSDSNTSYSPSFQG(SEQIDNO:37)，所述HCDR3序列為DASSKTYDS(SEQIDNO:38)，所述LCDR1序列為SGSSSNIGTNAVN(SEQIDNO:50)，所述LCDR2序列為SKNQRPP(SEQIDNO:51)，所述LCDR3序列為AAWDDSQNGYVV(SEQIDNO:52)；或者，所述HCDR1序列為NYWIG(SEQIDNO:36)，所述HCDR2序列為RIYPGDSYTRYSPSFQG(SEQIDNO:39)，所述HCDR3序列為DGAPAKGDFDY(SEQIDNO:40)，所述LCDR1序列為RASEGIGNHLN(SEQIDNO:53)，所述LCDR2序列為TASNLQS(SEQIDNO:54)，所述LCDR3序列為QQTYITPLT(SEQIDNO:55)；其中HCDR和LCDR序列根據Kabat定義。在一些實施方案中，特異性結合人IFNAR1的抗體的重鏈可變區序列為SEQIDNO:19，輕鏈可變區序列為SEQIDNO:21。在一些實施方案中，特異性結合人IFNAR1的抗體的重鏈可變區序列為SEQIDNO:19，輕鏈可變區序列為SEQIDNO:22。在一些實施方案中，特異性結合人IFNAR1的抗體的重鏈可變區序列為SEQIDNO:20，輕鏈可變區序列為SEQIDNO:21。在一些實施方案中，特異性結合人IFNAR1的抗體的重鏈可變區序列為SEQIDNO:20，輕鏈可變區序列為SEQIDNO:22。在一些實施方案中，特異性結合人IFNAR1的抗體的重鏈可變區序列為SEQIDNO:23，輕鏈可變區序列為SEQIDNO:26。在一些實施方案中，特異性結合人IFNAR1的抗體的重鏈可變區序列為SEQIDNO:24，輕鏈可變區序列為SEQIDNO:27。在一些實施方案中，特異性結合人IFNAR1的抗體的重鏈可變區序列為SEQIDNO:25，輕鏈可變區序列為SEQIDNO:28。在上述三方面的一些實施方案中，特異性結合人IFNAR1的抗體為全長抗體、Fab片段、F(ab')2片段或單鏈Fv片段。在一些實施方案中，特異性結合人IFNAR1的抗體是全人源抗體。在一些實施方案中，特異性結合人IFNAR1的抗體還包含選自IgG1亞型(SEQIDNO:7)、IgG2亞型(SEQIDNO:8)或IgG4亞型(SEQIDNO:9)的重鏈恒定區和/或包含選自κ亞型(SEQIDNO:10)或者λ亞型(SEQIDNO:11)的輕鏈恒定區。第四方面，本申請提供了包含第一至第三方面所述的特異性結合人IFNAR1的抗體的藥物組合物。第五方面，本申請提供了第一至第三方面所述的特異性結合人IFNAR1的抗體，或者第四方面所述藥物組合物在制備用于預防或治療由人IFNAR1介導的疾病的藥物中的用途。在一些實施方案中，所述疾病為自身免疫性疾病。在一些實施方案中，所述自身免疫性疾病包括但不限于，系統性紅斑狼瘡、銀屑病、多發性硬化癥、類風濕性關節炎。附圖說明圖1顯示了噬菌體展示載體pADSCFV-S的結構示意圖。圖2顯示了對照單抗抗IFNAR1-C1和抗IFNAR1-C2對噬菌體展示單鏈抗體S3A5、S3H8和S5B4結合人IFNAR1能力的抑制。圖3顯示了ELISA分析抗人IFNAR1單抗與不同種屬IFNAR1蛋白的結合能力。圖4顯示了不同抗人IFNAR1單抗在人血清中的穩定性分析。圖5顯示了基于Daudi細胞分析三種不同抗人IFNAR1單抗(H19B7+L16C11、H19B7+L8C3或抗IFNAR1-C2(嵌合))對濃度為0.67nM的IFNα-2b-HSA的抑制。圖6顯示了基于HEK-BlueTMIFNα/β細胞分析三種不同抗人IFNAR1單抗(H19B7+L16C11、H19B7+L8C3或抗IFNAR1-C2(嵌合))對濃度為0.1nM的IFNω的抑制。圖7顯示了不同抗人IFNAR1單抗(H19B7+L16C11、H19B7+L8C3、H15D10+L16C11、H15D10+L8C3或抗IFNAR1-C1)對熱的穩定性分析的熔解曲線圖/導數圖(20160405-DSF)。序列說明SEQIDNO:1為人IFNAR1胞外區(hIFNAR1)的氨基酸序列。SEQIDNO:2為小鼠IFNAR1胞外區(mIFNAR1)的氨基酸序列。SEQIDNO:3為獼猴IFNAR1胞外區(mmIFNAR1)的氨基酸序列。SEQIDNO:4為人IFNβ(IFNβ)的氨基酸序列。SEQIDNO:5為His標簽的氨基酸序列。SEQIDNO:6為鼠抗體IgG2a的Fc段(mFc)的氨基酸序列。SEQIDNO:7為抗體重鏈恒定區IgG1亞型的氨基酸序列。SEQIDNO:8為抗體重鏈恒定區IgG2亞型的氨基酸序列。SEQIDNO:9為抗體重鏈恒定區IgG4亞型的氨基酸序列。SEQIDNO:10為抗體κ亞型輕鏈恒定區的氨基酸序列。SEQIDNO:11為抗體λ亞型輕鏈恒定區的氨基酸序列。SEQIDNO:12為單鏈抗體S3A5的氨基酸序列。SEQIDNO:13為單鏈抗體S3H8的氨基酸序列。SEQIDNO:14為單鏈抗體S5B4的氨基酸序列。SEQIDNO:15為對照重組抗體抗IFNAR1-C1的VH的氨基酸序列。SEQIDNO:16為對照重組抗體抗IFNAR1-C1的VL的氨基酸序列。SEQIDNO:17為對照重組抗體抗IFNAR1-C2的VH的氨基酸序列。SEQIDNO:18為對照重組抗體抗IFNAR1-C2的VL的氨基酸序列。SEQIDNO:19為重鏈突變體H15D10的氨基酸序列。SEQIDNO:20為重鏈突變體H19B7的氨基酸序列。SEQIDNO:21為輕鏈突變體L8C3的氨基酸序列。SEQIDNO:22為輕鏈突變體L16C11的氨基酸序列。SEQIDNO:23為單鏈抗體S3A5的重鏈可變區序列的氨基酸序列。SEQIDNO:24為單鏈抗體S3H8的重鏈可變區序列的氨基酸序列。