，總有效率為96. 5 %。
[0078] 備注：其中有39例病人因記錄地址不清未隨訪，因此未做統計。
[0079] 結果證明：復方散劑試用臨床觀察，對中晚期癌癥患者，具有明顯的抑制作用，能 抗癌、瘤體縮小。或消滅或使癌細胞溶化，從水中消滅或從血液中消滅。能延長生命，無毒 副作用，用藥方便，安全可靠。
[0080] 檢測側耳（Pleurotus sp.)的 DNA :
[0081] (l)DNA 提取
[0082] 用 FastDNA SPIN 土壤 DNA 提取試劑盒（MP Biomedicals, Santa Ana, CA)提取真 菌 DNA。
[0083] (2) PCR 擴增
[0084] PCR擴增引物：
[0085] ITS1 :5' CTTG GTCA TTTA GAGG AAGTAA3，
[0086] ITS4:5, TCCT CCGC TTAT TGAT ATGC3'
[0087] PCR擴增程序
[0088]
[0089] 三、測序
[0090] 將PCR產物委托上海生物工程有限公司測序
[0091 ] 基因序列結果：
[0092] CTCTCCGGGGGGAACCTTGGGGAGGGTCCTTTAATGATTCCCTTAGGGAGTGGTGGTGGCCTTTAGGGG CCAGGTCCCGGTTCCATAGTTTTTTCACCCCCCGTGGACTTTTGAAAGGTTTGGGGAATTGTTTTTCCAATTGTTCA GATTGGTTTGCTGGGATTTAAACGTCTCGGTGTGACTACGCAGTCTATTTACTTACCCCCCCCCAAAGGAAGTTTTC GAAAGTCCATTAAAGGGCCCTGGGCCTTTTAACCCTTAATCCAACTTTCACCAAGGATTTTTTGGCTTTTGCCATGA AGGAAGAAGCAAGGAAAATGGGTAAAGAAAGGGAAATGCCGAAATCCAGGGATCCTTGGATTCTTGGACCCCCCCTG CCCCCCCTGGTATTTCGGGGGGCCAGCCCGGTTGGGGGGCCATTAATTTTTCAAATCCCTTTGGTTTTTTTCCAATT GTGATGTTTGGATTGTTGGGGGCTGCTGGCCTTGACAGGTCGGCTCCTCTTAAATGCATTAGCAGGACTTCTCATTG CCTCTGCGCATGATGTGATAATTATCACTCATCAATAGCACGCATGAATAGAGTCCAGCTCTCTAATCGTCCGCAAG GACAATTTGACAATTGACCTCAAATCAGGTAGACAGCCGGATTCT
[0093] 四、比對結果
[0094] 經 NCBI(National Center of Biotechnology Information[www. ncbi. nlm. nih. gov])數據庫比對，結果如下：
[0095] Pleurotus ostreatus isolate NW426 18S ribosomal RNA gene (登錄號： EU622251. 1)
[0096] Pleurotus ostreatus 即，側耳。
【主權項】
1. 一種抗腫瘤中藥微生物發酵制劑，其特征在于：將發酵提取物側耳在中藥原料中發 酵所得，所述中藥原料按重量計：仙鶴草15-60g、紅花15-50g、牡丹皮25-60g、三七15-45g、 半枝蓮20_60g、蘆根20_50g、黃岑30_60g、槐花30_60g、龍膽草25_55g、黃柏30_60g、青 蒿20-50g、天花粉30-60g、射干20-50g、地骨皮30-60g、牛蒡子30-60g、益母草30-60g、茜 草25_55g、虎杖25_55g、地龍20_50g、大率30_60g、柏子仁25_55g、山茱萸30_60g、五味 子30-60g、補骨脂30-60g、枳實30-60g、川楝子20-50g、檳榔20-50g、合歡花30-60g、川貝 母30-60g、石菖蒲30-60g、瓜蔞皮30-60g、茯苳30-60g、豬苳30-60g、廣藿香30-60g、白鞏 20-50g、菟絲子30-60g、雞血膝25-55g、蜈蚣20-50g、升麻30-60g ;其中，發酵提取物側耳與 中藥原料混合物的重量份數比為1:5-10 ; 所述側耳為Pleurotussp.