葡萄糖儲存。 在后兩種情況中，均導致血糖濃度升高。由于膜島素抵抗所造成的高膜島素和葡萄糖血漿 水平通常發展成代謝綜合征和2型糖尿病。
[0078] 本發明在代謝綜合征(如本文所定義的）的治療中具有應用。該病癥也稱為(代謝） 綜合征X、膜島素抵抗綜合征、Reaven ' S綜合征和CHAOS。
[0079] 本發明在與代謝綜合征有關的疾病的治療中具有應用，其包括(例如）：脂肪肝(通 常發展成非酒精性脂肪肝疾病）、多囊卵巢綜合征、血色沉著病(鐵過載)和黑棘皮病(皮膚 暗塊)。
[0080] 本發明在2型糖尿病治療中具有應用。2型糖尿病是其特征在于血糖水平持續升高 的慢性疾病（高血糖癥）。該疾病的特征在于膜島素抵抗W及膜腺e-細胞中膜島素分泌受 損。膜島素抵抗向2型糖尿病的發展的標志在于當膜腺0-細胞不能產生足夠的膜島素 W維 持正常血糖水平(血糖正常)時，進食后高血糖癥出現。
[0081 ] 1型糖尿病
[0082] 本發明在1型糖尿病(或膜島素依賴型糖尿病）的治療中具有應用。1型糖尿病的特 征在于膜腺中膜島的膜島素產生e-細胞的損失，從而導致了膜島素的缺乏。造成運種e-細 胞損失的主要原因在于T細胞介導的自身免疫攻擊。尚沒有可W針對1型糖尿病(在北美洲 和歐洲，其占糖尿病病例的多至10%)的已知預防措施。當疾病發生時，大部分受影響的人 在其他方面是健康的或具有健康體重。對膜島素的敏感性和反應性通常是正常的，特別是 在早期階段。
[0083] 聖
[0084] 將參考具體的實施例來說明本發明。運些僅是示例性的并且僅出于說明性 的目的：它們不意欲W任何方式限制所述本發明獨占地主張的范圍。運些實施例構成了目 前對實踐本發明所考慮的最佳方式。
[0085] 實施例1:黑米(黑稻，Black Rice)中的亞胺糖
[00化]在通常用于蒸煮的沸水中提取來自意大利的黑米(Gallo Venere Riso Ne;r〇-26/ 04/15銷售-80011420002782)，并且將樣品磨碎并在50%冷乙醇水溶液中提取。將兩種提取 物過濾并在處于H+形式的強酸型陽離子交換樹脂IR120上分級。用水清洗后，用2M氨溶液替 換保留的材料，并通過旋轉蒸發減小體積。然后，將冷提取材料的IR120保留部分在陰離子 交換樹脂（CG4000IT形式）上進一步分離成結合和未結合樣品。將所有部分（級分、饋分， fraction)對一組糖巧酶進行測定，并且它們顯示出a和0-葡萄糖巧酶抑制，運可能是由于 f a g O m i n e和D N J造成的，但是另外它們強烈抑制a -和0 -半乳糖巧酶（a - a n d 0 -galactosidase)和兩種N -乙酷基- 0- D-氨基葡萄糖巧酶（N-acetyl-0-D-glucosaminidases)，運可能不是由fagomine或DNJ造成的。
[0087] 根據所述方法，通過氣相色譜法(GC-MS)的所述部分的分析顯示亞胺糖的復雜混 合物包含16%的低分子量氨基酸部分（13120樹脂保留）。8.5111旨/100旨稻米似乎是'日旨〇111；[]16 加一些其它亞胺糖，一些可能是新型的（與質譜的報道結構不匹配）。化gomine提供了獨特 的質譜圖，運是由于S甲基甲娃烷基衍生物在144、170、260和348amu觀察到了主要片段。運 種稻米中其它亞胺糖的特征在于170、262、286和376amu處的獨特亞胺糖片段。還觀察到了 具有類似光譜但更短保留時間（6.47分鐘，相比之下fagomine為7.2分鐘）的fagomine的差 向異構體（可能是3-巧ifagomine)。
[0088] GC-MS
