一種穩定的前列地爾組合物的制作方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及藥物制劑領域，具體涉及前列地爾組合物。
【背景技術】
[0002] 前列地爾，是一種活性極強的生理活性物質，具有抑制血小板聚集、血栓素A2生 成、動脈粥樣脂質斑塊形成及免疫復合物的作用，并能擴張外周和冠脈血管的藥理作用，主 要用于治療慢性動脈閉塞癥（血栓閉塞性脈管炎、閉塞性動脈硬化癥等）引起的四肢潰瘍 及微小血管循環障礙引起的四肢靜息疼痛，改善心腦血管微循環障礙以及慢性肝炎的輔助 治療。
[0003]游離的前列地爾在臨床使用過程中存在較大的刺激性，如引起局部疼痛、腫脹 感、嚴重的出現發紅和沿靜脈走向出現紅線。因此，前列地爾注射液采用了脂微球（Lipid Microsphere)載藥技術以減少游離前列地爾的刺激性。脂微球是一種以脂肪油為軟基質 而被磷脂膜包封的微粒體分散體系，其處方由藥物，注射用油，精致蛋黃卵磷脂，油酸，甘油 和pH調節劑組成，其制備方法是將藥物溶于注射用油中，以卵磷脂為乳化劑，油酸為輔助 乳化劑，經高壓均質制成0/W型載藥脂肪乳，乳粒平均粒徑200nm，脂微球也稱脂肪乳（Fat/ LipidEmulsion) 〇
[0004] 處方中精致蛋黃卵磷脂中磷脂酰膽堿的含量在96%以上，常用的是PC-98T，純度 高達98%，純的磷脂酰膽堿的乳化效果較差，需要和輔助乳化劑聯合應用，常用的輔助乳化 劑為如油酸，油酸鈉。
[0005] 油酸是一種表面活性劑，廣泛應用于殺蟲劑、化妝品。油酸用于化妝品對皮膚低 毒、微刺激，具有一定程度的眼睛刺激，純油酸對于人體有明顯的眼部刺激和腐蝕。油酸對 人體的毒性主要表現在細胞毒性和蛋白酶抑制，本身沒有致癌性，但對患有前列腺癌、結腸 癌及直腸癌的患者，飲食中攝入對疾病有促進作用。
【發明內容】
[0006] 為克服油酸自身的安全性隱患，本發明采用磷脂酰肌醇來做輔助乳化劑，提供一 種新的前列地爾注射液及其制備方法。
[0007]本發明的技術方案如下：
[0008] -種前列地爾組合物，包含前列地爾，注射用油，磷脂酰膽堿，磷脂酰肌醇，不含磷 脂酰乙醇胺，其重量配比如下，前列地爾的重量為1份，注射用油的重量為5000~30000 份，磷脂酰膽堿的重量為1200-4000份，磷脂酰肌醇的重量為12-48份。優選前列地爾的重 量份為1份，注射用油的重量份為10000~20000份，磷脂酰膽堿的重量為2400-3600份， 磷脂酰肌醇的重量為24-36份。
[0009]所述的前列地爾組合物為注射液，含有前列地爾，注射用油，磷脂酰膽堿，磷脂酰 肌醇，注射用水，其中重量配比如下：前列地爾的重量為1份，注射用油的重量為5000~ 30000份，磷脂酰膽堿的重量為1200-4000份，磷脂酰肌醇的重量為12-48份，注射用水重 量為100000~400000份。優選前列地爾的重量份為1份，注射用油的重量份為10000~ 20000份，磷脂酰膽堿的重量為2400-3600份，磷脂酰肌醇的重量為24-36份，注射用水重量 為100000~200000份。所述注射液還包括等滲調節劑，等滲調節劑優選甘油。所述注射 液還包括pH調節劑，pH調節劑為氫氧化鈉或鹽酸。
[0010] 所述的前列地爾組合物為凍干制劑，含有前列地爾，注射用油，磷脂酰膽堿，磷 脂酰肌醇，凍干保護劑，其中重量配比如下：前列地爾的重量為1份，注射用油的重量為 5000~30000份，磷脂酰膽堿的重量為1200-4000份，磷脂酰肌醇的重量為12-48份，凍干 保護劑重量為20000~40000份。所述的凍干保護劑選自蔗糖、乳糖、海藻糖或其組合。 [0011] 所述的磷脂酰膽堿選自蛋黃中提取的磷脂酰膽堿，合成的磷脂酰膽堿或其組合。