，已于2014年4月14日保藏在"中國微生物菌種保藏管理 委員會普通微生物中心"，保藏編號為CGMCCNo. 9060。2. 按權利要求1所述的抗腫瘤中藥微生物發酵制劑，其特征在于：所述中藥原料按重 量計：仙鶴草30g、紅花20g、牡丹皮30g、三七15g、半枝蓮30g、蘆根20g、黃岑30g、槐花30g、 龍膽草25g、黃柏30g、青蒿20g、天花粉30g、射干20g、地骨皮30g、牛蒡子30g、益母草30g、 茜草25g、虎杖25g、地龍20g、大率30g、柏子仁25g、山茱萸30g、五味子30g、補骨脂30g、枳 實30g、川楝子20g、檳榔20g、合歡花30g、川貝母30g、石菖蒲30g、瓜蔞皮30g、茯苓30g、豬 苓30g、廣藿香30g、白鞏20g、菟絲子30g、雞血膝25g、蜈蚣20g、升麻30g。3. -種權利要求1所述的抗腫瘤中藥微生物發酵制劑的制備方法，其特征在于： ⑴按重量計，將仙鶴草15_60g、紅花15-50g、牡丹皮25-60g、三七15-45g、半枝蓮20-60g、蘆根20-50g、黃岑30-60g、槐花30-60g、龍膽草25-55g、黃柏30-60g、青蒿20-50g、 天花粉30_60g、射干20_50g、地骨皮30_60g、牛蒡子30_60g、益母草30_60g、茜草25_55g、 虎杖25-55g、地龍20-50g、大棗30-60g、柏子仁25-55g、山茱萸30-60g、五味子30-60g、補 骨脂30-60g、枳實30-60g、川楝子20-50g、檳榔20-50g、合歡花30-60g、川貝母30-60g、石 菖蒲30-60g、瓜蔞皮30-60g、茯苓30-60g、豬苓30-60g、廣藿香30-60g、白鞏20-50g、菟絲 子30-60g、雞血膝25-55g、蜈蚣20-50g、升麻30-60g的中藥原料混合，待用； (2)將發酵提取物側耳接種到上述混合中藥原料中發酵，所得發酵物即為發酵微生物 中藥制劑； 所述側耳（Pleurotussp.)，已于2014年4月14日保藏在"中國微生物菌種保藏管理 委員會普通微生物中心"，保藏編號為CGMCCNo. 9060,保藏單位地址為北京市朝陽區北辰 西路1號院3號。4. 按權利要求3所述的抗腫瘤中藥微生物發酵制劑的制備方法，其特征在于：所述 步驟（2)將發酵提取物側耳與中藥原料混合物的重量份數比為1:5-10的量混合，并在 35-65°C下發酵1-7天。5.按權利要求3或4所述的抗腫瘤中藥微生物發酵制劑的制備方法，其特征在于：所 述發酵提取物側耳是將其接于PDA固體培養基中，在28-35°C、培養70-120小時，得發酵提 取物側耳。6. 按權利要求3所述的抗腫瘤中藥微生物發酵制劑的制備方法，其特征在于：所述發 酵微生物中藥制劑可制成散劑、片劑、丸劑、膠丸、膠囊劑、乳劑、糖漿或口服液。7. -種權利要求1所述的抗腫瘤中藥微生物發酵制劑的應用，其特征在于：發酵制劑
【專利摘要】本發明涉及發酵微生物中藥制劑領域，具體來說是一種抗腫瘤中藥微生物發酵制劑及其制備方法與應用。發酵制劑將發酵提取物側耳在中藥原料中發酵所得，發酵提取物側耳與中藥原料混合物的重量份數比為1:5-10；所述側耳為Pleurotus？sp，已于2014年4月14日保藏在“中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心”，保藏編號為CGMCC？No.9060。本發明制劑具有殺滅腫瘤細胞的功效和扶正固本、綜合調理的作用。而且，由于所使用的原料藥都是傳統的中藥，其用量均在藥典和國家標準范圍之內，無毒無副作用，安全可靠。CGMCC No.906020140414
【IPC分類】A61K35/648, A61P35/00, A61K33/06, A61K36/899, A61K35/62
【公開號】CN105288278
【申請號】CN201510737696
【發明人】李業明, 李興堯
【申請人】李業明
【公開日】2016年2月3日
【申請日】2015年11月3日