[0089] 衍生化前，將所有樣品凍干。使用六甲基二娃氮燒化exame thy IdisilazaneWPIS 甲基氯硅烷在化晚中的混合物(Pierce ' Tri-Si 1'硅烷化試劑，HMDS: TMCS:化晚的比值為2: 1:10)制備S甲基甲娃烷基(TMS Jrimethylsilyl)衍生物。將樣品在60°C加熱15分鐘，然后 在室溫下保持至少60分鐘。通過離屯、使不溶的反應產物沉淀，并使用注射器將上清液轉移 到新的小瓶中。
[0090] 使用具有高極性烙融石英柱（化sed-silica column)(化rian'Factor Four'VF-5ms柱，25mX0.25mm i.d.，0.25皿相厚度）的化rkin Elmer Autosystem 化氣相色譜儀，通 過GC-MS進行分析。載氣（氮)流速為Iml min-i。使用起始于160°C，5分鐘，隨后W 10°Cmin-i 的速度，線性提高至300°C的升溫程序分離S甲基甲娃烷基-(TMS)衍生物。將溫度在300°C 保持另外IOmin ;總分析時間為29分鐘。在帶有四極離子過濾系統的Perkin Elmer TurboMass Gold質譜儀進行柱洗脫液的電子碰撞質譜（electron impact mass spec化ometry)，在分析期間W250°C持續運行。檢測器質量范圍設置為100至650amu。傳輸 線（transfer line) (GC至MS)的溫度保持在250°C。通過裝有去活化（deactivated)石英棉 的烙融石英窄孔注射襯墊(a fused silica narrow bore injection liner),經由分流出 口（分流比50 :1)將樣品注入所述柱上；進樣口溫度保持在200°C。進樣體積為化1。使用 Perkin Elmer TurboMass軟件（TurboMassv.4.4)進行系統控制、數據收集和質譜分析。 [0091 ]對Gallo Venere黑米的乙醇水溶液提取物進行糖巧酶抑制測定
[0092] 除了來自Megazyme的0-甘露糖巧酶外，所有的酶和對硝基苯底物(對硝基苯基底 物，para-nitro曲en}d substrate)購自Sigma。在處于酶的最適抑值的0.1 M巧樣酸/0.2M憐 酸氨二鋼緩沖液中，在27°C測定酶。培育混合物包括10山酶溶液、1化1 lOmg/ml的提取物水 溶液和50iil在處于酶的最適抑值的緩沖液中構成的適當的5mM對硝基苯底物。在反應的指 數期(使用其中水替代抑制劑的不受抑制的測定，在開始時已確定），通過加入70iU 0.4M甘 氨酸（pH 10.4)終止反應。使用Versamax酶標儀（微板讀取器，microplate reader) (Molecular Devices)，在405nm讀取最終的吸光值。測定重復S次，并且給出的數值表示為 每次測定3個重復的平均值。方法的參考文獻
[0093] Watson,A.A.等人.（1997) .Glycosidase-inhibiting pyrrolidine alkaloids from Hyacinthoides non-scripta.Phytochemistry 46(2):255-259
[0094] 表1:陰離子交換樹脂分離的黑米提取物的平均糖巧酶抑制％
[0095]
[0096] 實施{歹|]2.商口口口幸立（稻:>1^谷幸立，rice 邑rains)的fa邑omine^M
[0097] 據稱一些稻米品種具有低于其它品種(例如，棟色印度香米)的G巧旨數。
[0098] 在50%乙醇水溶液中提取了一組挑選的超市稻米產品，并使用陽離子交換色譜法 (IR12〇r形式)濃縮氨基酸部分。發現在聲稱具有低GI指數的一些品種（例如，棟色印度香 米和泰國萊莉香米）中存在化gomine和可能的其它亞胺糖，并且在其它品種(例如，長粒白 米）中沒有或濃度顯著更低。在一些品種中還存在1-脫氧野尻霉素(DNJ)。測量了葡糖醒酸 酶（葡糖醒酸巧酶，glucuronidase)抑制，其表明還可W存在亞胺糖酸。亞胺糖可W通過減 緩GI道中復合碳水化合物的降解來降低G巧旨數。
