技術領域：
：本發明涉及用6-取代的雌二醇化合物和它們的藥學上可接受的鹽或前藥治療阿爾茨海默氏病(AD)的方法。所述化合物提供脂蛋白脂酶(LPL)和/或載脂蛋白C2(ApoC2)(活化LPL的蛋白)的上調。
背景技術：
：：阿爾茨海默氏病(AD)是一種主要影響老年人的進行性神經變性障礙。存在兩種形式的AD：早發型和遲發型。早發型AD是罕見的，敏感性個體在早至第三個十年遇到，且經常與一小組基因中的突變相關。遲發型或自發的AD是常見的，在第七個或第八個十年中遇到，并且是具有許多遺傳風險因素的多因素疾病。遲發型AD是65歲以上的人的癡呆的主要原因。據估計，7-10％的65歲以上的美國人和多達40％的大于80歲的美國人罹患AD。在該病的早期，患者經歷記憶和方向的喪失。隨著疾病進展，另外的認知功能變得受損，直到患者完全殘疾。已經廣泛接受的是，淀粉樣蛋白-β(Aβ)肽在腦細胞外空間中的積累和Aβ分子組成的改變對于AD中發展突觸缺陷和認知缺陷而言是關鍵性的。Aβ通過兩種天冬氨酰基蛋白酶，即β-分泌酶和γ-分泌酶對淀粉樣蛋白前體蛋白(APP)的連續有限蛋白酶解而產生。γ-分泌酶的蛋白酶解是最后一個加工步驟，其導致Aβ的釋放。通常，γ-分泌酶切割產生40個氨基酸長度(Aβ40)和42個氨基酸長度(Aβ42)的Aβ蛋白，后者是老年斑中的主要物質(Iwatsubo,T.,等人,1994Neuron13,45-53)。Aβ水平取決于它的產生和降解/清除之間的平衡，并且提示減弱的Aβ分解代謝會造成老化腦中的Aβ積累(Tanzi,R.E.,等人,2004Neuron43,605-608)。以前的研究已經證實，星形膠質細胞和小膠質細胞直接攝入和降解Aβ42(Wyss-Coray,T.,等人,2003Nat.Med.9,453-457；Jiang,Q.,等人.2008Neuron58,681-693)，并且Aβ降解發生在胞內體-溶酶體隔室中(Majumdar,A.,等人,2007Mol.Biol.Cell18,1490-1496；Mandrekar,S.,2009J.Neurosci.29,4252-4262)。脂蛋白脂酶(LPL)催化甘油三酯的水解，并通過充當血管中脂蛋白和硫酸化的糖胺聚糖(GAG)或脂蛋白受體之間的“橋連分子”而介導脂蛋白的細胞攝取(Williams,K.J.,等人,1992J.Biol.Chem.267,13284-13292；Mulder,M.,等人,1993J.Biol.Chem.268,9369-9375)。硫酸化的GAG是通常在細胞外基質中和在周圍組織(例如脂肪、心臟和骨骼肌組織和腦)的細胞表面上發現的蛋白聚糖的側鏈。迄今為止，LPL在腦中的作用是未知的。令人感興趣的是，已經證實，LPL積累在AD腦的老年斑中(Rebeck,G.W.,等人,1995Ann.Neurol.37,211-217)。此外，在LPL基因的編碼區中的單核苷酸多態性(SNP)與臨床上診斷的AD受試者中的發病率、LPLmRNA表達水平、腦膽固醇水平和AD病理學(包括神經原纖維纏結和老年斑密度)的嚴重程度有關(Blain,J.F.,等人,2006Eur.J.Neurosci.24,1245-1251)。這些結果提示，LPL可能在腦中具有生理學作用，其更替與AD的發病機制有關。近年來，研究人員進行了實驗以確定LPL是否與Aβ相互作用以促進星形膠質細胞中的Aβ細胞攝取和降解，并發現了證據：LPL與Aβ形成復合物，并通過依賴于硫酸類肝素和硫酸軟骨素GAG鏈的機制促進小鼠原代星形膠質細胞中的Aβ細胞表面結合和攝取，從而導致Aβ的溶酶體降解(Nishitsuji,K.,等人,2011J.Biol.Chem.286(8),6393-6401)。另外，發現增強的細胞周期蛋白依賴性的激酶5(CDK5)活性會促成LPL上調和促進小膠質細胞中的Aβ吞噬作用，而CDK5的抑制會減少LPL表達和Aβ內化。因而，AD的可行治療是LPL(和/或ApoC2或載脂蛋白C2，即活化LPL的蛋白)的上調。為此目的，已經證實化合物諸如他汀類藥物會刺激LPL活性，且因此可能在AD的發病機制中起作用(Schoonjans,K.,等人,1999FEBSLett452,160-164；Mead,J.,等人,2002J.Mol.Med.80,753-769)。這是對AD的當前治療的重大改善。目前在市場上的治療AD的僅有藥物(Aricept.RTM.、Cognex.RTM.