SEQIDNO:25為單鏈抗體S5B4的重鏈可變區序列的氨基酸序列。SEQIDNO:26為單鏈抗體S3A5的輕鏈可變區的氨基酸序列。SEQIDNO:27為單鏈抗體S3H8的輕鏈可變區的氨基酸序列。SEQIDNO:28為單鏈抗體S5B4的輕鏈可變區的氨基酸序列。SEQIDNO:29為本申請鑒定的一種HCDR1的氨基酸序列。SEQIDNO:30為本申請鑒定的一種HCDR2的氨基酸序列。SEQIDNO:31為本申請鑒定的一種HCDR3的氨基酸序列。SEQIDNO:32為本申請鑒定的一種HCDR1的氨基酸序列。SEQIDNO:33為本申請鑒定的一種HCDR2的氨基酸序列。SEQIDNO:34為本申請鑒定的一種HCDR3的氨基酸序列。SEQIDNO:35為本申請鑒定的一種HCDR3的氨基酸序列。SEQIDNO:36為本申請鑒定的一種HCDR1的氨基酸序列。SEQIDNO:37為本申請鑒定的一種HCDR2的氨基酸序列。SEQIDNO:38為本申請鑒定的一種HCDR3的氨基酸序列。SEQIDNO:39為本申請鑒定的一種HCDR2的氨基酸序列。SEQIDNO:40為本申請鑒定的一種HCDR3的氨基酸序列。SEQIDNO:41為本申請鑒定的一種LCDR1的氨基酸序列。SEQIDNO:42為本申請鑒定的一種LCDR2的氨基酸序列。SEQIDNO:43為本申請鑒定的一種LCDR3的氨基酸序列。SEQIDNO:44為本申請鑒定的一種LCDR1的氨基酸序列。SEQIDNO:45為本申請鑒定的一種LCDR2的氨基酸序列。SEQIDNO:46為本申請鑒定的一種LCDR3的氨基酸序列。SEQIDNO:47為本申請鑒定的一種LCDR1的氨基酸序列。SEQIDNO:48為本申請鑒定的一種LCDR2的氨基酸序列。SEQIDNO:49為本申請鑒定的一種LCDR3的氨基酸序列。SEQIDNO:50為本申請鑒定的一種LCDR1的氨基酸序列。SEQIDNO:51為本申請鑒定的一種LCDR2的氨基酸序列。SEQIDNO:52為本申請鑒定的一種LCDR3的氨基酸序列。SEQIDNO:53為本申請鑒定的一種LCDR1的氨基酸序列。SEQIDNO:54為本申請鑒定的一種LCDR2的氨基酸序列。SEQIDNO:55為本申請鑒定的一種LCDR3的氨基酸序列。SEQIDNO:56為人抗體重鏈可變區基因VH1的核苷酸序列。SEQIDNO:57為人抗體重鏈可變區基因VH3的核苷酸序列。SEQIDNO:58為人抗體重鏈可變區基因VH5的核苷酸序列。SEQIDNO:59為人抗體輕鏈可變區基因VK1的核苷酸序列。SEQIDNO:60為人抗體輕鏈可變區基因Vl3的核苷酸序列。SEQIDNO:61為PelB前導肽的編碼基因的核苷酸序列。SEQIDNO:62為無關序列的核苷酸序列。SEQIDNO:63為單鏈抗體S3A5的編碼基因的核苷酸序列。SEQIDNO:64為單鏈抗體S3H8的編碼基因的核苷酸序列。SEQIDNO:65為單鏈抗體S5B4的編碼基因的核苷酸序列。發明詳述本申請的發明人通過構建大容量天然人源噬菌體抗體庫，篩選并優化得到了具有希望性質的抗人IFNAR1抗體。在本申請的多個方面，提供了新的抗人IFNAR1的單克隆抗體或其抗原結合片段，編碼該單克隆抗體或其抗原結合片段的多核苷酸、包含所述多核苷酸的載體、包含所述多核苷酸或載體的宿主細胞、制備和純化該抗體的方法及所述抗體或其抗原結合片段的醫學和生物學應用。根據本申請提供的抗體的可變區的序列，可構建全長的抗體分子作為藥物用于治療臨床上由IFNAR1介導的自身免疫系統疾病。這些疾病包括但不局限于系統性紅斑狼瘡、銀屑病、多發性硬化癥、類風濕性關節炎。除非另外指明，本發明的實施將采用本領域常規的分子生物學、微生物學、細胞生物學、生物化學以及免疫學技術。除非另外指明，本申請中所用的術語具有本領域技術人員通常所理解的含義。定義如本文所用術語“抗體”，是指能夠經由至少一個位于免疫球蛋白分子的可變區中的抗原識別位點特異性結合到標靶的免疫球蛋白分子。標靶包括但不限于碳水化合物、多聚核苷酸、脂質、多肽等。本文所使用的“抗體”不僅包括完整的(即全長的)抗體，而且還包括其抗原結合片段(例如Fab、Fab'、F(ab')2、Fv)、其變異體、包含抗體部分的融合蛋白、人源化抗體、嵌合抗體、雙抗體、線性抗體、單鏈抗體、多特異性抗體(例如雙特異性抗體)及任何其他包含所需特異性的抗原識別位點的免疫球蛋白分子的修改配置，包括抗體的糖基化變體、抗體的氨基酸序列變體及共價修飾的抗體。通常，完整或全長的抗體包含兩個重鏈和兩個輕鏈。每個重鏈含有重鏈變異區(VH)和第一、第二及第三恒定區(CH1、CH2及CH3)。每個輕鏈含有輕鏈變異區(VL)和恒定區(CL)。全長的抗體可以是任何種類的抗體，例如IgD、IgE、IgG、IgA或IgM(或上述的子類)，但抗體不需要屬于任何特定的類別。根據重鏈的恒定域的抗體氨基酸序列，可以將免疫球蛋白指定為不同的類別。通常，免疫球蛋白有五種主要的類別：IgA、IgD、IgE、IgG及IgM，而且這些類別中有幾個可以再被進一步區分成子類(同型)，例如IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1及IgA2。對應于不同免疫球蛋白類別的重鏈恒定域分別稱為α、δ、ε、γ、以及μ。不同類別的免疫球蛋白的子單元結構和三維結構是公知的。如本文所用術語“抗原結合片段”，是指負責結合抗原的完整抗體分子的一部分或區域。抗原結合域可以包含重鏈變異區(VH)、輕鏈變異區(VL)或上述兩者。VH和VL中的每個通常含有三個互補決定區CDR1、CDR2及CDR3。本領域技術人員公知，互補決定區(CDR，通常有CDR1、CDR2及CDR3)是可變區中對抗體的親和力和特異性影響最大的區域。VH或VL的CDR序列有兩種常見的定義方式，即kabat定義和Chothia定義。