]實施例2
一種新型負載阿霉素的膠原蛋白-聚(3-丙烯酰胺基苯硼酸)的納米級藥物載體的制備方法，包括3-丙烯酰胺基苯硼酸的合成、膠原蛋白-聚(3-丙烯酰胺基苯硼酸)納米微球的制備和負載阿霉素的膠原蛋白-聚(3-丙烯酰胺基苯硼酸)的納米級藥物載體的制備三個步驟，完成新型負載阿霉素的膠原蛋白-聚(3-丙烯酰胺基苯硼酸)的納米級藥物載體的制備；具體步驟如下:
3-丙烯酰胺基苯硼酸的合成的具體步驟如下:
(9)將5.16g氫氧化鈉用雙蒸餾水制成50ml水溶液，將5.0g間氨基苯硼酸一水合物溶解在氫氧化鈉水溶液中；
(10)在10分鐘內將5.2ml64.4mmol的丙烯酰氯攪拌下逐滴加入上述的冷卻溶液中，攪拌30分鐘，隨后升到室溫并繼續攪拌2小時；
(11)將步驟(10)所得的混合物用鹽酸調節pH到8，過濾得到沉淀物，選用25mL冷水進行洗滌，所述洗滌次數為3次，然后在真空環境下進行干燥；
(12)將步驟(11)干燥所得的沉淀物溶解于50mL乙醇水溶液中，乙醇水溶液中的乙醇與水的體積比為80:20，過濾，將過濾液靜置過夜，過濾所得白色固體，在真空環境下進行干燥，得到白色固體，即完成了 3-丙烯酰胺基苯硼酸的合成；
膠原蛋白-聚(3-丙烯酰胺基苯硼酸)納米微球的制備的具體步驟如下:
(13)將120mg膠原蛋白-1型和90mg3-丙稀酰胺基苯硼酸加熱溶解于1mL蒸饋水中，加熱溫度為50°C ；自然冷卻；
(14)將9.4mg的4,4-偶氮雙加入到步驟(13)所得的冷卻溶液中，再用氫氧化鈉水溶液調節溶液的PH值到6.3;利用水浴鍋將反應溶液加熱到90 V，緩慢攪拌，反應混合物會慢慢變藍，完成膠原蛋白-聚(3-丙烯酰胺基苯硼酸)納米微球的制備；
負載阿霉素的膠原蛋白-聚(3-丙烯酰胺基苯硼酸)的納米級藥物載體的制備的具體步驟如下:
(15)將制備的5mg/mL膠原蛋白-聚(3-丙烯酰胺基苯硼酸)納米微球溶液用氫氧化鈉的水溶液調節PH值到8.4，膠原蛋白-聚(3-丙烯酰胺基苯硼酸)納米微球溶液為5ml;
(16)將ImL濃度為3mg/mL的鹽酸阿霉素水溶液逐滴加入到納米微球的水溶液中，攪拌下反應12小時，離心去上清，將沉淀物重新分散在水溶液中或5%葡萄糖的注射液中，即完成了負載阿霉素的膠原蛋白-聚(3-丙烯酰胺基苯硼酸)的納米級藥物載體的制備。
[0014]本實施例下制備得到的新型負載阿霉素的膠原蛋白-聚(3-丙烯酰胺基苯硼酸)的納米級藥物載體的顆粒直徑為83.5nm。
[0015]實施例3
一種新型負載阿霉素的膠原蛋白-聚(3-丙烯酰胺基苯硼酸)的納米級藥物載體的制備方法，包括3-丙烯酰胺基苯硼酸的合成、膠原蛋白-聚(3-丙烯酰胺基苯硼酸)納米微球的制備和負載阿霉素的膠原蛋白-聚(3-丙烯酰胺基苯硼酸)的納米級藥物載體的制備三個步驟，完成新型負載阿霉素的膠原蛋白-聚(3-丙烯酰胺基苯硼酸)的納米級藥物載體的制備；具體步驟如下:
3-丙烯酰胺基苯硼酸的合成的具體步驟如下:
(17)將5.16g氫氧化鈉用雙蒸餾水制成50ml水溶液，將5.0g間氨基苯硼酸一水合物溶解在氫氧化鈉水溶液中；