、Reminyl.RTM.和Exelon.RTM.)是乙酰膽堿酯酶抑制劑。這些藥物沒有解決AD的根本病理學。它們僅僅增強仍然能夠起作用的那些神經細胞的有效性，并且僅提供所述疾病的癥狀緩解。由于所述疾病持續，這些治療的益處是微小的。因此，本文中公開了某些6-取代的雌二醇衍生物，其提供LPL(和/或ApoC2)的上調。發現這是驚人的，因為以前已經報道雌激素本身顯著地減少遺傳上操縱的3T3-L1脂肪細胞(其穩定地表達雌激素受體(ER))中脂肪積累和LPLmRNA以及甘油三酯積累的量(Homma,H.,等人,2000J.Biol.Chem.275(15),11404-11411。如下面呈現的，本發明的公開內容證實了一個不同的且驚人的用于治療AD的方案，由此解決了在現有技術中呈現的缺陷。
技術領域：
：考慮到前述內容，本發明的一個目的是提供一種治療具有阿爾茨海默氏病的患者的方法，所述方法包括給有此需要的患者施用治療有效量的6-取代的雌二醇衍生物。本發明的6-取代的雌二醇衍生物會提供脂蛋白脂酶(LPL)和/或載脂蛋白C2(ApoC2)的上調。本領域技術人員將理解，本發明的一個或多個方面可以滿足某些目的，而一個或多個其它方面可以滿足某些其它目的。每個目的可能不會在所有它的方面同樣適用于本發明的每個方面。這樣，關于本發明的任一個方面可以交替地看到下述目的。因此，在本發明的一個方面，在本文公開的方法中使用的6-取代的雌二醇衍生物是式I的化合物和所述化合物的各個對映異構體、其它立體化學異構體、水合物、溶劑化物、互變異構體和藥學上可接受的鹽：其中“a”環選自：R1、R2、R3和R4獨立地是氫、C1-C6烷基、鹵代(halo)、硫酸酯(sulfate)、葡萄糖醛酸苷基(glucuronide)、-OH、巨大基團(bulkygroup)、芳基、環烷基、雜芳基、雜環烷基、-N(CH2)n；磷酸酯基團(phosphategroup)和次膦酸酯基(phosphinategroup)；R11選自H、C1-C6烷基、鹵素、硫酸酯、葡萄糖醛酸苷基、-SO2NH2、-COOH、-CN、-CH2CN-、-NHCN-、-CHO、＝CHOCH3、-COO鹽、-OSO2烷基、-NH2和-NHCO(CH2)n；X選自C1-C12烷基、C2-C12烯基、C2-C12炔基、鹵素、葡萄糖醛酸苷基、-NH2、-SO2NH2、-COOH、-CN、-CH2CN、-NHCN、-CHO、-COO鹽、-OSO2烷基、-SH、-SCH3、-CH[(CH2)nCH3]COOCH3、-(CH2)mCOOCH3、-(CH2)m-O-CH3、-(CH2)m-O-(CH2)nCH3、(CH2)m-S-CH3、-(CH2)m-S-(CH2)nCH3、-(CH2)m-NH-(CH2)nCH3、-C2-C8烯基-O-(CH2)nCH3、-C2-C8烯基-S-(CH2)nCH3、-C2-C8烯基-N-(CH2)nCH3、-C2-C8炔基-O-(CH2)nCH3、-C2-C8炔基-S-(CH2)nCH3、-C2-C8炔基-N-(CH2)nCH3、-(CH2)m-OH、-(CH2)m-NH2、-(CH2)m-O-NH2、-(CH2)m-S-NH2、-NH(CH2)mCH3、-NH(CH2)mOCH3、-NH(CH2)mCHOH-COOH、-N(CH3)2、-(CH2)m(NH)CH2OH、-NHCOOH、-(CH2)mNHCOOH、-NO2、-SCN、-SO2烷基、-B(OH)2、-(CH2)mN(CH3)-SO2-NH3、-(CH2)m-NH-SO2-NH2、-NHC(＝S)CH3和-NHNH2；Y選自氫、＝O、-OCO(C1-C20烷基)和-OH；且Z是H或甲基；其中m是0-20之間的整數，n是0-8之間的整數，符號代表能夠在位置3和/或17形成酮基的單鍵或雙鍵；且符號代表任何類型的鍵而不考慮立體化學。在本發明的另一個方面，所述方法具體地提供了結合雌激素受體-α(ER-α)和雌激素受體-β(ER-β)中之一或二者的化合物。這樣的方法可以包括開始、增強或增加在LPL和/或ApoC2的表達的關鍵信號傳遞途徑中涉及的RNA編碼基因的基因轉錄。本發明的其它目的、特征、益處和優點從本概述和如下描述的某些實施方案中顯而易見，并且對具有多種類固醇化合物和有關治療方法的知識的本領域技術人員而言容易明白。這樣的目的、特征、益處和優點從上面并結合附隨實施例、數據、附圖或考慮到本文并入的參考文獻顯而易見。發明詳述除非另外定義，否則本文所用的所有技術術語和科學術語具有本發明所屬