(參閱例如Kabat,“SequencesofProteinsofImmunologicalInterest”，NationalInstitutesofHealth,Bethesda，Md.(1991)；A1-Lazikanietal.，J.Mol.Biol.273:927-948(1997)；以及Martinetal.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA86:9268-9272(1989))。對于給定抗體的可變區序列，可以根據Kabat定義或者Chothia定義來確定VH和VL序列中CDR區序列。在本申請的實施方案中，利用Kabat定義CDR序列。對于給定抗體的可變區序列，可以通過多種方式分析可變區序列中CDR區序列，例如可以利用在線軟件Abysis確定(http://www.abysis.org/)。抗原結合片段的實例包括但不限于：(1)Fab片段，其可以是具有VL-CL鏈和VH-CH1鏈的單價片段；(2)F(ab')2片段，其可以是具有兩個Fab'片段的二價片段，該兩個Fab'片段由鉸鏈區的二硫橋(即Fab'的二聚物)連接；(3)具有抗體的單臂的VL和VH域的Fv片段；(4)單鏈Fv(scFv)，其可以是由VH域和VL域經由勝肽連接符組成的單一多勝肽鏈；以及(5)(scFv)2，其可以包含兩個由勝肽連接符連接的VH域和兩個VL域，該兩個VL域是經由二硫橋與該兩個VH域組合。如本文所用術語“特異性結合”，是指兩個分子之間的非隨機結合反應，例如抗體至抗原表位的結合。具體實施方式第一方面，本申請提供了特異性結合人IFNAR1的抗體，其包含含HCDR1、HCDR2和HCDR3序列的重鏈可變區，其特征在于：所述HCDR1序列為NYWVA(SEQIDNO:29)，所述HCDR2序列為IIYPGDSDTRYSPSFQG(SEQIDNO:30)，所述HCDR3序列為HDVTGYDY(SEQIDNO:31)；或者，所述HCDR1序列為NYWMA(SEQIDNO:32)，所述HCDR2序列為IIYPSDSDTRYSPSFQG(SEQIDNO:33)，所述HCDR3序列為HDVEGYDY(SEQIDNO:34)；或者，所述HCDR1序列為NYWVA(SEQIDNO:29)，所述HCDR2序列為IIYPSDSDTRYSPSFQG(SEQIDNO:33)，所述HCDR3序列為HDVHGYDY(SEQIDNO:35)；或者，所述HCDR1序列為NYWIG(SEQIDNO:36)，所述HCDR2序列為RIYPSDSNTSYSPSFQG(SEQIDNO:37)，所述HCDR3序列為DASSKTYDS(SEQIDNO:38)；或者，所述HCDR1序列為NYWIG(SEQIDNO:36)，所述HCDR2序列為RIYPGDSYTRYSPSFQG(SEQIDNO:39)，所述HCDR3序列為DGAPAKGDFDY(SEQIDNO:40)；其中HCDR序列根據Kabat定義。在一些實施方案中，所述抗體的重鏈可變區序列如SEQIDNO:19、20、23、24或者25的氨基酸序列所示。第二方面，本申請提供了特異性結合人IFNAR1的抗體，其包含含LCDR1、LCDR2和LCDR3序列的輕鏈可變區，其特征在于：所述LCDR1序列為RASQNVGNYLN(SEQIDNO:41)，所述LCDR2序列為RASNLAS(SEQIDNO:42)，所述LCDR3序列為QQMEHAPPT(SEQIDNO:43)；或者，所述LCDR1序列為RASQSVIGYYLA(SEQIDNO:44)，所述LCDR2序列為SVSTLAS(SEQIDNO:45)，所述LCDR3序列為QQYYRFPIT(SEQIDNO:46)；或者，所述LCDR1序列為RASQNVSNYLN(SEQIDNO:47)，所述LCDR2序列為RASNLQS(SEQIDNO:48)，所述LCDR3序列為QQMMDAPPT(SEQIDNO:49)；或者，所述LCDR1序列為SGSSSNIGTNAVN(SEQIDNO:50)，所述LCDR2序列為SKNQRPP(SEQIDNO:51)，所述LCDR3序列為AAWDDSQNGYVV(SEQIDNO:52)；或者，所述LCDR1序列為RASEGIGNHLN(SEQIDNO:53)，所述LCDR2序列為TASNLQS(SEQIDNO:54)，所述LCDR3序列為QQTYITPLT(SEQIDNO:55)；其中LCDR序列根據Kabat定義。在一些實施方案中，所述抗體的輕鏈可變區序列如SEQIDNO:21、22、26、27或者28的氨基酸序列所示。第三方面，本申請提供了特異性結合人IFNAR1的抗體，其包含含HCDR1、HCDR2和HCDR3序列的重鏈可變區及含LCDR1、LCDR2和LCDR3序列的輕鏈可變區，其特征在于：所述HCDR1序列為NYWVA(SEQIDNO:29)，所述HCDR2序列為IIYPGDSDTRYSPSFQG(SEQIDNO:30)，所述HCDR3序列為HDVTGYDY(SEQIDNO:31)，所述LCDR1序列為RASQNVGNYLN(SEQIDNO:41)，所述LCDR2序列為RASNLAS(SEQIDNO:42)，所述LCDR3序列為QQMEHAPPT(SEQIDNO:43)；或者，所述HCDR1序列為NYWVA(SEQIDNO:29)，所述HCDR2序列為IIYPGDSDTRYSPSFQG(SEQIDNO:30)，所述HCDR3序列為HDVTGYDY(SEQIDNO:31)，所述LCDR1序列為RASQSVIGYYLA(SEQIDNO:44)，所述LCDR2序列為SVSTLAS(SEQIDNO:45)，所述LCDR3序列為QQYYRFPIT(SEQIDNO:46)；或者，所述HCDR1序列為NYWMA(SEQIDNO:32)，所述HCDR2序列為IIYPSDSDTRYSPSFQG(SEQIDNO:33)，所述HCDR3序列為HDVEGYDY(SEQIDNO:34)，所述LCDR1序列為RASQNVGNYLN(SEQIDNO:41)，所述LCDR2序列為RASNLAS(SEQIDNO:42)，所述LCDR3序列為QQMEHAPPT(SEQIDNO:43)；或者，所述HCDR1序列為NYWMA(SEQIDNO:32)，所述HCDR2序列為IIYPSDSDTRYSPSFQG(SEQIDNO:33)，所述HCDR3序列為HDVEGYDY(SEQIDNO:34)，所述LCDR1序列為RASQSVIGYYLA(SEQIDNO:44)，所述LCDR2序列為SVSTLAS(SEQIDNO:45)，所述LCDR3序列為QQYYRFPIT(SEQIDNO:46)；或者，所述HCDR1序列為NYWVA(SEQIDNO:29)，所述HCDR2序列為IIYPSDSDTRYSPSFQG(SEQIDNO:33)，所述HCDR3序列為HDVHGYDY(SEQIDNO:35)，所述LCDR1序列為RASQNVSNYLN(SEQIDNO:47)，所述LCDR2序列為RASNLQS(SEQIDNO:48)，所述LCDR3序列為QQMMDAPPT(SEQIDNO:49)；或者，所述HCDR1序列為NYWIG(SEQIDNO:36)，所述HCDR2序列為RIYPSDSNTSYSPSFQG(SEQIDNO:37)，所述HCDR3序列為DASSKTYDS(SEQIDNO:38)，所述LCDR1序列為SGSSSNIGTNAVN(SEQIDNO:50)，所述LCDR2序列為SKNQRPP(SEQIDNO:51)，所述LCDR3序列為AAWDDSQNGYVV(SEQIDNO:52)；或者，所述HCDR1序列為NYWIG(SEQIDNO:36)，所述HCDR2序列為RIYPGDSYTRYSPSFQG(SEQIDNO:39)，所述HCDR3序列為DGAPAKGDFDY(SEQIDNO:40)，所述LCDR1序列為RASEGIGNHLN(SEQIDNO:53)，所述LCDR2序列為TASNLQS(SEQIDNO:54)，所述LCDR3序列為QQTYITPLT(SEQIDNO:55)；其中HCDR和LCDR序列根據Kabat定義。在一些實施方案中，特異性結合人IFNAR1的抗體的重鏈可變區序列為SEQIDNO:19，輕鏈可變區序列為SEQIDNO:21。在一些實施方案中，特異性結合人IFNAR1的抗體的重鏈可變區序列為SEQIDNO:19，輕鏈可變區序列為SEQIDNO:22。在一些實施方案中，特異性結合人IFNAR1的抗體的重鏈可變區序列為SEQIDNO:20，輕鏈可變區序列為SEQIDNO:21。在一些實施方案中，特異性結合人IFNAR1的抗體的重鏈可變區序列為SEQIDNO:20，輕鏈可變區序列為SEQIDNO:22。在一些實施方案中，特異性結合人IFNAR1的抗體的重鏈可變區序列為SEQIDNO:23，輕鏈可變區序列為SEQIDNO:26。在一些實施方案中，特異性結合人IFNAR1的抗體的重鏈可變區序列為SEQIDNO:24，輕鏈可變區序列為SEQIDNO:27。在一些實施方案中，特異性結合人IFNAR1的抗體的重鏈可變區序列為SEQIDNO:25，輕鏈可變區序列為SEQIDNO:28。在上述三方面的一些實施方案中，特異性結合人IFNAR1的抗體為全長抗體、Fab片段、F(ab')2片段或單鏈Fv片段。在一些實施方案中，特異性結合人IFNAR1的抗體是全人源抗體。在一些實施方案中，特異性結合人IFNAR1的抗體還包含選自IgG1亞型(SEQIDNO:7)、IgG2亞型(SEQIDNO:8)或IgG4亞型(SEQIDNO:9)的重鏈恒定區和/或包含選自κ亞型(SEQIDNO:10)或者λ亞型(SEQIDNO:11)的輕鏈恒定區。在一些實施方案中，特異性結合人IFNAR1的抗體拮抗至少一種與IFNAR1或其部分相關的體外或體內生物活性。在一些實施方案中，特異性結合IFNAR1的抗體能夠特異性結合重組人IFNAR1胞外區。在一些實施方案中，抗體特征在于以高于背景的水平特異性結合人IFNAR1和獼猴IFNAR1，而不結合小鼠IFNAR1。本申請還提供了編碼上述抗體或其抗原結合片段的多核苷酸、包含所述多核苷酸的載體以及用所述載體轉染的宿主細胞。第四方面，本申請提供了包含第一至第三方面所述的特異性結合人IFNAR1的抗體的藥物組合物。在一些實施方案中，藥物組合物還包含藥學可接受的載體、賦形劑、稀釋劑等。在一些實施方案中，藥物組合物還可包含潤滑劑，如滑石粉、硬脂酸鎂和礦物油；潤濕劑；乳化劑；懸浮劑；防腐劑，如苯甲酸、山梨酸和丙酸鈣；增甜劑和/或調味劑等。在一些實施方案中，可將本申請中的藥物組合物配制為片劑、丸劑、粉劑、錠劑、酏劑、懸液、乳劑、溶液、糖漿、栓劑或膠囊等形式。在一些實施方案中，可以利用任何生理上可接受的給藥方式遞送本申請的藥物組合物，這些給藥方式包括但不限于：口服給藥、腸胃外給藥、經鼻給藥、直腸給藥、腹膜內給藥、血管內注射、皮下給藥、經皮給藥、吸入給藥等。在一些實施方案中，可以通過混合具有所需純度的試劑與視情況的藥學上可接受的載體、賦形劑等，以凍干制劑或水溶液的形式配制用于治療用途的藥物組合物用于存儲。第五方面，本申請提供了第一至第三方面所述的特異性結合人IFNAR1的抗體，或者第四方面所述藥物組合物在制備用于預防或治療由人IFNAR1介導的疾病的藥物中的用途。在一些實施方案中，所述疾病為自身免疫性疾病。在一些實施方案中，所述自身免疫性疾病包括但不限于，系統性紅斑狼瘡、銀屑病、多發性硬化癥、類風濕性關節炎。在一些實施方案中，本申請的抗體的親和力、其與不同種屬的IFNAR1的結合、其在人血清中的穩定性、其藥理學活性、其熱穩定性可以在標準測試方法中進行證明。