，各組每天灌胃給藥1次，連續給藥4周。灌胃前37°C水浴 20min。各組給藥結束后，剩余藥液4 °C存儲，待再次使用。 表1實驗分組及給藥情況
注：10mL/kg，即大鼠每千克體重灌胃10mL水、陽性藥或配伍組份溶液;0.018g/kg，即大 鼠每千克體重灌胃〇.〇18g陽性藥，0.018g/kg即為10mL/kg;0.45g/kg，即大鼠每千克體重灌 胃 0 · 45g 配伍組份，0 · 45g/kg即為 1 OmL/kg。 1.4.6指標檢測 (1) 空腹血糖(FBG)測定:灌胃給藥后第7d、14d、21d、28d將大鼠禁食不禁水12h，于上午 8時尾尖采血測定FBG。 (2) 腎臟組織形態觀察:大鼠處死后，迅速解剖取出右側腎臟(側面剪開一段小口），于 10%福爾馬林中固定，HE染色，光鏡下觀察組織形態。 (3) 尿液、血液指標檢測:末次給藥結束后，禁食不禁水，收集16h的尿液，記錄尿量，并 在4°C條件下離心收集上清液;大鼠代謝結束后，處死，接取血液，4°C條件下靜置2h后離心 收集血清。取適量尿液，測定尿液中尿素氮含量;取適量血清，測定大鼠血清中甘油三酯、總 膽固醇、低密度脂蛋白的含量。 1.4.7統計學處理 實驗數據以Z±S:D表示，采用SPSS統計軟件作單因素方差分析進行組間比較，顯著性 水平以0.05和0.01為標準。 2 ·結果 2.1配伍對糖尿病大鼠 FBG影響 表2各實驗組28d的空腹血糖數據
[0073] 注:*與MC組比較，有顯著差異(P〈0 · 05);#與MC組比較，有極顯著差異(P〈0 ·01)， 下同。
[0074]各給藥組FBG隨著持續給藥而逐步降低。給藥28天后，各給藥組對下調FBG的作用 明顯，陽性藥組具有顯著性(P〈〇.05)，3個配伍組均具有極顯著性差異(P〈0.01)，其中3:6:1 組降血糖的效果最好，且該組血糖下調值多于陽性藥組。
[0075] 2.2配伍對糖尿病大鼠腎臟組織的影響
[0076]腎臟染色結果如附圖1所示，模型組腎小球擴張，腎小管腫脹，毛細血管管腔閉塞， 系膜細胞增多，腎近曲小管上皮細胞腫脹變性，空泡形成。與模型組相比各配伍給藥組和陽 性藥物組，在腎小球擴張程度上存在差異，毛細血管管腔閉塞得到改善，且空泡減少。其中 3:6:1配伍組在抑制腎小球擴張，改善毛血管管腔閉塞，減少近曲小管腫脹方面療效最好， 優于其他兩個配伍組甚至是鹽酸二甲雙胍組。 2.3配伍對糖尿病大鼠尿液尿素氮的影響 表3尿液尿素氮測定數據
與空白組相比，模型組大鼠尿液中尿素氮含量明顯升高，陽性藥組、各配伍給藥組與模 型組相比尿素氮含量明顯降低，均具統計學意義(P〈〇.01)，其中3:6:1組治療效果最優，且 優于陽性藥組。 2.4配伍對糖尿病大鼠血清甘油三酯、總膽固醇的影響 各組大鼠血清甘油三酯、總膽固醇測定結果見附圖2、3,與空白組比較，模型組大鼠血 清甘油三酯、總膽固醇明顯升高。陽性藥組與各配伍給藥組治療后大鼠血清甘油三酯、總膽 固醇含量明顯降低，與模型組比較具有極顯著性差異(P〈〇.01)，而且3:6:1配伍組效果優于 其他兩個配伍組，并與陽性藥組治療效果類似。 2.5配伍對糖尿病大鼠血清低密度脂蛋白的影響 各組大鼠血清低密度脂蛋白測定結果見附圖4,與空白組比較，模型組大鼠血清低密度 脂蛋白明顯升高。陽性藥組與各配伍給藥組治療后大鼠血清低密度脂蛋白含量明顯降低， 與模型組比較具有極顯著性差異(P〈〇.01)。其中3:6:1組治療效果最優，且優于陽性藥組。 通過上述結果得知模型組大鼠血清甘油三酯、總膽固醇、低密度脂蛋白均明顯升高，說 明大鼠已出現血脂代謝紊亂，給藥28天后，各指標均得到有效的改善，說明該發明具有輔助 降血脂功能。而實驗后大鼠血糖水平明顯降低，其中以3:6:1配伍組變化最大，因此可判定 該發明具有降低血脂血糖的作用。 通過上述實施例，本發明的目的已經被完全有效的達到了。熟悉該項技藝的人士應該 明白本發明包括但不限于附圖和上面【具體實施方式】中描述的內容。任何不偏離本發明的功 能和結構原理的修改都將包括在權利要求書的范圍中。
【主權項】
