] (2)配制載體溶液：
[0140] 將5. 4000g卵清白蛋白和5. 4000g透明質酸-白蛋白共輛物溶于240. 0mL5.Owt% 葡萄糖水溶液中，得到載體溶液；
[0141] (3)配制藥物溶液：
[014引將1. 2000g萬古霉素和0. 0840gTPGS溶解于4. 0血氯仿和乙醇混合溶劑（15:1) 中，得到藥物溶液；
[0143] (4)制備納米制劑：
[0144] 高速均質條件下，將上述步驟（3)配制的藥物溶液加入到步驟似配制的載體溶 液中獲得初乳，再于高壓均質（壓力：35000psi，物料流量：18.化A)下循環19次獲得復 乳，然后在15. 0-25. 0°C，-0.IMPa的條件下減壓旋轉蒸發除去有機溶劑，0. 22μm濾器過 濾，濾液冷凍干燥得到萬古霉素祀向抗腫瘤納米制劑。
[0145] 實施例12阿霉素祀向抗腫瘤納米制劑的制備
[0146] (1)透明質酸-白蛋白共輛物的制備：
[0147] 將0. 3313g透明質酸（分子量60kDa)和0. 3671g牛血清白蛋白（摩爾數為透明 質酸的1倍）加入到33.OmL0. 01MMES中溶解，調節溶液抑為5. 4,然后將與透明質酸等 摩爾比的邸CI和Sulfo-N服加入到上述溶液中反應15min，調節溶液抑7. 3,在室溫下繼 續攬拌反應2地，反應完畢后，透析除去未鍵合的透明質酸、未反應的邸CI、Sul化-N服和其 它副產物，冷凍干燥后得透明質酸-白蛋白共輛物；
[014引 （2)配制載體溶液：
[0149] 將13. 9683g牛血清白蛋白和0. 6984g透明質酸-白蛋白共輛物溶于 300. 0mL5.Owt%甘露醇水溶液中，得到載體溶液；
[0150] 0)配制藥物溶液：
[015。 將2.OOOOg阿霉素和0. 2000gPVP溶解于5. 8血氯仿和乙醇混合溶劑巧：1)中， 得到藥物溶液；
[0152] (4)制備納米制劑：
[0153] 高速均質條件下，將上述步驟（3)配制的藥物溶液加入到步驟（2)配制的載體溶 液中獲得初乳，再于高壓均質（壓力：40000psi，物料流量：15.化A)下循環20次獲得復 乳，然后在15. 0-25. 0°C，-0.IMPa的條件下減壓旋轉蒸發除去有機溶劑，0. 45μm濾器過 濾，濾液冷凍干燥得到阿霉素祀向抗腫瘤納米制劑。
[0154] 對比例一紫杉醇祀向抗腫瘤納米制劑的制備
[0155] 根據專利CN201210142991實施例3實施：
[0156] (1)制備透明質酸-白蛋白共輛物
[0157] 先制備透明質酸活性脂：將400毫克的透明質酸（分子量5kDa)溶解在10.OmL 0. 1MMES緩沖液中，加入1. 2倍透明質酸摩爾數的邸CI，與1. 2倍透明質酸摩爾數的N-徑 基硫代班巧酷亞胺；在室溫下攬拌反應30分鐘即制得透明質酸班巧酷亞胺活性醋；將 500.Omg人血白蛋白凍干粉溶解在10.OmL無菌水中，加入上述透明質酸的班巧酷亞胺活性 醋溶液中；調整抑值至7. 0-7. 2,在室溫下攬拌反應60分鐘；反應完成后加入到分子量截 至為10000的透析袋內，透析除去未反應的試劑和反應副產物；將透析后透明質酸-白蛋白 溶液冷凍干燥，將凍干的透明質酸-白蛋白溶于抑為5. 5的憐酸鹽緩沖溶液（PBS緩沖液） 中，得到白蛋白/透明質酸溶液；
[015引 （2)制備紫杉醇溶液
[0159] 稱取50.Omg紫杉醇、50.OmgTPGS溶于1. 0血氯仿中，得紫杉醇溶液；
[0160] (3)制備紫杉醇/TPGS/透明質酸-白蛋白納米制劑
[0161] 在攬拌條件下將紫杉醇溶液加入到白蛋白/透明質酸溶液中，形成初乳；初 乳在高壓均質機巧000-400(K)psi)處理下得到納米乳劑，納米乳劑轉入旋轉蒸發儀在 30. 0-45.(TC減壓蒸發快速除去有機溶劑，無菌條件下冷凍干燥得到凍干粉末。
[0162] 對比例二紫杉醇祀向抗腫瘤納米制劑的制備
[0163] 根據專利CN201210142991實施例14實施：
[0164] (1)制備透明質酸-白蛋白共輛物