技術領域：
：普通技術人員通常所理解的相同的含義并且應理解為具有下述含義。將本文涉及的所有公開文獻和專利完整地引入本文作為參考。除非另有限定，否則涉及的具體化合物包括所有這類化合物的異構體形式，包括其外消旋和其它混合物。除非另有限定，否則涉及的具體化合物還包括例如本文所述的其離子、鹽、溶劑化物(例如水合物)、被保護形式、前藥和其它立體異構體。制備、純化和/或處理活性化合物的相應鹽(例如藥學上可接受的鹽)是方便或合乎需要的。藥學上可接受的鹽的例子描述在Berge等人，1977，“PharmaceuticallyAcceptableSalts，”J.Pharm.Sci.,第66卷,第1-19頁中并且在本文中討論。本文在治療病癥的上下文中所用的術語“治療”或“療法”一般涉及哺乳動物受試者的治療或療法，無論是人還是非人的動物(例如在獸醫應用中)，其中實現某些所需的治療作用，例如抑制病癥發展，并且包括減緩進展速率，使進展速率停止，改善病癥和/或治愈病癥。還包括作為預防性措施的治療。治療包括組合治療和療法，其中合并有兩種或更多種治療或療法，其例如相繼或同時進行。治療和療法的實例包括但不限于化學療法(施用活性劑，包括，例如藥物、抗體(例如作為在免疫療法中)、抗炎藥、前藥(例如使用保護基，包括在適合位置諸如3或17位上的磷酸衍生物和次膦酸酯，其它用于光動力療法、GDEPT、ADEPT等的化合物)、外科手術、輻射療法和基因治療。本文所用的術語“立體化學異構體”意指彼此僅在原子空間定向方面不同的異構體。在本發明中具有特別重要性的兩種立體異構體為對映異構體和非對映異構體，取決于兩種異構體彼此是否為鏡像。在優選的實施方案中，要求保護的制劑包含分離的、拆分的這樣的化合物且“基本上不含其它異構體”。本文所用的術語“治療有效量”意指，有效地產生某些期望的治療效果、與合理的收益/風險比相稱的、活性化合物或材料、包含活性化合物的組合物或劑型的量。術語“有效量”通常意指可以實現可檢測的效果的量。術語“患者”或“受試者”意指動物，包括哺乳動物，優選人類。術語“組織”一般意指可以執行特定功能的專用細胞。術語“組織”可以意指單個細胞或多個細胞或細胞聚集物，例如膜、血液或器官。術語“組織”還包括涉及的異常細胞或多個異常細胞。示例性的組織包括乳腺組織(包括乳腺細胞)、膜組織(包括內皮和上皮)、層、結締組織(包括間質組織、腦組織和腫瘤)。本發明中“烷基”意指具有1-20個，且優選1-12個碳原子的直鏈或支鏈烷基殘基。實例包括但不限于甲基、乙基、丙基、異丙基、正-丁基、仲-丁基、叔-丁基、戊基、2-戊基、異戊基、新戊基、己基、2-己基、3-己基，以及3-甲基戊基。各烷基可以任選地被1個、2個或3個諸如鹵代、環烷基、芳基、烯基或烷氧基等的取代基取代。“芳基”意指具有單環(例如苯基)、多個環(例如聯苯)或其中至少一個環是芳族的多個稠合環(例如1,2,3,4-四氫萘基)的芳族碳環殘基。芳基還可以任選地被例如鹵代、烷基、烯基、環烷基或烷氧基等單-、雙-或三取代。“雜芳基”意指含有選自氮、氧或硫的至少一個和至多4個雜原子的5-、6-或7-元環的一個或多個稠合芳環系統。實例包括但不限于呋喃基、噻吩基、吡啶基、嘧啶基、苯并咪唑基和苯并唑基。雜芳基還可以任選地被例如鹵代、烷基、烯基、環烷基或烷氧基等單-、雙-或三取代。“環烷基”意指具有單環(例如環己基)、多個環(例如雙環己基)或多個稠合環(例如)的碳環殘基。環烷基可以任選地含有1-4個雜原子。此外，環烷基可以具有一個或多個雙鍵。環烷基還可以任選地被例如鹵代、烷基、烯基、芳基或烷氧基等單-、雙-或三取代。“烷氧基”意指具有烷基部分的含氧基的殘基。實例包括，但是不限于，甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基和叔-丁氧基。烷氧基還可以任選地被例如鹵代、芳基、環烷基或烷氧基等單-、雙-或三取代。“烯基”意指具有2-20個且優選2-6個碳原子，以及1-3個雙鍵的直鏈或支鏈烴殘基，包括例如，乙烯基、丙烯基、1-丁-3-烯基、1-戊-3-烯基、1-己-5-烯基。烯基還可以任選地被例如鹵代、芳基、環烷基或烷氧基等單-、雙-或三取代。“鹵代”或“鹵素”是氟、氯、溴或碘的鹵素殘基。“葡萄糖醛酸苷基”意指葡糖醛酸的苷殘基。術語“硫酸酯基”意指具有通式-OS(O)2-OR'的殘基，其中R'為氫、金屬或烷基。