[0012] 其中蛋黃中提取的磷脂酰膽堿的純度在96%以上，不含磷脂酰乙醇胺（PE)。不含 磷脂酰乙醇胺判斷方式如下：將磷脂以10% (w/v)溶解于氯仿-甲醇混合溶液中，采用硅 膠薄層板進行分析，點樣10μL，展開劑為氯仿：甲醇：水=65 : 25 : 4,干燥后噴茚三酮試 劑，120°C加熱十分鐘，在同樣上樣的磷脂酰乙醇胺標準液檢測到斑點相對應的位置未見顯 色，即判定為磷脂不含磷脂酰乙醇胺。
[0013]所述的合成的磷脂酰膽堿選自二硬脂酰基磷脂酰膽堿（DSPC)，二油酰基磷脂酰 膽堿（D0PC)，二棕櫚酰基磷脂酰膽堿（DPPC)，二肉豆蘧酰基磷脂酰膽堿（DMPC)，二癸酰基 磷脂酰膽堿DDPC，二月桂酰基磷脂酰膽堿（DLPC)，二芥酰基磷脂酰膽堿（DEPC)，1-硬脂酰 基-2-油酰基磷脂酰膽堿（S0PC)，1-棕櫚酰基-2-油酰基磷脂酰膽堿（P0PC)，1-肉豆蘧 酰基-2-油酰基磷脂酰膽堿（M0PC)，1-硬脂酰基-2-棕櫚酰基磷脂酰膽堿（SPPC)，1-硬 脂酰基-2-肉豆蘧酰基磷脂酰膽堿（SMPC)，1-棕櫚酰基-2-硬脂酰基磷脂酰膽堿（PSPC)， 1-棕櫚酰基-2-肉豆蘧酰基磷脂酰膽堿（PMPC)，1-肉豆蘧酰基-2-硬脂酰基磷脂酰膽堿 (MSPC)，1-肉豆蘧酰基-2-棕櫚酰基磷脂酰膽堿（MPPC)或其組合。
[0014] 所述的磷脂酰肌醇（PI)選自蛋黃中提取的蛋黃磷脂酰肌醇（EPI)，合成的磷脂 酰肌醇或其組合，其中合成的磷脂酰肌醇選自二硬脂酰基磷脂酰肌醇（DSPI)，二油酰基磷 脂酰肌醇（D0PI)，二棕櫚酰基磷脂酰肌醇（DPPI)，二肉豆蘧酰基磷脂酰肌醇（DMPI)，1-棕 櫚酰基-2-油酰基磷脂酰肌醇（Ρ0ΡΙ)，二芥酰磷脂酰肌醇（DEPI)，二月桂酰磷脂酰肌醇 (DLPI)或其組合。
[0015] 所述的注射用油選自精制大豆油、花生油、紅花油、棉籽油、橄欖油、椰子油、麻油、 魚油、中鏈甘油單酯、中鏈甘油雙酯、中鏈甘油三酯、油酸乙酯、乙酰化單甘油酯、丙二醇雙 酯、亞油酸甘油酯、聚乙二醇月桂酸甘油酯或其組合，優選為橄欖油，更優選為橄欖油和中 鏈甘油三酯，兩者重量比為1 : 1。
[0016] 當組合物為注射液時，其制備方法包括以下步驟：
[0017] (1)水相的制備：將甘油加入水中，攪拌使其溶解，作為水相；
[0018] ⑵油相的制備：注射用油中加入磷脂酰膽堿，磷脂酰肌醇和前列地爾，攪拌使其 溶解，作為油相；
[0019] (3)初乳的制備：將步驟（2)油相加入步驟（1)水相中，高速剪切分散，形成初乳；
[0020] (4)高壓勻化：將步驟⑶初乳高壓勻化，得精乳；
[0021] (5)灌裝：將步驟（4)精乳經0.22μm微孔濾膜過濾除菌，無菌灌封；
[0022] (6)濕熱滅菌（F。> 8)
[0023] (7)步驟⑴至（5)均在氮氣保護下操作。
[0024] 步驟（3)所述的高速剪切分散時間為10~60分鐘，剪切速度為3000~lOOOOrpm， 溫度55~70°C;步驟（4)所述的高壓勻化壓力為600~2000bar，勻化次數3~6次。步 驟（6)所述的滅菌溫度為126 土1°C，F。值大于等于8。
[0025] 脂肪乳中磷脂酰乙醇胺的檢測方法：在lmL脂肪乳中加入乙醇lmL、二乙醚0. 5mL 以及石油醚〇.5mL，進行攪拌。采集將其離心分離而得到的上層，利用氮餾去溶劑。使所得 的油相成分為20% (w/v)地溶解于氯仿-甲醇混合溶液，所得的溶液20yL點樣于硅膠薄 層板，展開劑為氯仿：甲醇：水=65 : 25 : 4,干燥后噴茚三酮試劑，120°C加熱十分鐘，在 同樣上樣的磷脂酰乙醇胺標準液檢測到斑點相對應的位置未見顯色，即判定為脂肪乳劑不 含磷脂酰乙醇胺。