第六方面，本申請還提供編碼本發明抗體或其輕鏈或其重鏈的分離的核酸分子以及包含所述核酸分子的載體、包含所述載體的宿主細胞以及產生所述抗體的方法。在一些實施方案中，所述核酸分子可操作地連接到調控序列，調控序列可以被用所述載體轉化過的宿主細胞識別。在一些實施方案中，產生抗體的方法包括培養宿主細胞以便于表達核酸。在一些實施方案中，產生抗體的方法還包括從宿主細胞培養基中回收抗體。此外，本文所述的特異性結合人IFNAR1的抗體也可用于檢測生物樣品中IFNAR1的存在。基于抗體的檢測方法在本領域是眾所周知的，并且包括例如ELISA、免疫印跡、放射免疫試驗、免疫熒光、免疫沉淀以及其它相關技術。應當理解，以上詳細描述僅為了使本領域技術人員更清楚地了解本申請的內容，而并非意圖在任何方面加以限制。本領域技術人員能夠對所述實施方案進行各種改動和變化。以下實施例僅用于說明而非限制本申請范圍的目的。實施例實施例1高質量噬菌體展示抗體庫的構建抗體庫技術是制備和篩選人單克隆抗體的一個重要方法，而基于噬菌體展示的抗體庫技術則是目前成熟的抗體庫技術，已經成功地應用于人單抗藥物的制備。本實施例描述利用當今多種基因工程技術構建噬菌體展示抗體庫的策略和方法。1.1制備抗體重鏈和輕鏈可變區基因(VH和VL)為構建人抗體庫，首先需要獲得人抗體的重鏈可變區(VH)和輕鏈可變區(VL)基因。抗體可變區基因來自正常人外周血淋巴細胞以及全合成。1.1.1天然人抗體可變區基因的制備采集19個正常志愿者的血液(各50mL)，其中所采集的血液由發明人及其同事作為志愿者提供，所有志愿者均已簽署知情同意書。志愿者的納入標準為：1.年齡大于18周歲；2.無HIV、HBV感染；3.血常規檢測正常；4.非孕婦或哺乳期婦女。然后，用淋巴細胞分離液(MPBiomedicals公司,Cat#:0850494)分離淋巴細胞，利用Omega公司的總RNA提取試劑盒(Cat#:R6834-01)制備RNA，然后用TransGenBiotech公司的反轉錄試劑盒(Cat#:AT301-03)制備cDNA。用下表1所列的引物組進行PCR，分別擴增抗體的重鏈可變區基因(VH)和輕鏈可變區基因(VL，包括Vk和Vl)。利用常規的瓊脂糖凝膠電泳方法純化并回收擴增的PCR產物(VH,VK或Vl)，置于-20℃保存備用。表1擴增天然人抗體重鏈和輕鏈基因所用引物1.1.2全合成人抗體可變區基因的制備全合成抗體基因制備的基本策略是利用簡并引物在選定的模板抗體基因的CDR中引入設計的突變。為構建全合成人抗體庫，本實施例中選擇了3種人抗體重鏈可變區模板(VH1、VH3和VH5)和兩種人抗體輕鏈可變區模板(VK1和Vl3)構建人全合成抗體庫。設計并委托明琛志遠生物技術(北京)有限公司合成5種抗體可變區基因VH1(SEQIDNO:56)，VH3(SEQIDNO:57)，VH5(SEQIDNO:58)，VK1(SEQIDNO:59)以及Vl3(SEQIDNO:60)。設計并合成表2所列的引物，分別用于在5種可變區基因的CDR1、CDR2和CDR3中引入設計的各種突變。利用常規PCR技術及各組含有設計突變的兼并引物，分別在對應的CDR中引入設計的突變，然后再利用2～3輪重疊延伸PCR構建得到完整的重鏈可變區(VH1、VH3、VH5)和輕鏈可變區(VK1、VL3)基因。瓊脂糖凝膠電泳回收擴增的最終的可變區基因PCR產物，置于-20℃保存備用。表2擴增全合成人抗體可變區基因所用引物1.2構建單鏈抗體(ScFv)基因為構建單鏈抗體基因(ScFv)，在重鏈可變區(VH)和輕鏈可變區(VL)之間添加常用的由15個氨基酸組成的柔性連接肽，該連接肽的序列為GGGGSGGGGSGGGGS，該連接肽的編碼序列為ggtggaggcggttctggcggaggtgggagcggaggcggaggttca。設計的單鏈抗體的結構為VH-連接肽-VL。基于此實施例第一部分的方法，共獲得如下表3所示的多種重鏈和輕鏈可變區基因，即四種不同的重鏈可變區基因和3種輕鏈可變區基因。表3各種不同重鏈和輕鏈可變區基因。基于上述單鏈抗體的設計以及目前已經成熟重疊延伸PCR技術，可以將此表所示的不同重鏈和輕鏈進行組合，共構建獲得12種不同的單鏈抗體基因。利用瓊脂糖凝膠電泳方法純化并回收PCR擴增獲得的12種單鏈抗體基因，置于-20℃保存備用。1.3構建基于阿拉伯糖啟動子的噬菌體展示載體常用的噬菌體展示載體基于乳糖啟動子(Plac)，而乳糖啟動子由于其滲漏表達等特性，影響抗體庫的容量和多樣性。以常用的噬菌體展示載體pCANTAB5E(AmershamBiosciences/GE公司)為基礎，對pCANTAB5E進行了如下改造。利用AflIII和NotI雙酶切，將pCANTAB5E載體上的Plac啟動子及g3蛋白信號肽部分更換為包含AraC基因，阿拉伯糖啟動子(Para)及PelB前導肽(PelBleader，SEQIDNO:61)的片段。其中AraC基因和ParaC來自invitrogen公司的pBADhis載體，而PelB前導肽序列為人工合成序列。然后再利用NcoI和NotI雙酶切，將一段約750bp的無關序列(stuffsequence，SEQIDNO:62)克隆在NcoI和NotI位點之間，構建得到最終的新型噬菌體展示載體pADSCFV-S(圖1)。該載體中的NcoI位點和NotI位點，可以方便的用于克隆單鏈抗體(ScFv)基因。1.4人單鏈抗體庫及噬菌體展示抗體庫的制備利用NcoI和NotI雙酶切的策略，將1.2中制備的12種ScFv分別克隆至載體pADSCFV-S，將連接產物分別電轉TG1電轉感受態，每個子庫約20個電轉，總共約240次電轉。利用稀釋法對每個子庫的庫容量進行推算，隨機從每個子庫中取30～40個克隆進行序列分析，以推算每個子庫的正確率，匯總的12個子庫的庫容量及正確率見表4。此12個子庫的總庫容量達到1.0*10E9，平均正確率超過75％。