術語“磷酸酯”意指具有通式-OP(O)(OR')2的殘基，其中每個R'獨立地是氫、金屬或烷基。術語“次膦酸酯”意指具有通式-OP(O)(R')2的殘基，其中每個R'獨立地是氫、金屬或烷基。“巨大基團”意指在其連接空間周圍產生位阻的取代基，例如叔-丁基。如本文使用的術語“氨基烷基”意指在它上面具有氨基的烷基，例如H2N-CH2-、H2N-CH2CH2-、Me2NCH2-等，其中連接點是烷基鏈的碳；如本文使用的術語“烷基氨基”意指具有連接于氮原子的烷基的氨基，例如CH3NH-、EtNH-、iPr-NH-等，其中連接點是通過氨基的氮原子。其中采用連續殘基的所有其它術語都將遵循類似規則。在本發明的一個實施方案中，描述了一種治療或預防患者中的阿爾茨海默氏病的方法，所述方法包括給有此需要的患者施用治療有效量的式I的6-取代的雌二醇衍生物。優選地，所述方法提供了哺乳動物中LPL和/或ApoC2功能活性的上調，所述方法包括給所述哺乳動物施用有效量的式I的化合物。式I的化合物也可以治療涉及淀粉樣蛋白斑塊的積累的其它障礙，且包括、但不限于：例如，路易體癡呆、包涵體肌炎和腦淀粉樣蛋白血管病。在本發明的一個實施方案中，所述方法的化合物具有下面式(Ia)所示的一般結構：其中R2、R3、R4、X和Y如上面關于式(I)所定義。甚至更優選地，Y選自＝O和-OH；R4選自氫、鹵代和C1-C6烷基；R2選自氫、-OH和鹵代；R3選自氫、鹵代和-OH；且X選自C1-C12烷基、C2-C12烯基、-(CH2)mCOOCH3、-(CH2)m-O-CH3、-(CH2)m-O-(CH2)nCH3、(CH2)m-S-CH3、-(CH2)m-S-(CH2)nCH3、-(CH2)m-N-(CH2)nCH3、-C2-C8烯基-O-(CH2)nCH3、-C2-C8烯基-S-(CH2)nCH3、-C2-C8烯基-N-(CH2)nCH3、-C2-C8炔基-O-(CH2)nCH3、-C2-C8炔基-S-(CH2)nCH3、-C2-C8炔基-N-(CH2)nCH3、-(CH2)m-OH、-(CH2)m-O-NH2、-(CH2)m-S-NH2、-NH(CH2)mCH3、-NH(CH2)mOCH3、-NH(CH2)mCHOH-COOH、-(CH2)m(NH)CH2OH、-(CH2)mNHCOOH、-(CH2)mN(CH3)-SO2-NH3和-(CH2)m-NH-SO2-NH2；m是1-20的整數；n是0-8的整數；且符號代表單鍵或雙鍵。甚至更優選地，Y是(S)-OH；R4選自氫或烷基；R2是氫；R3是氫；且X選自C1-C12烷基、C2-C12烯基、-(CH2)m-O-CH3、-(CH2)m-O-(CH2)nCH3、(CH2)m-S-CH3和-(CH2)m-S-(CH2)nCH3；m是1-12的整數；n是0-4的整數；且C-13甲基處于(S)構型。本發明的另一個實施方案涉及使用式(Ib)的化合物的方法：其中R1R2、R3、R4和X如上面關于式(I)所定義。甚至更優選地，R1選自氫、-OH和鹵代；R4選自氫、鹵代和C1-C6烷基；R2選自氫和鹵代；R3選自氫、鹵代和-OH；且X選自C1-C12烷基、C2-C12烯基、-(CH2)mCOOCH3、-(CH2)m-O-CH3、-(CH2)m-O-(CH2)nCH3、(CH2)m-S-CH3、-(CH2)m-S-(CH2)nCH3、-(CH2)m-N-(CH2)nCH3、-C2-C8烯基-O-(CH2)nCH3、-C2-C8烯基-S-(CH2)nCH3、-C2-C8烯基-N-(CH2)nCH3、-C2-C8炔基-O-(CH2)nCH3、-C2-C8炔基-S-(CH2)nCH3、-C2-C8炔基-N-(CH2)nCH3、-(CH2)m-OH、-(CH2)m-O-NH2、-(CH2)m-S-NH2、-NH(CH2)mCH3、NH(CH2)mOCH3、-NH(CH2)mCHOH-COOH、-(CH2)m(NH)CH2OH、-(CH2)mNHCOOH、-(CH2)mN(CH3)-SO2-NH3和-(CH2)m-NH-SO2-NH2；m是1-20的整數；且n是0-8的整數。甚至更優選地，R1是氫；R4選自氫或烷基；R2是氫；R3是氫；且X選自C1-C12烷基、C2-C12烯基、-(CH2)m-O-CH3、-(CH2)m-O-(CH2)nCH3、(CH2)m-S-CH3和-(CH2)m-S-(CH2)nCH3；m是1-12的整數；n是0-4的整數；且C-13甲基和C-17羥基都處于(S)構型。