1.一種風輪菜中黃酮類化合物的分離方法,其特征在于,所述分離方法包括以下步驟:
從風輪菜的干燥地上部分提取總黃酮類物質;
對所述總黃酮類物質采用硅膠柱色譜進行分離,在所述分離過程中,以體積比為100:5~100:25的氯仿和甲醇為洗脫劑進行梯度洗脫,依次得到第1流分至第320流分;
對所述第1流分至第320流分中的第133-176流分進行硅膠柱色譜分離,以體積比依次為9:1、4:1、2:1、1:1和1:2的氯仿和丙酮為洗脫劑進行洗脫,并經薄層檢測合并相同組分,得到A1至A13共13個流分;然后以體積比為60:40的甲醇和水作為洗脫劑,依次對所述13個流分進行C18反相高效液相色譜分離,分別得到化合物2、3、4、5、8、9、10、14、16、20、26、32和35;
對所述第1流分至第320流分中的第231-260流分進行MCI柱色譜分離,以所述體積比為60:40的甲醇和水為洗脫劑進行洗脫,并經薄層檢測合并相同組分,得到B1至B7共7個流分;然后依次對所述7個流分進行C18反相高效液相色譜分離,以甲醇和水作為洗脫劑進行洗脫,分別得到化合物6、21、22、28、29、30和33;
對所述第1流分至第320流分中的第295-310進行MCI柱色譜分離,以體積比為60:40的甲醇-水為洗脫劑進行洗脫,并經薄層檢測合并相同組分,得到C1至C8共8個流分;依次對所述8個流分進行C18反相高效液相色譜分離,以甲醇和水作為洗脫劑進行洗脫,分別得到化合物11、12、15、17、23、24、27和34;
對所述第1流分至第320流分中的第12-48流分進行Sephadex LH-20羥丙基葡聚糖凝膠柱層析,并以體積比為4:6氯仿和甲醇為洗脫劑進行洗脫,然后經薄層追蹤檢測合并相同組分,得到D1、D2和D3共3個流分;對所述D2流分進行C18反相高效液相色譜分離,以甲醇和水作為洗脫劑進行洗脫,得到化合物13和19;對所述D3流分進行反相高效液相色譜分離,以甲醇和水作為洗脫劑進行洗脫,得到化合物25;
對所述第1流分至第320流分中的第49-55流分進行Sephadex LH-20羥丙基葡聚糖凝膠柱層析,以體積比為4:6氯仿和甲醇為洗脫劑進行洗脫,然后以甲醇和水作為洗脫劑進行C18反相高效液相色譜分離,得到化合物1和18。
2.根據權利要求1所述的分離方法,其特征在于,對所述總黃酮類物質采用硅膠柱色譜進行分離的過程中,利用體積比分別為100:5、100:10、100:15、100:20和100:25的所述氯仿和甲醇作為洗脫劑進行梯度洗脫,依次得到第1流分至第320流分。
3.根據權利要求1或2所述的分離方法,其特征在于,所述分離法方法還包括:
對所述第1流分至第320流分中的第49-55流分進行Sephadex LH-20羥丙基葡聚糖凝膠柱層析,以體積比為4:6氯仿和甲醇為洗脫劑進行洗脫,然后以甲醇和水作為洗脫劑進行C18反相高效液相色譜分離,得到化合物1和18。
4.根據權利要求3所述的分離方法,其特征在于,所述分離方法進一步包括;
對所述第1流分至第320流分中的第79-86流分進行Sephadex LH-20羥丙基葡聚糖凝膠柱層析,以體積比為4:6氯仿和甲醇為洗脫劑進行洗脫,然后以甲醇和水作為洗脫劑進行C18反相高效液相色譜分離,得到化合物7和31。
