1.由包含共價結合至來自腸致病性細菌的不同血清學特異性的最少三個碳水化合物結構的輔助T-依賴性載體解毒的蛋白的基本單元組成的抗原性多價分子構建體,所述輔助T-依賴性載體解毒的蛋白選自來自艱難梭菌的腸類毒素A和細胞類毒素B,所述碳水化合物結構選自細菌多糖或解毒的脂多糖,其中每個碳水化合物結構包含至少一個由最少5至12個單糖殘基組成的重復基本表位,其中至少1摩爾的載體蛋白結合至少1摩爾的所述至少三個碳水化合物結構的每一個或其摩爾總和。
2.權利要求1所述的抗原性多價分子構建體,其中所述腸類毒素A或細胞類毒素B源自通過優選通過福爾馬林處理的化學方法或通過DNA重組技術解毒的艱難梭菌的天然同源毒素。
3.前述權利要求1-2中任一項所述的抗原性多價分子構建體,其中攜帶的所述不同血清學特異性的碳水化合物結構選自傷寒沙門氏菌、霍亂弧菌、大腸桿菌和艱難梭菌或其組合的莢膜多糖。
4.前述權利要求1-3中任一項所述的抗原性多價分子構建體,其中所述解毒的脂多糖是類內毒素。
5.權利要求1或4所述的抗原性多價分子構建體,其中攜帶的所述不同血清學特異性的碳水化合物結構選自腸致病性細菌的解毒的脂多糖/類內毒素,所述腸致病性細菌選自傷寒沙門氏菌、大腸桿菌、霍亂弧菌、腸炎沙門氏菌、弗氏志賀氏菌、甲型副傷寒沙門氏菌、痢疾沙門氏菌、宋氏志賀氏菌和豬霍亂沙門氏菌或其組合。
6.權利要求1-5中任一項所述的抗原性多價分子構建體,其選自:
-共價結合至傷寒沙門氏菌、霍亂弧菌和大腸桿菌的莢膜多糖的腸類毒素A;
-共價結合至傷寒沙門氏菌、霍亂弧菌和大腸桿菌的莢膜多糖的細胞類毒素B;
-共價結合至腸炎沙門氏菌、甲型副傷寒沙門氏菌和痢疾沙門氏菌的解毒的脂多糖/類內毒素的腸類毒素A;
-共價結合至腸炎沙門氏菌、甲型副傷寒沙門氏菌和痢疾沙門氏菌的解毒的脂多糖/類內毒素的細胞類毒素B。
7.前述權利要求中任一項所述的抗原性多價分子構建體,其用于疫苗,用于保護受試者免受因選自下述的至少一種腸致病性細菌引起的感染:艱難梭菌、傷寒沙門氏菌、大腸桿菌、霍亂弧菌、腸炎沙門氏菌、弗氏志賀氏菌、宋氏志賀氏菌、甲型副傷寒沙門氏菌、痢疾沙門氏菌、豬霍亂沙門氏菌或其組合。
8.一種疫苗制劑,其包含在生理學上可接受的媒介物中的至少一種如權利要求1-6中任一項所定義的抗原性多價分子構建體,任選地與藥學上可接受的佐劑或賦形劑一起。
9.權利要求8所述的疫苗制劑,其中每種載體抗原和/或攜帶的抗原的劑量范圍為0.1至100μg,優選為1至10μg。
10.權利要求8-9中任一項所述的疫苗制劑,其中所述佐劑選自:選自磷酸鋁、氫氧化鋁的礦物佐劑;選自基于角鯊烯的佐劑如MF59、QF21、Addavax的有機佐劑;和選自單磷酰基脂質A和海藻糖二糖霉菌酸的生物佐劑。
11.權利要求8-10中任一項所述的疫苗制劑,其中所述佐劑的量為0.1-1mg/劑量,優選0.5mg/劑量。
12.權利要求8-11中任一項所述的疫苗制劑,所述制劑適于通過皮下、肌內、皮內或經皮途徑施用。