本發明的另一個實施方案涉及使用式(Ic)的化合物的方法：其中R11、R2、R3、R4和X如上面關于式(I)所定義。甚至更優選地，R11是氫或C1-C6烷基；R4選自氫、鹵代和C1-C6烷基；R2選自氫和鹵代；R3選自氫、鹵代和-OH；且X選自C1-C12烷基、C2-C12烯基、-(CH2)mCOOCH3、-(CH2)m-O-CH3、-(CH2)m-O-(CH2)nCH3、(CH2)m-S-CH3、-(CH2)m-S-(CH2)nCH3、-(CH2)m-N-(CH2)nCH3、-C2-C8烯基-O-(CH2)nCH3、-C2-C8烯基-S-(CH2)nCH3、-C2-C8烯基-N-(CH2)nCH3、-C2-C8炔基-O-(CH2)nCH3、-C2-C8炔基-S-(CH2)nCH3、-C2-C8炔基-N-(CH2)nCH3、-(CH2)m-OH、-(CH2)m-O-NH2、-(CH2)m-S-NH2、-NH(CH2)mCH3、NH(CH2)mOCH3、-NH(CH2)mCHOH-COOH、-(CH2)m(NH)CH2OH、-(CH2)mNHCOOH、-(CH2)mN(CH3)-SO2-NH3和-(CH2)m-NH-SO2-NH2；m是1-20的整數；且n是0-8的整數。甚至更優選地，R11是氫；R4選自氫或烷基；R2是氫；R3是氫；且X選自C1-C12烷基、C2-C12烯基、-(CH2)m-O-CH3、-(CH2)m-O-(CH2)nCH3、(CH2)m-S-CH3和-(CH2)m-S-(CH2)nCH3；m是1-12的整數；n是0-4的整數；且C-13甲基和C-17羥基都處于(S)構型。本發明的另一個實施方案涉及使用式(Id)的化合物的方法：其中R1、R2和X如上面關于式(I)所定義。甚至更優選地，R1選自氫、-OH和鹵代；R2選自氫和鹵代；且X選自C1-C12烷基、C2-C12烯基、-(CH2)mCOOCH3、-(CH2)m-O-CH3、-(CH2)m-O-(CH2)nCH3、(CH2)m-S-CH3、-(CH2)m-S-(CH2)nCH3、-(CH2)m-N-(CH2)nCH3、-C2-C8烯基-O-(CH2)nCH3、-C2-C8烯基-S-(CH2)nCH3、-C2-C8烯基-N-(CH2)nCH3、-C2-C8炔基-O-(CH2)nCH3、-C2-C8炔基-S-(CH2)nCH3、-C2-C8炔基-N-(CH2)nCH3、-(CH2)m-OH、-(CH2)m-O-NH2、-(CH2)m-S-NH2、-NH(CH2)mCH3、NH(CH2)mOCH3、-NH(CH2)mCHOH-COOH、-(CH2)m(NH)CH2OH、-(CH2)mNHCOOH、-(CH2)mN(CH3)-SO2-NH3和-(CH2)m-NH-SO2-NH2；X選自C1-C12烷基、C2-C12烯基、-(CH2)m-O-CH3、-(CH2)m-O-(CH2)nCH3、(CH2)m-S-CH3和-(CH2)m-S-(CH2)nCH3；m是1-20的整數；且n是0-8的整數。甚至更優選地，R1和R2是氫；m是1-12的整數；n是0-4的整數；且C-13甲基和C-17羥基都處于(S)構型。本發明的另一個實施方案涉及使用式(Ie)的化合物的方法：其中m、n、R1、R2、R3和R4如上面關于式(I)所定義，且Z選自-O-、-S-和-NH-。甚至更優選地，m是1-12，n是0-4，R1選自氫、-OH和鹵代；R4選自氫、鹵代和C1-C6烷基；R2選自氫和鹵代；R3選自氫、鹵代和-OH；Z選自-O-和-S-；且C-13甲基和C-17羥基都處于(S)構型。本發明的另一個實施方案涉及使用式(If)的化合物的方法：其中R1、R2、R3、R4和X如上面關于式(I)所定義。