5.根據權利要求1所述的分離方法,其特征在于,所述從風輪菜的干燥地上部分提取總黃酮類物質的步驟包括:
取風輪菜的干燥地上部分,用水提取得到水提液;
將所述水提液進行壓縮、干燥,得到水提物;
將所述水提物進行大孔樹脂層析,以乙醇和水為洗脫劑進行梯度洗脫,得到洗脫物;以及
將所述洗脫物進行堿提酸沉法富集,然后精制得到所述總黃酮類物質。
6.根據權利要求5所述的分離方法,其特征在于,所述大孔樹脂層析過程中采用D101大孔樹脂層析柱進行層析;所述乙醇和水形成的所述洗脫劑中乙醇的體積濃度分別為20%、50%、70%和95%;優選得到的所述洗脫物為乙醇體積濃度分別為20%、50%和70%的洗脫物。
7.一種黃酮組合物,其特征在于,所述黃酮組合物包括黃酮類結構的化合物、二氫黃酮類結構的化合物、黃酮醇類結構的化合物以及異黃酮類結構的化合物;其中,所述黃酮類結構的化合物至少包括以下任意一種:洋芹素-7-O-蕓香糖苷、木犀草苷、木犀草素-7-O-β-D-葡糖醛酸苷、木犀草素-7-O-β-D-葡糖醛酸正丁醇酯苷、木犀草素-7-O-蕓香糖苷、木犀草素-7-O-新橙皮糖苷、金合歡素-7-O-β-D-葡糖醛酸苷和金合歡素-7-O-β-D-蕓香糖苷,所述黃酮組合物是從風輪菜中分離得到,且所述黃酮類結構的化合物通過權利要求1至6中任一項所述的分離方法分離得到。
8.根據權利要求7所述的黃酮組合物,其特征在于,所述黃酮組合物中的所述二氫黃酮類結構的化合物至少包括以下任意一種:柚皮素-7-O-新橙皮糖苷、高圣草素、橙皮素-7-O-葡萄糖苷、圣草次苷、新北美圣草苷和5,7,3′,5′-四羥基二氫黃酮-7-O-新橙皮糖苷;所述二氫黃酮類結構的化合物通過權利要求1至6中任一項所述的分離方法分離得到。
9.根據權利要求8所述的黃酮組合物,其特征在于,所述黃酮組合物中的所述黃酮醇類結構的化合物至少包括以下任意一種:山奈酚-3-O-鼠李糖苷和山奈酚3-O-吡喃鼠李糖-7-O-葡萄糖苷;所述黃酮醇類結構的化合物通過權利要求1至6中任一項所述的分離方法分離得到。
10.根據權利要求7-9中任一項所述的黃酮組合物,其特征在于,所述黃酮組合物包括以下35種化合物:洋芹素、洋芹素-7-O-葡萄糖苷、洋芹素-7-O-葡糖醛酸苷、洋芹素-7-O-葡糖醛酸甲酯苷、羊紅膻酯、洋芹素-7-O-蕓香糖苷、木犀草素、木犀草苷、木犀草素-7-O-β-D-葡糖醛酸苷、木犀草素-7-O-β-D-葡糖醛酸正丁醇酯苷、木犀草素-7-O-蕓香糖苷、木 犀草素-7-O-新橙皮糖苷、金合歡素、金合歡素-7-O-β-D-葡糖醛酸苷、金合歡素-7-O-β-D-蕓香糖苷、日本椴苷、蒙花苷、柚皮素、異櫻花素、江戶櫻花苷、柚皮素-7-O-蕓香糖苷、柚皮素-7-O-新橙皮糖苷、香蜂草苷、枳屬苷、高圣草素、橙皮素-7-O-葡萄糖苷、橙皮苷、圣草次苷、新北美圣草苷、5,7,3′,5′-四羥基二氫黃酮-7-O-新橙皮糖苷、槲皮素、山奈酚-3-O-鼠李糖苷、山奈酚3-O-吡喃鼠李糖-7-O-葡萄糖苷、蘆丁和染料木苷;所述35種化合物通過權利要求1至6中任一項所述的分離方法分離得到。