黃刺果實多糖抗腫瘤用圖
【技術領域】
[0001] 本發明屬于保健品領域，具體涉及黃刺果實多糖的醫藥新用途。 技術背景
[0002] 黃刺，小檗科植物直穗小檗BerberisdasystachyaMaxim?，是與白刺、沙棘（黑 刺）一樣為蒙、藏、維吾爾等少數民族藥用與食用的傳統野生漿果，統稱為"青海三刺"。目 前，對于白刺和黑刺，研究和應用十分透徹，而對于黃刺，其成分研究和功能作用應用仍較 為空白。
[0003]《青海常用中草藥手冊》中對黃刺皮（即根皮）有詳細記載：黃刺皮即為雙子葉植 物藥小檗科植物直穗小檗的莖皮。其果實醫藥功能也做了簡要的記述，其具有治療腹痛，消 化不良，腹脹，痢疾等功能。
[0004]目前還未見對黃刺果實多糖抗腫瘤的研究報道。
【發明內容】
[0005] 本發明的目的在于提供黃刺果實多糖的新用途。
[0006]具體地，本發明提供了黃刺果實多糖在制備抗腫瘤的食品、藥品或保健品中的用 途。
[0007]其中，所述腫瘤為良性或惡性腫瘤。
[0008] 進一步地，所述腫瘤為胃癌、肝癌或乳腺癌。
[0009]更進一步地，所述腫瘤為肝癌。
[0010]其中，所述黃刺果實多糖，為小檗科植物直穗小檗BerberisdasystachyaMaxim.果實的提取物，提取物中多糖為主要成分。
[0011]本發明【具體實施方式】中測定表明，提取物中多糖含量為93±2%w/w，該多糖純度 較高，用此純度下的多糖進行生物活性實驗，其結果能夠真實的反映出黃刺果實多糖的生 物活性，有效地避免了其他成分對多糖活性測定的干擾。在已知多糖生物活性的基礎上， 即便是降低多糖在提取物中的含量，只要適當調節提取物用量，使得多糖達到相應的起效 濃度，同樣能夠發揮出相同或相似的生物活性。因此，本發明限定，提取物中多糖含量應為 60 ~95%w/w〇
[0012] 進一步地，提取物中多糖含量為80~95%w/w，更進一步為90~95%w/w。
[0013]其中，所述黃刺果實多糖是以黃刺果實為原料，由水提醇沉法制備得到。
[0014] 進一步地，醇沉步驟中，乙醇終濃度（即含醇量）達到60~85%v/v即可，更進一 步為70~80%v/v，優選為75±2%v/v。
[0015] 進一步地，所述水提醇沉法具體操作如下：將黃刺果實脫脂、去單糖后，加水提取， 水提液脫色、除蛋白、透析除小分子后，加入乙醇（使乙醇終濃度達到60~85%v/v)，靜 置，待沉淀完全，取沉淀，干燥，即得到黃刺果實多糖。
[0016] 進一步地，透析除去的小分子分子量在3500Da以下。
[0017] 更進一步地，脫脂具體操作如下：將黃刺果實粉碎后，過篩，采用石油醚或乙醚為 提取溶劑，提取后的殘渣過濾，揮干溶劑，得已脫脂黃刺果實殘渣。
[0018] 更進一步地，去單糖的具體操作如下：所得已脫脂黃刺果實殘渣，以乙醇（70~ 85%v/v)提取，提取后的殘渣揮干溶劑，即得已除單糖黃刺果實殘渣；優選的乙醇濃度為 80%v/v〇
[0019] 更進一步地，透析除小分子后加入乙醇至含醇量（即乙醇終濃度）至70~80% v/v，優選為 75±2%v/v。
[0020] 經過上述純化步驟，可以有效提高黃刺果實多糖的純度。當然，若是僅僅需要制備 純度較低的黃刺果實多糖，亦可以省略除醇沉外的其他純化步驟中的一項或多項。
[0021] 另外，對于多糖的脫色處理，常常采用離子交換法（如DEAE-纖維素）、氧化法（如 H202)、吸附法（如活性炭）等，在實際使用過程中可以根據自身需求，結合后期多糖的收率 和純度來選定適合的脫色方法，本發明一個【具體實施方式】中選用H2O2脫色，但這并不限于 本發明僅僅只能使用此種脫色方式。
[0022] 對于除蛋白而言，常用方法有三氯乙酸法、鹽酸法、Sevage法（亦有記載為Sevag 法）等，在實際使用過程中可以根據自身需求，結合后期多糖的收率和純度來選定適合的 除蛋白方法，本發明一個【具體實施方式】中選用Sevage法，但這并不限于本發明僅僅只能使 用此種除蛋白方式。
[0023] 經體外抗腫瘤實驗證明，黃刺果實多糖對處于對數生長期的五種細胞人胃癌細胞 BGC-823、乳腺癌細胞MCF-7和MDA-MB-231、肝癌細胞H印G2和SMMC-7721均有較好的抗腫 瘤活性，尤其對肝癌細胞的抑制活性極為顯著，可將黃刺果實多糖應用于抗腫瘤的食品、保 健品或藥物。
【具體實施方式】
[0024]實施例1:黃刺果實多糖的制備
[0025] 1)黃刺果實脫脂：取成熟的黃刺（即直穗小檗）的果實400g烘干，粉碎后過篩； 取黃刺果實與石油醚混合，混合后超聲提取，離心除去提取液，殘渣過濾，揮干石油醚，得已 除脂黃刺果實殘渣；
[0026] 2)黃刺果實除單糖：已除脂黃刺果實殘渣與乙醇混合，所述乙醇濃度為70~85% v/V，回流提取，離心除去提取液，殘渣過濾后揮干乙醇，得已除單糖黃刺果實殘渣；
[0027] 3)黃刺粗多糖提取：將步驟2)所得已除單糖黃刺果實殘渣與純水混合，微波輔助 提取，離心得到提取液，殘渣過濾后棄去；提取液濃縮得到粗多糖提取液；
[0028] 4)黃刺粗多糖的純化：粗多糖提取液中依次采用H2O2,進行脫色、Savege法除去蛋 白質，再透析除去3500Da以下小分子物質，得到純化的多糖水提液；
[0029] 5)黃刺果實多糖的制備：將步驟4)所得的已純化的多糖水提液濃縮液加入乙醇 溶液，使乙醇終濃度達到75%v/v，所得沉淀干燥后，即得到黃刺果實多糖BDP共計2. 0 6g。
[0030] 實施例2:黃刺果實多糖的制備
[0031] 1)黃刺果實脫脂：取成熟的黃刺（即直穗小檗）的果實400g烘干，粉碎后過篩； 取黃刺果實與石油醚混合，回流提取，離心除去提取液，殘渣過濾，揮干石油醚，得已除脂黃 刺果實殘渣；
[0032] 2)黃刺果實除單糖：已除脂黃刺果實殘渣與乙醇混合，所述乙醇濃度為70~85% v/V，超聲提取，離心除去提取液，殘渣過濾后揮干乙醇，得已除單糖黃刺果實殘渣；
[0033] 3)黃刺粗多糖提取：將步驟2)所得已除單糖黃刺果實殘渣與純水混合，溫浸提 取，離心得到提取液，殘渣過濾后棄去；提取液濃縮得到粗多糖提取液；
[0034] 4)黃刺粗多糖的純化：粗多糖提取液中依次采用H2O2,進行脫色、Savege法除去蛋 白質，再透析除去3500Da以下小分子物質，得到純化的多糖水提液；5)黃刺果實多糖的制 備：將步驟4)所得的已