甚至更優選地，R1選自氫、-OH和鹵代；R4選自氫、鹵代和C1-C6烷基；R2選自氫和鹵代；R3選自氫、鹵代和-OH；且X選自C1-C12烷基、C2-C12烯基、-(CH2)mCOOCH3、-(CH2)m-O-CH3、-(CH2)m-O-(CH2)nCH3、(CH2)m-S-CH3、-(CH2)m-S-(CH2)nCH3、-(CH2)m-N-(CH2)nCH3、-C2-C8烯基-O-(CH2)nCH3、-C2-C8烯基-S-(CH2)nCH3、-C2-C8烯基-N-(CH2)nCH3、-C2-C8炔基-O-(CH2)nCH3、-C2-C8炔基-S-(CH2)nCH3、-C2-C8炔基-N-(CH2)nCH3、-(CH2)m-OH、-(CH2)m-O-NH2、-(CH2)m-S-NH2、-NH(CH2)mCH3、NH(CH2)mOCH3、-NH(CH2)mCHOH-COOH、-(CH2)m(NH)CH2OH、-(CH2)mNHCOOH、-(CH2)mN(CH3)-SO2-NH3和-(CH2)m-NH-SO2-NH2；X選自C1-C12烷基、C2-C12烯基、-(CH2)m-O-CH3、-(CH2)m-O-(CH2)nCH3、(CH2)m-S-CH3和-(CH2)m-S-(CH2)nCH3；m是1-20的整數；且n是0-8的整數。甚至更優選地，R1、R2、R3和R4是氫；m是1-12的整數；且n是0-4的整數。本發明的另一個實施方案涉及使用式(Ig)的化合物的方法：其中R1、R2、R3、R4、R11和X如上面關于式(I)所定義。甚至更優選地，R1選自氫、-OH和鹵代；R4選自氫、鹵代和C1-C6烷基；R2選自氫和鹵代；R3選自氫、鹵代和-OH；且X選自C1-C12烷基、C2-C12烯基、-(CH2)mCOOCH3、-(CH2)m-O-CH3、-(CH2)m-O-(CH2)nCH3、(CH2)m-S-CH3、-(CH2)m-S-(CH2)nCH3、-(CH2)m-N-(CH2)nCH3、-C2-C8烯基-O-(CH2)nCH3、-C2-C8烯基-S-(CH2)nCH3、-C2-C8烯基-N-(CH2)nCH3、-C2-C8炔基-O-(CH2)nCH3、-C2-C8炔基-S-(CH2)nCH3、-C2-C8炔基-N-(CH2)nCH3、-(CH2)m-OH、-(CH2)m-O-NH2、-(CH2)m-S-NH2、-NH(CH2)mCH3、NH(CH2)mOCH3、-NH(CH2)mCHOH-COOH、-(CH2)m(NH)CH2OH、-(CH2)mNHCOOH、-(CH2)mN(CH3)-SO2-NH3和-(CH2)m-NH-SO2-NH2；X選自C1-C12烷基、C2-C12烯基、-(CH2)m-O-CH3、-(CH2)m-O-(CH2)nCH3、(CH2)m-S-CH3和-(CH2)m-S-(CH2)nCH3；m是1-20的整數；OR11是＝O或-OH；且n是0-8的整數。甚至更優選地，R1、R2、R3和R4是氫；m是1-12的整數；且n是0-4的整數。式(I)和(Ia)-(If)的化合物的具體例子顯示在下面：本發明的實施方案化合物可以用于藥物組合物。此類組合物可以含有一種或多種選自上文討論過的化合物，下列所示的化合物或在本文中以其它方式推知的化合物，及其組合。在某些實施方案中，此類組合物可以含有藥學上可接受的載體組分。非限制性地，此類組合物可以含有化合物的外消旋混合物。在某些實施方案中，此類化合物可以以S和R對映異構體的形式存在，優選它的基本上不含其它異構體的分離和純化形式。本發明的化合物可以具有不對稱中心，可以以外消旋體、外消旋混合物或以單個的和純化的非對映異構體或對映異構體的形式出現，諸如(通過ChemDrawUltra,11.0(3)或12.0版命名)(6S,8R,9S,13S,14S)-3-羥基-6-(甲氧基甲基)-13-甲基-7,8,9,11,12,13,15,16-八氫-6H-環戊二烯并[a]菲-17(14H)-酮(化合物1)；(6R,8R,9S,13S,14S)-3-羥基-6-(甲氧基甲基)-13-甲基-7,8,9,11,12,13,15,16-八氫-6H-環戊二烯并[a]菲-17(14H)-酮(化合物2)；(6S,8R,9S,13S,14S)-6-(甲氧基甲基)-13-甲基-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6H-環戊二烯并[a]菲-3,17-二醇(化合物3)；(6R,8R,9S,13S,14S)-6-(甲氧基甲基)-13-甲基-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6H-環戊二烯并[a]菲-3,17-二醇(化合物4)；(6S,8R,9S,10R,13S,14S)-17-羥基-6-(甲氧基甲基)-10,13-二甲基-6,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17-十二氫-3H-環戊二烯并[a]菲-3-酮(