[016引先制備透明質酸活性脂：將400.Omg的透明質酸（分子量5kDa)溶解在10. 0血 0. 1MMES緩沖液中，加入1. 2倍透明質酸摩爾數的邸CI，與1. 2倍透明質酸摩爾數的N-徑 基硫代班巧酷亞胺；在室溫下攬拌反應30分鐘即制得透明質酸班巧酷亞胺活性醋；將 500.Omg人血白蛋白凍干粉溶解在10.OmL無菌水中，加入上述透明質酸的班巧酷亞胺活性 醋溶液中；調整抑值至7. 0-7. 2,在室溫下攬拌反應60分鐘；反應完成后加入到分子量截 至為10000的透析袋內，透析除去未反應的試劑和反應副產物；將透析后透明質酸-白蛋白 溶液冷凍干燥，將凍干的透明質酸-白蛋白溶于抑為5. 5的憐酸鹽緩沖溶液（PBS緩沖液） 中，得到白蛋白/透明質酸溶液；
[0166] (2)制備紫杉醇溶液
[0167] 稱取50.Omg紫杉醇、50.OmgTPGS溶于1. 0血氯仿和乙醇的混合物巧：1)中得紫 杉醇溶液；
[016引 （3)制備紫杉醇/TPGS/透明質酸-白蛋白納米制劑
[0169] 在攬拌條件下將紫杉醇溶液加入到白蛋白/透明質酸溶液中，形成初乳；初 乳在高壓均質機巧000-400(K)psi)處理下得到納米乳劑，納米乳劑轉入旋轉蒸發儀在 30. 0-45.(TC減壓蒸發快速除去有機溶劑，無菌條件下冷凍干燥得到凍干粉末。
[0170] 實施例13祀向納米制劑藥物含量的比較
[0171] 取實施例1-12W及對比例一-二所得納米制劑凍干物各10.Omg,分別加入4.OmL 無菌過濾后的生理鹽水復溶，搖勻后取其中2.OmLW0. 22μπι濾器過濾。往納米制劑溶液 中分別加入2. 0ml氯仿-乙醇溶液巧：1)，用縱滿振蕩器充分震蕩W萃取出制劑中的藥物， 用高壓液相色譜測定過濾前后液體中的藥物濃度，并對比各實施例W及對比例中復乳除去 有機溶劑后（即凍干前）的含藥率和藥物收率，其中，含藥率（％)=藥物濃度*體積/(藥 物和載體質量）*100%，藥物收率（％)=含藥率/理論含藥率*100%。結果如表1所示。
[0172] 表1納米制劑凍干前、凍干復溶后及復溶過濾后的含藥率和藥物收率
[0173]
[0174] 由表1的結果可知，本發明的祀向納米制劑在凍干復溶W及復溶經0. 22μm濾器 過濾后仍具有很高的含藥率和藥物收率；對比例一和對比例二的祀向納米制劑凍干前后的 藥物收率沒有很大的區別，但是經0. 22μm濾器過濾后藥物收率急劇降低，僅為過濾前的 39. 86 %和56. 99 %，說明了在過濾步驟有較多的載藥顆粒被濾膜截留，運部分顆粒粒徑應 當大于0. 22μm濾器濾膜的孔徑。而本發明的祀向納米制劑中，大于0. 22μm的顆粒在凍干 復溶后只有極少部分，也說明本發明的祀向納米制劑的顆粒分散性更好，更穩定，不團聚， 因此經過濾后仍有較高的藥物收率。
[0175] 實施例14祀向納米制劑粒徑的比較
[0176] 取實施例1-12W及對比例一-二所得納米制劑凍干物各10.Omg，分別加入4.OmL 無菌過濾后的生理鹽水復溶，搖勻后取其中2.OmLW0.22μπι濾器過濾。用美國布魯克海 文激光散射粒度分析儀狂etaPAL巧測定過濾前后納米制劑的粒徑，并對比各實施例中復 乳除去有機溶劑后（即凍干前）的粒徑。實施例3的祀向納米制劑顆粒過濾前的粒徑分布 圖如圖1所示，對比例一祀向納米制劑顆粒過濾前的粒徑分布圖如圖2所示，所有結果如表 2所示。
[0177]表2納米制劑凍干前、凍干復溶后及復溶過濾后的平均粒徑和粒徑范圍 [017 引
[0180] 由表2的結果可知，所有實施例的祀向納米制劑的顆粒粒徑在凍干前和凍干復溶 后并不相同，本發明的祀向納米制劑凍干復溶后的顆粒的粒徑增加幅度遠小于對比例的祀 向納米制劑；本發明的祀向納米制劑的顆粒復溶后的顆粒粒徑不大于250nm，而對比例的 祀向納米制劑的顆粒粒徑最大接近350nm;同時，由復溶前后的平均粒徑和粒徑范圍變化 可W發現，雖然所有實施例W及對比例的祀向納米制劑的顆粒的平均粒徑都小于220nm，但 是對比例的粒徑分布范圍更寬，存在較多粒徑大于220nm的顆粒，該結果與對比例的祀向 納米制劑復溶并W0. 22μm濾器過濾后的藥物收率較低的結果是一致的。
[0181] 實施例15祀向納米制劑穩定性的比較
[0182] (1)復溶穩定時間的比較
[018引取實施例1-12W及對比例一-二所得納米制劑凍干物各10.Omg，用4. 0血無菌過 濾后的生理鹽水復溶，于室溫下觀察混懸液狀態、有無沉淀及出現沉淀時間。結果如表3所 /J、-0
[0184] 似疏