表412個子庫的庫容量及正確率子庫庫容量正確率ScFv-VH1-VK14.79*10E781％ScFv-VH1-VL33.72*10E776％ScFv-VH1-VL2.2*10E770％ScFv-VH3-VK12.2*10E783％ScFv-VH3-VL33.14*10E778％ScFv–VH3-VL7.7*10E770％ScFv-VH5-VK12.68*10E774％ScFv-VH5-VL32.5*10E776％ScFv–VH5-VL9.2*10E784％ScFv-VH-VK15.9*10E775％ScFv-VH-VL37.7*10E772％ScFv–VH-VL27.2*10E785％將構建的12個子庫分別接種于2YTAG液體培養基(A:氨芐青霉素，100μg/mL；G:葡萄糖，2％)，37℃，220rpm震蕩培養至對數生長期(OD600＝0.8)，感染M13輔助噬菌體(M13KO7,NEB公司)，感染結束后置換為2YTAKA液體培養基(A:氨芐青霉素，100μg/mL；K:卡那霉素，70μg/mL；A:阿拉伯糖，0.001％)，28℃，220rpm震蕩培養過夜進行噬菌體擴增，然后利用PEG/Nacl沉淀方法制備純化噬菌體(噬菌體-ScFv)，并進行滴度測定。然后參照庫容量的比例將制備的12個子庫的噬菌體-ScFv進行混合，制備噬菌體展示人抗體庫，噬菌體的最終滴度為6*10E12cfu/mL，凍存于-70℃。此噬菌體展示抗體庫可以用于篩選針對各種目的抗原的特異性人抗體。實施例2各種重組抗原和抗體的制備為了制備和測試抗人IFNAR1單抗，合成了多種重組蛋白，包括人IFNAR1胞外區(hIFNAR1，SEQIDNO:1)，小鼠IFNAR1胞外區(mIFNAR1，SEQIDNO:2)和獼猴IFNAR1胞外區(mmIFNAR1，SEQIDNO:3)，人IFNβ(IFNβ，SEQIDNO:4)，以及對照重組抗體抗IFNAR1-C1(VH序列為SEQIDNO:15，VL序列為SEQIDNO:16；參見美國專利US7662381B2中人單抗3F11)和抗IFNAR1-C2(VH序列為SEQIDNO:17,VL序列為SEQIDNO:18；參見美國專利US7619070B2中鼠單抗64G12)。這些蛋白都有大量的翻譯后修飾(如:糖基化或二硫鍵等)，因而利用哺乳動物細胞表達系統將更有利于保持重組蛋白的結構和功能。此外，為了方便純化，非抗體類的重組蛋白在C端添加了His標簽(SEQIDNO:5)或者鼠抗體IgG2a的Fc段(mFc，SEQIDNO:6)。抗體重鏈恒定區可以是IgG1亞型(SEQIDNO:7)，IgG2亞型(SEQIDNO:8)或者IgG4亞型(SEQIDNO:9)，輕鏈恒定區可以是κ亞型(SEQIDNO:10)或者λ亞型(SEQIDNO:11)。根據Uniprot數據庫的各種目的重組蛋白的氨基酸序列，設計并合成上述各種重組蛋白的基因(包含His標簽或者mFc編碼基因)。利用常規的分子生物學技術將合成的各種重組蛋白基因克隆至合適的真核表達載體(如invitrogen公司的pcDNA3.1等)，然后利用脂質體(如invitrogen公司的293fectin等)或其它轉染試劑(如PEI等)將制備的重組蛋白表達質粒轉染入HEK293細胞(如invitrogen公司的HEK293F)，在無血清懸浮培養條件下培養3～5天，然后通過離心等方式收獲培養上清。His標簽融合表達的重組蛋白利用金屬螯合親和層析柱(如GE公司的HisTrapFF等)對培養上清中的重組蛋白進行一步純化。而mFc融合表達的重組蛋白和全抗體用ProteinA/G親和層析柱(如GE公司的MabselectSURE等)進行一步純化。然后利用脫鹽柱(如GE公司的Hitrapdesaulting等)將重組蛋白保存緩沖液置換為PBS(pH7.0)或者其它合適的緩沖液。實施例3利用噬菌體展示抗體庫技術篩選和優化抗人IFNAR1單抗3.1抗人IFNAR1單抗的篩選以實施例2制備的重組hIFNAR1-his為抗原，利用固相篩選策略(實驗方案參考噬菌體展示：通用實驗指南/(美)克拉克森(Clackson,T.),(美)洛曼(Lowman,H.B.)編；馬嵐等譯。化學工業出版社，2008.5)篩選實施例1制備的展示人單鏈抗體庫的噬菌體庫，獲得3株序列不同，但均能特異性結合人IFNAR1的人抗體，包括克隆S3A5(氨基酸序列為SEQIDNO:12，編碼序列為SEQIDNO:63，VH序列為SEQIDNO:23，VL序列為SEQIDNO:26)，S3H8(氨基酸序列為SEQIDNO:13，編碼序列為SEQIDNO:64，VH序列為SEQIDNO:24，VL序列為SEQIDNO:27)，S5B4(氨基酸序列為SEQIDNO:14，編碼序列為SEQIDNO:65，VH序列為SEQIDNO:25，VL序列為SEQIDNO:28)。3.2抗人IFNAR1單抗的初步功能分析利用經典的噬菌體-ELISA方法分析兩種功能性抗人IFNAR1單抗抗IFNAR1-C1和抗IFNAR1-C2與步驟3.1中篩選到的三種新型抗人IFNAR1抗體(S3A5、S3H8和S5B4)的表位的差異。將實施例2制備的重組hIFNAR1-his包被于96孔ELISA板(濃度為4μg/mL，100μL/孔)，4℃包被過夜。利用封閉液(2％牛乳-PBST)在37℃封閉1小時后，然后分別加入展示單鏈抗體(S3A5、S3H8或S5B4)的純化噬菌體或者噬菌體+5μg/mL的對照單抗(抗IFNAR1-C1或抗IFNAR1-C2，兩種重組對照抗體的重鏈恒定區均為IgG1亞型，輕鏈恒定區均為κ亞型)，在37℃結合1小時后用PBST進行常規洗滌，然后加入封閉液稀釋的HRP-抗M13單抗，在37℃結合1小時后用PBST進行常規洗滌，最后加入OPD底物液進行顯色,終止顯色后測定OD490。