化合物5)；(6R,8R,9S,10R,13S,14S)-17-羥基-6-(甲氧基甲基)-10,13-二甲基-6,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17-十二氫-3H-環戊二烯并[a]菲-3-酮(化合物6)；(6S,8R,9S,13S,14S)-6-(羥甲基)-13-甲基-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6H-環戊二烯并[a]菲-3,17-二醇(化合物7)；(6R,8R,9S,13S,14S)-6-(羥甲基)-13-甲基-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6H-環戊二烯并[a]菲-3,17-二醇(化合物8)；(6R,8R,9S,10R,13S,14S)-6-(甲氧基甲基)-10,13-二甲基十六氫-1H-環戊二烯并[a]菲-3,17-二醇(化合物9)；(6R,8R,9S,13S,14S)-6-((氨基氧基)甲基)-13-甲基-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6H-環戊二烯并[a]菲-3,17-二醇(化合物10)；(6S,8R,9S,13S,14S)-6-((氨基氧基)甲基)-13-甲基-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6H-環戊二烯并[a]菲-3,17-二醇(化合物11)；(6R,8R,9S,13S,14S)-6-((氨基氧基)甲基)-17-羥基-13-甲基-6,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17-十二氫-3H-環戊二烯并[a]菲-3-酮(化合物12)；(6S,8R,9S,13S,14S)-6-((氨基氧基)甲基)-17-羥基-13-甲基-6,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17-十二氫-3H-環戊二烯并[a]菲-3-酮(化合物13)；(6R,8R,9S,13S,14S)-6-(((甲氧基甲基)氨基)甲基)-13-甲基-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6H-環戊二烯并[a]菲-3,17-二醇(化合物14)；(6S,8R,9S,13S,14S)-6-(((甲氧基甲基)氨基)甲基)-13-甲基-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6H-環戊二烯并[a]菲-3,17-二醇(化合物15)；1-((((6R,8R,9S,13S,14S)-3,17-二羥基-13-甲基-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6H-環戊二烯并[a]菲-6-基)甲基)氨基)丙烷-2-酮(化合物16)；1-((((6S,8R,9S,13S,14S)-3,17-二羥基-13-甲基-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6H-環戊二烯并[a]菲-6-基)甲基)氨基)丙烷-2-酮(化合物17)；(6R,8R,9S,13S,14S)-6-甲氧基-13-甲基-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6H-環戊二烯并[a]菲-3,17-二醇(化合物18)；(6S,8R,9S,13S,14S)-6-(2-甲氧基乙基)-13-甲基-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6H-環戊二烯并[a]菲-3,17-二醇(化合物19)；(6R,8R,9S,13S,14S)-6-(4-甲氧基丁基)-13-甲基-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6H-環戊二烯并[a]菲-3,17-二醇(化合物20)；(6R,8R,9S,13S,14S)-6-(6-甲氧基己基)-13-甲基-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6H-環