13.前述權利要求8-12中任一項所述的廣譜多價疫苗制劑,其用于醫學人類或獸醫領域,用于保護受試者免受由于選自下述的至少一種腸致病性細菌引起的全身性和腸道感染:艱難梭菌、傷寒沙門氏菌、大腸桿菌、霍亂弧菌、腸炎沙門氏菌、弗氏志賀氏菌、宋氏志賀氏菌、甲型副傷寒沙門氏菌、痢疾沙門氏菌、豬霍亂沙門氏菌、克雷伯氏菌、腸桿菌、銅綠假單胞菌或其組合。
14.權利要求13所述的用于醫學人類或獸醫領域的廣譜多價疫苗制劑,其中所述受試者屬于人類群體。
15.權利要求14所述的用于醫學領域的廣譜多價疫苗制劑,其用于預防和/或治療因人諾如病毒引起的病毒性胃腸道感染。
16.一種用于制備權利要求1-6中任一項所述的抗原性多價分子構建體的綴合方法,其包括以下步驟:
a)將至少三個抗原性不同的碳水化合物結構通過經由氧化的O-脫氫解偶聯和形成與烷基二胺間隔基的亞胺還原鍵的還原胺化化學活化至單官能性或多官能性,然后衍生化為活性酯,所述碳水化合物結構選自:
-傷寒沙門氏菌、霍亂弧菌、大腸桿菌和艱難梭菌的莢膜多糖或
-來自傷寒沙門氏菌、大腸桿菌、霍亂弧菌、腸炎沙門氏菌、弗氏志賀氏菌、宋氏志賀氏菌、甲型副傷寒沙門氏菌、痢疾沙門氏菌和豬霍亂沙門氏菌、克雷伯氏菌、腸桿菌、銅綠假單胞菌的脂多糖;
b)通過形成酰胺鍵將至少三個酯衍生的碳水化合物結構與來自艱難梭菌的多官能性載體蛋白腸類毒素A或細胞類毒素B的氨基同時偶聯;
其中至少一摩爾的蛋白質載體與所述抗原性不同的碳水化合物結構中的每一個或其摩爾總數的至少一摩爾反應。
17.權利要求16所述的綴合方法,其中所述碳水化合物結構在其相應的二胺丁酸衍生物中被化學活化,并且活性酯是琥珀酰亞胺酯。
18.一種用于制備權利要求1-6中任一項所述的抗原性多價分子構建體的綴合方法,其包括將來自艱難梭菌的多官能性載體蛋白腸類毒素A或細胞類毒素B的氨基與至少三個抗原性不同的碳水化合物結構經由形成亞胺還原鍵的還原胺化同時偶聯,所述碳水化合物結構選自:
-傷寒沙門氏菌、霍亂弧菌、大腸桿菌和艱難梭菌的莢膜多糖,或
-來自傷寒沙門氏菌、大腸桿菌、霍亂弧菌、腸炎沙門氏菌、弗氏志賀氏菌、宋氏志賀氏菌、甲型副傷寒沙門氏菌、痢疾沙門氏菌和豬霍亂沙門氏菌、克雷伯氏菌、腸桿菌、銅綠假單胞菌的脂多糖;
這樣的碳水化合物結構在具有或不具有分子間隔基的情況下通過經由氧化在鄰位羥基中的O-脫氫解偶聯被在先活化至單官能性或多官能性。
19.權利要求16-18中任一項所述的綴合方法,進一步包括將所述脂多糖解毒的附加步驟,所述解毒可選擇地通過a)在進行偶聯反應之前或之后切割掉脂質A部分、或b)在進行偶聯反應之前或之后通過使用合成的抗內毒素肽(SAEP)的特定策略來飽和脂質A結合位點來進行;
其中至少一摩爾的蛋白質載體與所述抗原性不同的碳水化合物結構中的每一個或其摩爾總數的至少一摩爾反應。
20.權利要求16-19中任一項所述的綴合方法,其中步驟a)的碳水化合物結構包含至少一個由如通過分子質量測定和NMR波譜法測定的最少5至12個單糖殘基組成的重復基本表位,所述重復基本表位通過與類型特異性或群特異性多克隆或單克隆抗體的反應性通過測定它們在抑制其同源多糖-抗體參照系統中的各自MIC50值而抗原性地評估。
21.可通過權利要求16-20中任一項所述的綴合方法獲得的抗原性多價分子構建體。