結果如圖2所示，抗IFNAR1-C1能夠明顯抑制噬菌體展示的S3A5和S3H8單抗與hIFNAR1-his的結合，而抗IFNAR1-C2對三種噬菌體展示抗體都沒有明顯的抑制效果。據此數據推測S3A5和S3H8單抗與hIFNAR1-his的結合表位與抗IFNAR1-C1完全或者部分重疊，與抗IFNAR1-C2不同；而S5B4單抗與hIFNAR1-his的結合表位與兩種對照抗體(抗IFNAR1-C1和抗IFNAR1-C2)都不相同。3.3基于重鏈CDR突變和輕鏈置換的策略對抗體S3A5進行體外親和力成熟基于雙載體的噬菌體展示系統，首先利用重鏈CDR(HCDRs)突變的策略(具體操作可參照本申請人之前提交的中國專利第201510097117.0號中的實施例5)對抗體S3A5單抗進行體外親和力成熟。其中在S3A5重鏈(S3A5-VH)的三個CDR中引入突變所需的關鍵引物見表5。利用經典的重疊延伸PCR(overlappingPCR)方法構建了庫容量超過2.0*10E7的S3A5-VH的突變庫。然后利用重組的hIFNAR1-his為抗原，對此重鏈突變庫進行了三輪篩選。最后鑒定出兩個親和力提高的重鏈突變體H15D10(SEQIDNO:19)和H19B7(SEQIDNO:20)。表5構建S3A5重鏈HCDRs突變庫所需引物隨后，以篩選到的重鏈H19B7為基礎，利用輕鏈置換(具體操作可參照本申請人之前提交的中國專利第201510097117.0號中的實施例4.3)對抗體S3A5進行進一步的親和力體外成熟研究，獲得能夠提高單抗親和力的輕鏈突變體L8C3(SEQIDNo:21)和L16C11(SEQIDNo:22)。最終，將篩選到的兩種新重鏈突變體(H15D10和H19B7)和兩種輕鏈突變體(L8C3和L16C11)進行組合，得到四種較親本S3A5親和力更好的四種抗體突變體，具體序列信息見表6。表6親和力成熟的抗人IFNAR1的單抗實施例4抗人IFNAR1的全抗體(IgG1亞型)親和力測定利用BIAcore3000生物大分子相互作用分析儀分別測定H15D10+L8C3、H19B7+L8C3、H15D10+L16C11、H19B7+L16C11和對照抗體抗IFNAR1-C2(嵌合)對hIFNAR1-His的親和力。胺基偶聯試劑(Aminecouplingkit)和人抗體捕獲試劑(humanantibodycapturekit)以及CM5芯片和pH7.4的10×HBS-EP均購自GEhealthcare公司。根據試劑盒中的說明書，將抗人FC段的抗體偶聯至芯片CM5的表面上，稀釋抗體蛋白至合適濃度，保證200RU左右的抗體被抗人Fc的抗體捕獲。將hIFNAR1-His設置一系列的濃度梯度(100nM、50nM、25nM、12.5nM、6.25nM、3.125nM、1.5625nM、0nM)流經固定相表面，測定各單克隆抗體的親和力。其中單抗H15D10+L8C3、H15D10+L16C11、H19B7+L8C3和H19B7+L16C11的重鏈恒定區均為IgG1亞型，輕鏈恒定區均為κ亞型。結果如表7所示：表7抗人IFNAR1的單克隆抗體的親和力常數測定值抗體Kon(1/MS)Koff(1/S)KD(nM)H15D10+L8C34.147*10E52.512*10E-46.058*10E-10H19B7+L8C35.478*10E51.673*10E-43.053*10E-10H15D10+L16C115.445*10E53.312*10E-46.082*10E-10H19B7+L16C115.491*10E51.933*10E-43.52*10E-10抗IFNAR1-C2(嵌合)3.953*10E46.115*10E-51.547*10E-9實施例5抗人IFNAR1單抗(IgG1亞型)與不同種屬IFNAR1的結合將制備的人IFNAR1(hIFNAR1)、鼠IFNAR1(mIFNAR1)和獼猴IFNAR1(mmIFNAR1)分別包被于96孔ELISA板(濃度為4μg/mL，100μL/孔)，4℃包被過夜。利用封閉液(2％牛乳-PBST)在37℃封閉1小時后，分別加入各種抗人IFNAR1單抗(H15D10+L8C3、H19B7+L8C3、H15D10+L16C11和H19B7+L16C11，對照抗體抗IFNAR1-C1和抗IFNAR1-C2(嵌合))，37℃結合1小時。用PBST洗滌ELISA板，加入HRP-抗人IgG(二抗)，37℃結合1小時。PBST洗滌ELISA板，加入OPD底物顯色液，5～10分鐘后用濃度為1M的H2SO4溶液終止顯色，酶標儀490nm/630nm雙波長測定光密度值。結果如圖3所示，本申請的抗人IFNAR1的單抗(H15D10+L8C3、H15D10+L16C11、H19B7+L8C3和H19B7+L16C11)及對照抗體(抗IFNAR1-C1和抗IFNAR1-C2(嵌合))均能夠結合人IFNAR1和獼猴IFNAR1，但不結合鼠IFNAR1。其中單抗H15D10+L8C3、H15D10+L16C11、H19B7+L8C3和H19B7+L16C11的重鏈恒定區均為IgG1亞型，輕鏈恒定區均為κ亞型。實施例6抗人IFNAR1單抗(IgG1亞型)在人血清中的穩定性分析為了初步分析不同抗人IFNAR1單抗分子的特異性及血清穩定性，進行了抗人IFNAR1單抗在人血清中的穩定性分析。此研究包括五種不同抗人IFNAR1單抗，分別為H15D10+L8C3、H15D10+L16C11、H19B7+L8C3、H19B7+L16C11和抗IFNAR1-C1。取過濾去菌的單抗樣品，分別稀釋于200μL無菌的正常人混合血清或PBS至終濃度30μg/mL，混勻后置37℃水浴放置12天(288小時)。12天后，利用ELISA分析血清樣品(A:正常人血清處理，37℃、12天)，PBS樣品(B:PBS處理，37℃、12天)和4℃保存的單抗樣品(C:4℃、12天)與hIFNAR1的結合(圖4)，并分別比較各單抗樣品結合hIFNAR1能力的變化(A/B)和(A/C)。