1. 一種治療糖尿病的藥物組合物，其特征在于是由如下重量份數的藥物制成的： 60 %~70 %多糖30~70份； 70 %~85 %皂苷25~60份； 55%~70%黃酮5~10份。2. 根據權利要求1所述的一種治療糖尿病的藥物組合物，其特征在于：所述的60%~ 70%多糖是由如下方法制得的： (1) 藥材脫脂：胡蘆巴、黃苗按10:1~5的重量比粉成粗粉，加入8~12倍量60-90°C石油 醚，400w功率下超聲脫脂40~60min，濾過，藥材粗粉揮干石油醚，備用； (2) 多糖提取:稱取脫脂藥材，加入5~20倍量60 %~80%乙醇，浸泡0.5~lh，熱回流提 取3次，每次1~2h，提取液減壓濃縮至無醇味，提取后所剩藥渣保留，干燥，加入5~15倍量 蒸餾水，10°C磁力攪拌條件下提取60~120min，10000r/min離心10min，收集上清液； (3) 多糖純化:60 %~80 %乙醇醇沉，靜置過夜，4000r/min離心10min，棄去上清，沉淀 用蒸餾水充分復溶，冷凍干燥，得多糖純化組份，顯色法測定多糖含量。3. 根據權利要求1所述的一種治療糖尿病的藥物組合物，其特征在于：所述的55%~ 70%黃酮是由如下方法制得的： (1) 藥材脫脂：胡蘆巴、黃芪按1 〇: 1~5的重量比粉成粗粉，加入8~12倍量60 °C~90 °C 石油醚，400w功率下超聲脫脂40~60min，濾過，藥材粗粉揮干石油醚，備用； (2) 提取:稱取脫脂藥材，加入5~20倍量60 %~80 %乙醇，浸泡0.5~lh，熱回流提取3 次，每次1~2h，提取液減壓濃縮至無醇味，以蒸餾水將濃縮液定容至0.2g生藥/mL，提取后 所剩藥渣保留，干燥，待提取多糖； (3) 上樣初純化:將步驟(2)所得0.2g生藥/ml提取液以lBV/h流速上樣至處理好的聚酰 胺樹脂柱，d = 1 Ocm，h = 60cm，1BV = 1.5倍的提取液體積，用4BV水以4BV/h流速洗脫除雜，再 以5BV60 %~80 %乙醇以4BV/h流速洗脫，洗脫液減壓濃縮至無醇味，加水溶解并定容至與 第一次定容相同的體積，待D101大孔吸附樹脂進一步純化； (4) 上樣再純化:將步驟(3)所得初純化黃酮溶液以lBV/h流速上樣至處理好的D101樹 脂柱，d = 10cm，h = 60cm，1BV = 1.5倍的提取液體積，用5BV20 %~40 %乙醇以4BV/h流速洗 脫，從第2BV體積開始收集洗脫液，減壓濃縮至少量體積后，冷凍干燥，得黃酮純化組分，顯 色法測定黃酮含量。4. 根據權利要求1所述的一種治療糖尿病的藥物組合物，其特征在于：所述的70%~ 85 %阜昔是由如下方法制得的： (1) 藥材脫脂：胡蘆巴、黃苗按10:1~5的重量比粉成粗粉，加入8~12倍量60-90°C石油 醚，400w功率下超聲脫脂40~60min，濾過，藥材粗粉揮干石油醚，備用； (2) 提取:稱取脫脂藥材，加入5~20倍量60 %~80 %乙醇，浸泡0.5~lh，熱回流提取3 次，每次1~2h，提取液減壓濃縮至無醇味，以蒸餾水將濃縮液定容至0.2g生藥/mL，提取后 所剩藥渣保留，干燥，待提取多糖； (3) 皂苷純化:將步驟(2)所得0.2g生藥/ml提取液以lBV/h流速上樣至處理好的DM130 樹脂柱，d = 10 cm，h = 60cm，1 BV = 1.5倍的提取液體積，吸附2h后，用3BV水以4BV/h流速洗脫 除雜，用5BV 20 %~40 %乙醇以4BV/h流速繼續除雜，再用5BV60 %~80 %乙醇以4BV/h流速 洗脫皂苷，洗脫液經濃縮冷凍干燥，得皂苷純化組份，顯色法測定皂苷含量。
【專利摘要】本發明涉及一種治療糖尿病的藥物組合物，屬于醫藥技術領域。是由如下重量份數的藥物制成的：60％～70％多糖30～70份，70％～85％皂苷25～60份，55％～70％黃酮5～10份。本發明的藥材原料以葫蘆巴為主、黃芪為輔，提供了一種有效的分離提純葫蘆巴、黃芪中多糖、皂苷、黃酮組分的方法，經深入研究，通過多糖、皂苷、黃酮組分的配伍，有效成分含量高，而且消除了藥物的毒性和副作用，質量容易控制，能顯著降低糖尿病動物血糖，對糖尿病及其并發癥有很好的預防和治療作用，本發明采用的中藥配伍組分治療糖尿病，制備工藝易于產業化，對于中藥現代化和走向國際市場具有重大而深遠的意義。
【IPC分類】A61K36/481, A61K36/48, A61P3/10
【公開號】CN105726624
【申請號】CN201610285707
【發明人】劉忠英, 汪佳琦, 姜文月, 張琳, 王雨, 趙芯, 門麗慧
【申請人】吉林大學
【公開日】2016年7月6日
【申請日】2016年5月4日