058] 圖1:為本發明制備得到的一組膠原基貽貝仿生黏附性水凝膠材料(柱狀形體)。
[0059] 圖2:為本發明制備得到的膠原基貽貝仿生黏附性水凝膠的一組彈性模量測定結 果。
[0060] 圖3:為本發明制備得到的膠原基貽貝仿生黏附性水凝膠的一組黏性模量測定結 果。
[0061] 圖4:為本發明制備得到的膠原基貽貝仿生黏附性水凝膠的一組損耗因子測定結 果。
【具體實施方式】
[0062] 下面通過實施例對本發明進行具體描述,有必要在此指出的是以下實施例只用于 對本發明作進一步說明,不能理解為對本發明保護范圍的限制,該領域的技術熟練人員根 據上述本發明的內容作出的一些非本質的改進和調整,仍屬于本發明保護的范疇。
[0063] 實施例1
[0064] 將新鮮草魚皮在20 ± 1°C下清洗干凈后搗碎,在料液比為1:25的0.01M的NaOH溶液 中處理24h,以除去非膠原成分。接著用10%的異丙醇攪拌4h脫除脂肪成分。接著在0.5M的 乙酸溶液中進行胃蛋白酶水解,胃蛋白酶用量為底物干基質量的〇 . 5 %,10000r/min離心 lOmin取上清液,先用NaOH調pH至中性,再用(NH4)2S〇4鹽析,再在0.1M/L的Na2HP〇4溶液中透 析,凍干,整個提取過程保持在4°C下進行,即得未變性的草魚皮膠原。
[0065]采用0.1M/L的乙酸溶解未變性的草魚皮膠原(5mg/mL),在0°C下調節膠原溶液pH值至7.0,隨后加入20mg/mL的多巴胺溶液,其中多巴胺用量為膠原質量的20%,充分攪拌均 勻,反應lh。
[0066]加入膠原干重10%的氧化海藻酸鈉反應4h后調節pH值至7.5,置于37°C烘箱中恒 溫4h,隨后充分水洗,在3800截留分子量的透析袋中透析24h后置于0.9%的生理鹽水包裝 袋中,最后在lOkGy強度下伽馬射線輻照滅菌即得到膠原基貽貝仿生黏附性水凝膠。
[0067] 實施例2
[0068]將新鮮鰱魚(例如花鰱,俗稱胖頭魚或白鰱)皮在20 ± 1 °C下清洗干凈后搗碎,在料 液比為1:25的0.01M的NaOH溶液中處理24h,以除去非膠原成分。接著用10 %的丙酮攪拌4h 脫除脂肪成分。接著在0.2M的檸檬酸溶液中進行胃蛋白酶水解,胃蛋白酶用量為底物干基 質量的1 ·〇%,10000r/min離心lOmin取上清液,先用NaOH調pH至中性,再用(NH4)2S〇4鹽析, 再在0.1M/L的Na2HP04溶液中透析,凍干,整個提取過程保持在4°C下進行,即得未變性的鰱 魚皮膠原。
[0069] 采用0.2M/L的乙酸溶解未變性的鰱魚皮膠原(10mg/mL),在4°C下調節膠原溶液pH值至6.0,隨后加入1Omg/mL的多巴胺溶液,其中多巴胺用量為膠原質量的10 %,充分攪拌均 勻,反應3h。
[0070]加入膠原干重8%的植物單寧后立即調節pH值至7.0,置于37°C烘箱中恒溫4h,隨 后充分水洗,在3800截留分子量的透析袋中透析24h后置于0.9%的生理鹽水包裝袋中,最 后在15kGy強度下伽馬射線輻照滅菌即得到膠原基貽貝仿生黏附性水凝膠。
[0071] 實施例3
[0072] 將新鮮鯽魚皮在20 ± 1°C下清洗干凈后搗碎,在料液比為1:25的0.01M的NaOH溶液 中處理24h,以除去非膠原成分。接著用10%的丙酮攪拌4h脫除脂肪成分。接著在0.2M的乙 酸溶液中進行胃蛋白酶水解,胃蛋白酶用量為底物干基質量的1.5 %,10000r/min離心 lOmin取上清液,先用NaOH調pH至中性,再用(NH4)2S〇4鹽析,再在0.1M/L的Na2HP〇4溶液中透 析,凍干,整個提取過程保持在4°C下進行,即得未變性的鯽魚皮膠原。