(18)在10分鐘內將5.2ml64.4mmol的丙烯酰氯攪拌下逐滴加入上述的冷卻溶液中，攪拌30分鐘，隨后升到室溫并繼續攪拌2小時；
(19)將步驟(18)所得的混合物用鹽酸調節pH到8，過濾得到沉淀物，選用25mL冷水進行洗滌，洗滌次數為3次，然后在真空環境下進行干燥；
(20)將步驟(19)干燥所得的沉淀物溶解于50mL乙醇水溶液中，乙醇水溶液中的乙醇與水的體積比為80:20，過濾，將過濾液靜置過夜，過濾所得白色固體，在真空環境下進行干燥，得到白色固體，即完成了 3-丙烯酰胺基苯硼酸的合成；
膠原蛋白-聚(3-丙烯酰胺基苯硼酸)納米微球的制備的具體步驟如下:
(21)將120mg膠原蛋白-1型和90mg3-丙稀酰胺基苯硼酸加熱溶解于1mL蒸饋水中，加熱溫度為45°C ；自然冷卻；
(22)將9.4mg的4,4-偶氮雙加入到步驟(21)所得的冷卻溶液中，再用氫氧化鈉水溶液調節溶液的PH值到6.3;利用水浴鍋將反應溶液加熱到90 V，緩慢攪拌，反應混合物會慢慢變藍，完成膠原蛋白-聚(3-丙烯酰胺基苯硼酸)納米微球的制備；
負載阿霉素的膠原蛋白-聚(3-丙烯酰胺基苯硼酸)的納米級藥物載體的制備的具體步驟如下:
(23)將制備的5mg/mL膠原蛋白-聚(3-丙烯酰胺基苯硼酸)納米微球溶液用氫氧化鈉的水溶液調節PH值到8.4，膠原蛋白-聚(3-丙烯酰胺基苯硼酸)納米微球溶液為5ml;
(24)將ImL濃度為3mg/mL的鹽酸阿霉素水溶液逐滴加入到納米微球的水溶液中，攪拌下反應12小時，離心去上清，將沉淀物重新分散在水溶液中或5%葡萄糖的注射液中，即完成了負載阿霉素的膠原蛋白-聚(3-丙烯酰胺基苯硼酸)的納米級藥物載體的制備。
[0016]本實施例下制備得到的新型負載阿霉素的膠原蛋白-聚(3-丙烯酰胺基苯硼酸)的納米級藥物載體的顆粒直徑為81.3nm。
[0017]本發明的載藥納米微球在不同PH值溶液中釋放實驗結果證明負載阿霉素的膠原蛋白-聚(3-丙烯酰胺基苯硼酸)的納米級藥物載體作為阿霉素抗腫瘤藥物的載體，可以有很好緩釋的效果和腫瘤部位選擇性釋放的特性。空白的膠原蛋白-聚(3-丙烯酰胺基苯硼酸)納米微球對細胞沒有細胞毒性。載藥納米微球有較好的緩釋功能及潛在降低毒副作用的可能。在相同的給藥劑量下，載藥納米微球組對皮下移植瘤的增長有較好的抑制作用。
[0018]上述實施例只是本發明的較佳實施例，并不是對本發明技術方案的限制，只要是不經過創造性勞動即可在上述實施例的基礎上實現的技術方案，均應視為落入本發明專利的權利保護范圍內。
【主權項】
1.一種新型負載阿霉素的膠原蛋白-聚(3-丙烯酰胺基苯硼酸)的納米級藥物載體，其特征在于:由阿霉素和納米載體構成，所述納米載體為膠原蛋白-聚(3-丙烯酰胺基苯硼酸)納米微球，所述新型負載阿霉素的膠原蛋白-聚(3-丙烯酰胺基苯硼酸)的納米級藥物載體的顆粒直徑為75-115nm。2.