[0026] 磷脂酰肌醇，是由CDP甘油酯與磷酸甘油生物合成為磷酸磷脂酰肌醇，再通過脫 磷酸而形成為磷脂酰肌醇。天然的磷脂酰肌醇是二酰基-L-3-磷酸甘油-D-3-甘油。其是 細胞的組成成分，與油酸相比具有更高的安全性。
[0027] 本發明意外的發現，所制備的前列地爾注射液的穩定性優于含有油酸的產品的穩 定性。即使含有油酸的產品加了維生素E做穩定劑，其穩定效果也不如本發明的組合物。 具體實施例
[0028] 對比實施例1
[0029]處方：
[0030]
[0031]工藝：
[0032] (1)水相的制備：將處方量甘油加入水中溶解，加熱至60°C，備用；
[0033] (2)油相的制備：將處方量精制大豆油加熱至60 °C，加入處方量磷脂酰膽堿 (PC-98T，上海艾韋特，不含PE)，油酸和前列地爾，攪拌使其溶解；
[0034] (3)初乳的制備：將步驟（2)油相加入步驟（1)水相中，溫度60°C，高速剪切分散， 剪切速度l〇〇〇〇rpm，時間15分鐘，形成初乳；
[0035] (4)精乳的制備：將步驟（3)初乳用0·1MNaOH調pH54~5. 6,經微射流儀高壓勻 化3次，壓力1000~1200bar ;
[0036] (5)灌裝：將步驟（4)精乳經0· 45 μ m微孔濾膜過濾，無菌灌封；
[0037] (6) 126 土 1°C濕熱滅菌（F。> 8);
[0038] (7)步驟⑴至（5)均在氮氣保護下操作。
[0039] 對比實施例2
[0040]處方：
[0041]
[0042]工藝：
[0043] (1)水相的制備：將處方量甘油加入水中溶解，加熱至60°C，備用；
[0044] (2)油相的制備：將處方量精制大豆油加熱至60 °C，加入處方量磷脂酰膽堿 (PC-98T，上海艾韋特，不含PE)，油酸和前列地爾，攪拌使其溶解；
[0045] (3)初乳的制備：將步驟（2)油相加入步驟（1)水相中，溫度60°C，高速剪切分散， 剪切速度l〇〇〇〇rpm，時間15分鐘，形成初乳；
[0046] (4)精乳的制備：將步驟（3)初乳用0·1MNaOH調ρΗ5· 4~5. 6,經微射流儀高壓 勻化3次，壓力1000~1200bar ;
[0047] (5)灌裝：將步驟（4)精乳經0· 45μm微孔濾膜過濾，無菌灌封；
[0048] (6) 126 土 1°C濕熱滅菌（F。> 8);
[0049] (7)步驟（1)至（5)均在氮氣保護下操作。
[0050] 實施例1
[0051]處方：
[0052]
[0053]工藝：
[0054] (1)水相的制備：將處方量甘油加入水中溶解，加熱至60°C，備用；
[0055] (2)油相的制備：將處方量精制大豆油加熱至60 °C，加入處方量磷脂酰膽堿 (PC-98T，上海艾韋特，不含PE)，蛋黃磷脂酰肌醇（EPI)和前列地爾，攪拌使其溶解；
[0056] (3)初乳的制備：將步驟（2)油相加入步驟（1)水相中，溫度60°C，高速剪切分散， 剪切速度l〇〇〇〇rpm，時間15分鐘，形成初乳；
[0057] (4)精乳的制備：將步驟（3)初乳用0·1MNaOH調ρΗ5· 4~5. 6,經微射流儀高壓 勻化3次，壓力1000~1200bar ;
[0058] (5)灌裝：將步驟（4)精乳經0· 45μm微孔濾膜過濾，無菌灌封；
[0059]⑶I26 土 1°C濕熱滅菌（F。> 8);
[0060] (7)步驟⑴至（5)均在氮氣保護下操作。
[0061] 測試實施例1乳粒
[0062] 檢查方法：動態激光散射粒徑測定法