離子水中,45°C下磁力攪拌0.5小時后加入2g過氧化氫,得到混合液,用0.4mol/L 的氫氧化鈉調節混合液的pH值至9后繼續磁力攪拌0.5小時,然后在1400 r/min下機械攪拌 25分鐘進行發泡,得到發泡后的混合液; f將步驟議所得發泡后的混合液倒入模具中,置入-65T:冷凍1小時后放入冷凍干燥 機中在-45 °C冷凍干燥5小時,得到多巴胺交聯的明膠吸液止血海綿。
[0021 ] 實施例2 將1 l〇g普朗尼克F68、lg 丁二酸酐、1 ? 5g4-二甲氨基吡啶和0 ? 8g三乙胺溶于450ml二 氯甲烷中,在30°C下攪拌反應35小時,減壓蒸發除去二氯甲烷得到剩余物; 將步驟1.所得剩余物加入15ml氯仿溶解,緩慢攪拌下加入1500ml乙醚有沉淀生成, 過濾收集產生的沉淀,將沉淀用該步驟重復處理5次,得到白色固體,將所得白色固體在30 °C下真空干燥,得到羧基化的普朗尼克F68; (f'將80g步驟:1)所得羧基化的普朗尼克F68、20gl-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞 胺鹽酸鹽溶于600mlMES緩沖液,攪拌反應40分鐘后加入20gN-羥基琥珀酰亞胺,攪拌反應40 分鐘后加入60g明膠,在40°C下攪拌反應35小時,得到反應液; 'I.將步驟i'.所得反應液用MW=20000的半透袋透析80小時,收集透析袋中的液體,將所 收集的透析袋中的液體在3000rpm下離心40分鐘,在-55°C冷凍干燥7小時冷凍干燥得到超 親水改性明膠; _*l〇〇g步驟:_所得超親水改性明膠、50g多巴胺鹽酸鹽、20g丙二醇和20g司盤60溶 于500ml去離子水中,45°C下磁力攪拌1.5小時后加入25g高碘酸鈉,得到混合液,用0. lmol/ L鹽酸調節混合液的pH值至6后繼續磁力攪拌1.5小時,然后在1600 r/min下機械攪拌35分 鐘進行發泡,得到發泡后的混合液; #將步驟:⑤所得發泡后的混合液倒入模具中,置入-75T:冷凍1小時后放入冷凍干燥 機中在-55 °C冷凍干燥7小時,得到多巴胺交聯的明膠吸液止血海綿。
[0022] 實施例3 1:將100g普朗尼克P338、lg丁二酸酐、1 ? 2g4-二甲氨基吡啶和0 ? 6g三乙胺溶于400ml 乙酸乙酯中,在25°C下攪拌反應30小時,減壓蒸發除去乙酸乙酯得到剩余物; 、=將步驟I所得剩余物加入15ml氯仿溶解,緩慢攪拌下加入1200ml乙醚有沉淀生成, 過濾收集產生的沉淀,將沉淀用該步驟重復處理4次,得到白色固體,將所得白色固體在25 °C下真空干燥,得到羧基化的普朗尼克P338; I將50g步驟芝所得羧基化的普朗尼克P338、27gl-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞 胺鹽酸鹽溶于450mlMES緩沖液,攪拌反應30分鐘后加入18gN-羥基琥珀酰亞胺,攪拌反應30 分鐘后加入55g明膠,在45 °C下攪拌反應30小時,得到反應液; ?'1;'將步驟Cl.所得反應液用MW=20000的半透袋透析75小時,收集透析袋中的液體,將所 收集的透析袋中的液體在2950rpm下離心35分鐘,在-50°C冷凍干燥6小時冷凍干燥得到超 親水改性明膠; $將50g步驟冱所得超親水改性明膠、100g多巴胺鹽酸鹽、20g山梨醇和10g吐溫80溶 于2500ml去離子水中,35~45 °C下磁力攪拌0.5~1.5小時后加入10g高碘酸鈉,得到混合液, 用0.4mol/L的氫氧化鈉調節混合液的pH值至7后繼續磁力攪拌1小時,然后在1450 r/min下 機械攪拌30分鐘進行發泡,得到發泡后的混合液; I.將步驟CI)所得發泡后的混合液倒入模具中,置入_68°C冷凍1小時后放入冷凍干燥 機中在-48 °C冷凍干燥6.5小時,得到多巴胺交聯的明膠吸液止血海綿。