權利要求1所述的新型負載阿霉素的膠原蛋白-聚(3-丙烯酰胺基苯硼酸)的納米級藥物載體的制備方法，其特征在于:包括3-丙烯酰胺基苯硼酸的合成、膠原蛋白-聚(3-丙烯酰胺基苯硼酸)納米微球的制備和負載阿霉素的膠原蛋白-聚(3-丙烯酰胺基苯硼酸)的納米級藥物載體的制備三個步驟，完成新型負載阿霉素的膠原蛋白-聚(3-丙烯酰胺基苯硼酸)的納米級藥物載體的制備;具體步驟如下: 3-丙烯酰胺基苯硼酸的合成的具體步驟如下: 將5.16g氫氧化鈉用雙蒸餾水制成50ml水溶液，將5.0 g間氨基苯硼酸一水合物溶解在氫氧化鈉水溶液中； 在1分鐘內將5.2mL 64.4mmo I的丙烯酰氯攪拌下逐滴加入上述的冷卻溶液中，攪拌30分鐘，隨后升到室溫并繼續攪拌2小時； 將步驟(2)所得的混合物用鹽酸調節pH到8，過濾得到沉淀物，選用25mL冷水進行洗滌，所述洗滌次數為3次，然后在真空環境下進行干燥； 將步驟(3)干燥所得的沉淀物溶解于50 mL乙醇水溶液中，所述乙醇水溶液中的乙醇與水的體積比為80: 20，過濾，將過濾液靜置過夜，過濾所得白色固體，在真空環境下進行干燥，得到白色固體，即完成了 3-丙烯酰胺基苯硼酸的合成； 膠原蛋白-聚(3-丙烯酰胺基苯硼酸)納米微球的制備的具體步驟如下: 將120mg膠原蛋白-1型和90mg 3-丙稀酰胺基苯硼酸加熱溶解于1mL蒸饋水中，所述加熱溫度為40-50°C ；自然冷卻； 將9.4mg的4，4_偶氮雙加入到步驟(5)所得的冷卻溶液中，再用氫氧化鈉水溶液調節溶液的PH值到6.3;利用水浴鍋將反應溶液加熱到90°C，緩慢攪拌，反應混合物會慢慢變藍，完成膠原蛋白-聚(3-丙烯酰胺基苯硼酸)納米微球的制備； 負載阿霉素的膠原蛋白-聚(3-丙烯酰胺基苯硼酸)的納米級藥物載體的制備的具體步驟如下: 將制備的5mg/mL膠原蛋白-聚(3-丙烯酰胺基苯硼酸)納米微球溶液用氫氧化鈉的水溶液調節PH值到8.4，所述膠原蛋白-聚(3-丙烯酰胺基苯硼酸)納米微球溶液為5ml; 將ImL濃度為3mg/mL的鹽酸阿霉素水溶液逐滴加入到納米微球的水溶液中，攪拌下反應12小時，離心去上清，將沉淀物重新分散在水溶液中或5 %葡萄糖的注射液中，即完成了負載阿霉素的膠原蛋白-聚(3-丙烯酰胺基苯硼酸)的納米級藥物載體的制備。
【專利摘要】本發明公開了一種新型負載阿霉素的膠原蛋白-聚(3-丙烯酰胺基苯硼酸)的納米級藥物載體及其制備方法，包括3-丙烯酰胺基苯硼酸的合成、膠原蛋白-聚(3-丙烯酰胺基苯硼酸)納米微球的制備和負載阿霉素的膠原蛋白-聚(3-丙烯酰胺基苯硼酸)的納米級藥物載體的制備三個步驟；本發明的優點在于：本發明負載阿霉素的膠原蛋白-聚(3-丙烯酰胺基苯硼酸)的納米級藥物載體以膠原蛋白-聚(3-丙烯酰胺基苯硼酸)合成的納米微球作為載體，可以將阿霉素緩慢釋放，并且在腫瘤部位選擇性釋放藥物，增加腫瘤部位的藥物濃度，有更好的腫瘤殺傷效果，同時降低抗腫瘤藥物引起的毒副作用。
【IPC分類】A61P35/00, A61K9/10, A61K47/42, A61K47/34, A61K31/704
【公開號】CN105616348
【申請號】CN201610128198
【發明人】蔣海燕, 奚慶華, 祁雷, 黃中偉, 張魯中
【申請人】南通大學附屬醫院
【公開日】2016年6月1日
【申請日】2016年3月8日