[0073] 采用0.5M/L的乙酸溶解未變性的鯽魚皮膠原(15mg/mL),在4°C下調節膠原溶液pH值至7.5,隨后加入15mg/mL的多巴胺溶液,其中多巴胺用量為膠原質量的15%,充分攪拌均 勻,反應3h。
[0074] 調節上述體系pH值至8.0,置于37°C烘箱中恒溫4h,期間緩慢加入膠原干重10%的 京尼平進行交聯,隨后充分水洗,在3800截留分子量的透析袋中透析24h后置于0.9%的生 理鹽水包裝袋中,最后在20kGy強度下伽馬射線輻照滅菌即得到膠原基貽貝仿生黏附性水 凝膠。
[0075] 實施例4
[0076] 將新鮮鳙魚皮在20 ± 1°C下清洗干凈后搗碎,在料液比為1:25的0.01M的NaOH溶液 中處理24h,以除去非膠原成分。接著用10%的異丙醇攪拌4h脫除脂肪成分。隨后在0.5M的 乙酸溶液中進行胃蛋白酶水解,胃蛋白酶用量為底物干基質量的2.0 %,lOOOOr/min離心lOmin取上清液,先用NaOH調pH至中性,再用(NH4)2S〇4鹽析,再在0.1M/L的Na2HP〇4溶液中透 析,凍干,整個提取過程保持在4°C下進行,即得未變性的鳙魚皮膠原。
[0077]采用0·2M/1的乙酸溶解未變性的鳙魚皮膠原(5mg/mL),在0°C下調節膠原溶液pH值至8.0,隨后加入10mg/mL的多巴胺溶液,其中多巴胺用量為膠原質量的20%,充分攪拌均 勻,反應4h。
[0078]將上述體系置于37°C烘箱中恒溫4h,期間緩慢加入膠原干重8%的氧化海藻酸鈉 進行交聯,隨后充分水洗,在3800截留分子量的透析袋中透析24h后置于0.9 %的生理鹽水 包裝袋中,最后在30kGy強度下伽馬射線輻照滅菌即得到膠原基貽貝仿生黏附性水凝膠。
[0079] 實施例5
[0080] 將新鮮青魚鱗清洗干凈,在料液比為1:20的0.05M的Na2C03溶液中處理12h,以疏松 魚鱗結構;并在〇.2M的HC1溶液中浸泡12h脫鈣,在0.05M的NaOH溶液中浸泡8h脫除脂肪成 分;接著在〇.2M的乙酸溶液中進行胃蛋白酶水解,胃蛋白酶用量為底物干基質量的1.5 %, 10000r/min離心lOmin取上清液,用NaOH調pH至中性,用(NH4)2S〇4鹽析,再在0.1M/L的 Na2HP04溶液中透析,凍干,整個提取過程保持在4°C下進行,即得未變性的青魚鱗膠原。
[0081 ] 采用0.5M/L的乙酸溶解未變性的青魚鱗膠原(10mg/mL),在4°C下調節膠原溶液pH 值至7.0,隨后加入15mg/mL的多巴胺溶液,其中多巴胺用量為膠原質量的10 %,充分攪拌均 勻,反應4h。
[0082] 將上述體系置于42°C烘箱中恒溫lh,隨后加入膠原干重5%的氧化海藻酸鈉反應 4h,充分水洗,在3800截留分子量的透析袋中透析24h后置于0.9%的生理鹽水包裝袋中,最 后在20kGy強度下伽馬射線輻照滅菌即得到膠原基貽貝仿生黏附性水凝膠。
[0083]實施例6
[0084] 將新鮮鯉魚鱗清洗干凈,在料液比為1:20的0.05M的Na2C03溶液中處理12h,以疏松 魚鱗結構;并在〇.2M的HC1溶液中浸泡12h脫鈣,在0.05M的NaOH溶液中浸泡8h脫除脂肪成 分;接著在0.1M的檸檬酸溶液中進行胃蛋白酶水解,胃蛋白酶用量為底物干基質量的 1.0%,10000r/min離心lOmin取上清液,用NaOH調pH至中性,用(NH4)2S〇4鹽析,再在0.1M/L 的Na2HP04溶液中透析,凍干,整個提取過程保持在0°C下進行,即得未變性的鯉魚鱗膠原。 [0085] 采用0.5M/L的乙酸溶解未變性的鯉魚鱗膠原(15mg/mL),在4°C下調節膠原溶液pH 值至7.0,隨后加入1Omg/mL的多巴胺溶液,其中多巴胺用量為膠原質量的10 %,充分攪拌均 勻,反