其中單抗H15D10+L8C3、H15D10+L16C11、H19B7+L8C3和H19B7+L16C11的重鏈恒定區均為IgG1亞型，輕鏈恒定區均為κ亞型。圖4和表8中的結果表明上述五種抗人IFNAR1單抗都具有較好的血清穩定性。表8不同處理條件下抗人IFNAR1單抗結合hIFNAR1能力的變化實施例7抗人IFNAR1單抗(IgG1亞型)抑制I型干擾素誘導的Daudi細胞死亡Daudi細胞是人Burkkit淋巴瘤細胞，I型干擾素(包括IFNα/β/ω等)可有效抑制該細胞的生長。功能性抗IFNAR1單抗應該能夠有效阻斷I型干擾素(包括IFNα/β/ω等)和其受體(IFNAR1/IFNAR2復合物)的結合，并能夠抑制I型干擾素誘導的Daudi細胞死亡。在測試不同抗人IFNAR1單抗對I型干擾素的抑制時，將Daudi細胞以3.5×104個/孔的密度接種于96孔細胞板，然后分別用合適的固定濃度(如：0.67nM)的I型干擾素(如：IFNα-2b-HSA)和不同濃度(如：0～25nM)的抗人IFNAR1單抗(如：H19B7+L16C11、H19B7+L8C3或抗IFNAR1-C2(嵌合))同時處理Daudi細胞，然后置CO2培養箱37℃正常培養2～3天。然后用CCK8細胞檢測試劑盒(Yeasen，Cat#40203ES80)檢測細胞的增殖。最后利用GraphPadPrism6進行數據分析和作圖。其中單抗H19B7+L16C11和H19B7+L8C3重鏈恒定區均為IgG1亞型，輕鏈恒定區均為κ亞型。圖5展現了不同抗人IFNAR1單抗對濃度為0.67nM的IFNα-2b-HSA的抑制曲線。表9列舉了基于Daudi細胞分析方法時三種不同抗體對三種不同I型干擾素的抑制能力(IC50)。表9基于Daudi細胞比較三種不同抗人IFNAR1單抗對三種I型干擾素的抑制(IC50)實施例8抗人IFNAR1單抗(IgG1亞型)抑制I型干擾素介導的細胞內信號通路HEK-BlueTMIFNα/β細胞為InvivoGen公司基于HEK293細胞開發的一個工程細胞株(Cat#hkb-ifnab)。該細胞株中整合并表達人STAT2和IRF9基因，因而在I型干擾素(包括IFNα/β/ω)刺激下可以激活ISGF3信號通路。此外該細胞株中同時整合了分泌型堿性磷酸酶(SEAP)報告基因，而且該SEAP報告基因的表達受ISG54啟動子的調控。當用IFNα/β/ω刺激此細胞株時，細胞內的JAK/STAT/ISGF3信號通路被激活，并誘導SEAP報告基因表達，而且SEAP基因的表達可以利用InvivoGen公司提供的配套試劑QUANTI-BlueTM(InvivoGen，Cat#repqb1)進行方便的檢測。因而此細胞株可以用于分析I型干擾素(包括IFNα/β/ω)和I型干擾素受體(IFNAR1/2)的拮抗劑(如抗體等)的活性分析。在測試不同抗人IFNAR1單抗對I型干擾素的抑制時，將HEK-BlueTMIFNα/β細胞以5×104個/孔的密度接種于96孔細胞板，然后分別用合適的固定濃度(如：0.1nM)的I型干擾素(如：IFNω)和不同濃度(如：0～300nM)的抗IFNAR1單抗(如：H19B7+L16C11、H19B7+L8C3或抗IFNAR1-C2(嵌合))同時處理HEK-BlueTMIFNα/β細胞，然后置CO2培養箱37℃正常培養20～24小時。然后用Qu抗BlueTM染色劑(InvivoGen，Cat#repqb1)對培養上清中SEAP的表達量進行分析(參照試劑說明書進行)。最后利用GraphPadPrism6進行數據分析和作圖。其中單抗H19B7+L16C11和H19B7+L8C3重鏈恒定區均為IgG1亞型，輕鏈恒定區均為κ亞型。圖6展現了不同抗人IFNAR1單抗對IFNω的抑制曲線。表10列舉了基于HEK-BlueTMIFNα/β細胞分析方法時三種不同抗體對三種不同I型干擾素的抑制能力(IC50)。表10基于HEK-BlueTMIFNα/β細胞比較三種不同抗人IFNAR1單抗對三種I型干擾素的抑制(IC50)實施例9抗人IFNAR1單抗(IgG4亞型)熱穩定性分析熒光探針可與蛋白的疏水區結合發射熒光信號，程序升溫過程中，蛋白從折疊狀態轉變為展開狀態，熒光信號隨著疏水區的暴露改變，可以獲得溫度熒光曲線，可以根據曲線求得Tm值，判斷蛋白熱穩定性。在測試不同抗人IFNAR1單抗(IgG4)熱穩定性時，將抗人IFNAR1單抗(如：H19B7+L16C11、H19B7+L8C3、H15D10+L16C11、H15D10+L8C3或對照抗體抗IFNAR1-C1)稀釋至某一濃度(如1mg/mL)，加入一定比例的Orange(Sigma，Cat#S5692-50UL)。在熒光定量PCR(ABI，7500Fast)儀器上運行熔解曲線，升溫程序:25℃加熱到95℃，升溫速度1℃/分鐘，每個溫度平衡2分鐘，最后利用ProteinThermalShiftSoftware1.2進行數據分析和作圖。其中單抗H19B7+L16C11、H19B7+L8C3、H15D10+L16C11和H15D10+L8C3的重鏈恒定區均為IgG4亞型，輕鏈恒定區均為κ亞型。圖7展現了不同抗人IFNAR1單抗對熱的穩定性，結果顯示四種新型抗人IFNAR1單抗的熱穩定性都較對照抗體抗IFNAR1-C1好。雖然，上文中已經用一般性說明及具體實施方案對本發明作了詳盡的描述，但在本發明基礎上，可以對之作一些修改或改進，這對本領域技術人員而言是顯而易見的。因此，在不偏離本發明精神的基礎上所做的這些修改或改進，均屬于本發明要求保護的范圍。當前第1頁1 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