[0023] 實施例4 1將20g普朗尼克F127、0.2g丁二酸酐、0.23g4-二甲氨基吡啶和0.15g三乙胺溶于1, 4_二氧六環中,在25°C下攪拌反應28小時,減壓蒸發除去1,4_二氧六環得到剩余物; I將步驟①所得剩余物加入8ml氯仿溶解,緩慢攪拌下加入640ml乙醚有沉淀生成,過 濾收集產生的沉淀,將沉淀用該步驟重復處理3次,得到白色固體,將所得白色固體在28°C 下真空干燥,得到羧基化的普朗尼克F127; (f將8g步驟所得羧基化的普朗尼克F127、3.6gl-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞 胺鹽酸鹽溶于MES緩沖液,攪拌反應35分鐘后加入2.8gN-羥基琥珀酰亞胺,攪拌反應35分鐘 后加入明膠,在48 °C下攪拌反應32小時,得到反應液; I將步驟|所得反應液用MW=20000的半透袋透析72小時,收集透析袋中的液體,將所 收集的透析袋中的液體在3000rpm下離心35分鐘,在-48°C冷凍干燥6小時冷凍干燥得到超 親水改性明膠; f將l〇g步驟所得超親水改性明膠、3g多巴胺鹽酸鹽2.8g山梨醇、2.1g吐溫80溶于 50g去離子水中,38°C下磁力攪拌1.2小時后加入0.8g NaKk,得到混合液,調節混合液的pH 值至8后繼續磁力攪拌1.2小時,然后在1550 r/min下機械攪拌26分鐘進行發泡,得到發泡 后的混合液; 1將步驟S所得發泡后的混合液倒入模具中,置入_68°C冷凍1小時后放入冷凍干燥 機中在-48 °C冷凍干燥5.5小時,得到多巴胺交聯的明膠吸液止血海綿。
[0024] 實施例5 .1將l〇〇g普朗尼克F68、lg丁二酸酐、1.2g 4-二甲氨基吡啶和0.6g三乙胺溶于 400mll,4-二氧六環中,在25°C下攪拌反應30小時,減壓蒸發除去1,4_二氧六環得到剩余 物; .1.將步驟I所得剩余物加入l〇ml氯仿溶解,緩慢攪拌下加入600ml乙醚有沉淀生成, 過濾收集產生的沉淀,將沉淀用該步驟重復處理4次,得到白色固體,將所得白色固體在25 °C下真空干燥,得到羧基化的普朗尼克F68; 1將60g步驟f所得羧基化的普朗尼克F68、40gl-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞 胺鹽酸鹽溶于600mlMES緩沖液,攪拌反應30分鐘后加入20gN-羥基琥珀酰亞胺,攪拌反應30 分鐘后加入80g明膠,在45 °C下攪拌反應30小時,得到反應液; 將步驟I所得反應液用MW=20000的半透袋透析75小時,收集透析袋中的液體,將所 收集的透析袋中的液體在3000rpm下離心30分鐘,在-50°C冷凍干燥6小時冷凍干燥得到超 親水改性明膠; 今將l〇〇g步驟3:所得超親水改性明膠、l〇〇g多巴胺鹽酸鹽、5g丙三醇、5g吐溫80和 〇.5g維生素K3溶于1000g去離子水中,40°C下磁力攪拌1.2小時后加入強氧化劑10g過氧化 氫,得到混合液,調節混合液的pH值至7后繼續磁力攪拌1小時,然后在1500 r/min下機械攪 拌30分鐘進行發泡,得到發泡后的混合液; 1將步驟這/所得發泡后的混合液倒入模具中,置入_7〇°C冷凍1小時后放入冷凍干燥 機中在-50 °C冷凍干燥6小時,得到多巴胺交聯的明膠吸液止血海綿。
[0025] 1.本發明多巴胺交聯的明膠吸液止血海綿對大鼠背部創面的止血性能的研究 SD大鼠56只,隨機分7組:實施例1~5所得多巴胺交聯的明膠吸液止血海綿分別對應組 號為1~5,無菌紗布對應組號為6和縮醛化聚乙烯醇海綿對應組號為7,分別對應組號為1~7, 將大鼠進行以下相同的操作:麻醉,切開背側皮膚,暴露出一側豎脊肌,使其完全離斷,用實 施例卜5所得多巴胺交聯的明膠吸液止血海綿、無菌紗布和縮醛化