[0099] 表2:商品化米粒的化gomine含量 稻米類型 Fagomine含量 鳥氨基酸 糕色印度香米 Img/lOOg 53ing/100g 長粒鶴米 <0.01班餐/lOOg 29mg/l OO呂 泰國榮莉香米 0.4mg/100g 17.5ing/100g
[0100] 阿波羅米 <0.0 Img/1 OOg 37m;g/1 OQg 長粒。米 <化01 mg/ 100g 3 Img/100g 野生黑米 <0.01mg/100g 321mg/100g Cama巧ue 紅米 <0.1 mg/1 OOg 99mg/100g
[0101] 使用可信的DMDP(2,5-二徑基甲基-3,4-二徑基化咯燒）（每個樣品O.lmg)作為內 標，對fa邑Offline定量。
[0102] 使用如下所述的方法，通過GC-MS，f agomine (S甲基甲娃烷基衍生物）的保留時間 為7.5分鐘，DMDP為8.83分鐘。
[0103] GC-MS
[0104] 衍生化前，將所有樣品凍干。使用六甲基二娃氮燒和=甲基氯硅烷在化晚中的混 合物(Pierce '化i-Si 1'硅烷化試劑，HMDS: TMCS:化晚的比值為2:1:10)制備S甲基甲硅烷 基(TMS)衍生物。將樣品在60°C加熱15分鐘，然后在室溫下保持至少60分鐘。通過離屯、使不 溶的反應產物沉淀，并使用注射器將上清液轉移到新的小瓶中。
[010日]使用具有高極性烙融石英柱（Varian ' Factor Four ' VF-Sms柱，25m X 0.25mm i.d. ,0.25皿相厚度）的F*erkin Elmer Autosystem化氣相色譜儀，通過GC-MS進行分析。載 氣（氮)流速為Iml mirTi。使用起始于160°C，5分鐘，隨后Wl0°CmirTi的速度，線性提高至 300°C的溫度程序分離S甲基甲娃烷基-(TMS)衍生物。將溫度在300°C保持另外IOmin;總分 析時間為29分鐘。在帶有四極離子過濾系統的化rkin Elmer化rboMass Gold質譜儀進行 柱洗脫液的電子碰撞質譜，在分析期間W250°C持續運行。檢測器質量范圍設置為100至 650amu。傳輸線(GC至MS)的溫度保持在250°C。通過裝有去活化(deactivated)石英棉的烙 融石英窄孔注射襯墊，經由分流出口（分流比50:1)將樣品注入所述柱上;進樣口溫度保持 在200°C。進樣體積為化1。使用F*erkin Elmer TurboMasS軟件（TurboMassv.4.4)進行系統 控制、數據收集和質譜分析。
[0106]盡管在棟色印度香米中fagomine含量相當低，每100g為約Img，但是在運種稻米 中，含有亞胺糖的總氨基酸部分重量不是很高，估計1.9%為化gomine。運使得fagomine成 為低分子量口服可用含氮部分的顯著成分。通過對比，在氨基酸部分中，所研究的大部分稻 米樣品不含fagomine(或者W長粒糖米為例，低于0.03%的檢測限）。
[0107]表3:顯示陽離子交換樹脂保留部分(lOmg/ml)的平均糖巧酶抑制％ 牛肝臟P-葡糖醒酸酶測定大腸桿菌（E COli) P-葡糖酸酸酶
[010引 長粒以米 142 6.4 萊莉香米 27.1 41
[0109]購買的米粒的糖巧酶抑制測定
[0110] 0-葡糖醒酸酶和對硝基苯底物購自Sigma。在處于酶的最適pH值的0.1 M巧樣酸/ 0. 2M憐酸氨二鋼緩沖液中，在27°C測定酶。培育混合物包括10山酶溶液、10山1 Omg/ml的提 取物水溶液和50ii 1在處于酶的最適pH值的緩沖液中構成的適當的5mM對硝基苯底物。在反 應的指數期（