戊二烯并[a]菲-3,17-二醇(化合物21)；(6R,8R,9S,13S,14S)-6-(6-甲氧基辛基)-13-甲基-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6H-環戊二烯并[a]菲-3,17-二醇(化合物22)；(6R,8R,9S,13S,14S)-3-羥基-6-(甲氧基甲基)-13-甲基-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6H-環戊二烯并[a]菲-17-基硬脂酸酯/鹽(stearate)(化合物23)；(6R,8R,9S,10R,13S,14S)-6-(甲氧基甲基)-10,13-二甲基-7,8,9,10,11,12,13,14,15,16-十氫-3H-環戊二烯并[a]菲-3,17(6H)-二酮(化合物24)；(6S,8R,9S,10R,13S,14S)-6-(甲氧基甲基)-10,13-二甲基-7,8,9,10,11,12,13,14,15,16-十氫-3H-環戊二烯并[a]菲-3,17(6H)-二酮(化合物25)；(6R,8R,9S,10R,13S,14S)-6-(甲氧基甲基)-10,13-二甲基-4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17-十四氫-3H-環戊二烯并[a]菲-3,17-二醇(化合物26)；(6S,8R,9S,10R,13S,14S)-6-(甲氧基甲基)-10,13-二甲基-4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17-十四氫-3H-環戊二烯并[a]菲-3,17-二醇(化合物27)；(6S,8R,9S,13S,14S)-6-(甲氧基甲基)-13-甲基-17-氧代-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6H-環戊二烯并[a]菲-3-基硫酸氫酯/鹽(hydrogensulfate)(化合物28)；(6R,8R,9S,13S,14S)-6-(甲氧基甲基)-13-甲基-17-氧代-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6H-環戊二烯并[a]菲-3-基硫酸氫酯/鹽(化合物29)；(6R,8R,9S,13S,14S)-13-甲基-6-(4-丙氧基丁基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6H-環戊二烯并[a]菲-3,17-二醇(化合物30)；(6R,8R,9S,13S,14S)-13-甲基-6-(5-乙氧基戊基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6H-環戊二烯并[a]菲-3,17-二醇(化合物31)；(6R,8R,9S,10R,13S,14S)-6-(甲氧基甲基)-10,13-二甲基十六氫-1H-環戊二烯并[a]菲-3,17-二醇(化合物32)；和(6R,8S,9S,14S,17S)-6-(甲氧基甲基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6H-環戊二烯并[a]菲-3,17-二醇(化合物33)。本發明的方法的化合物如在U.S.S.N.12/627,874(通過引用并入本文)中所述制備，且屬于用于制備雌二醇的6-羥甲基、6-烷氧基烷基、6-烷基硫基烷基、6-氨基甲氧基、6-甲基氨基甲氧基或6-甲氧基胺衍生物的方法。用于制備雌二醇衍生物的反應方案在下列方案1-3中給出。這類方法可以包括：使雌二醇的叔丁基二甲基甲硅烷基衍生物與LIDAKOR/THF/甲醛反應以得到6-羥基化的化合物，隨后進行如下的這類步驟：(i)水解而得到雌二醇的6-羥甲基衍生物；和/或(ii)用硫酸二甲酯處理，隨后水解，以得到雌二醇的6-甲氧基甲基衍生物。通過在C-17羥基位置處進一步氧化化合物3，可以得到化合物1。根據U.S.S.N.13/232,798(通過引用并入本文)，可以制備化合物33和其它二甲基化合物。在一個替代性的方案中，還可以通過包括如下這類步驟的方法制備本發明的化合物：(i)保護雌二醇化合物，(ii)用LIDAKOR/丁基鋰/二異丙胺/叔戊醇鉀(potassiumtert-amylate)使被保護的雌二醇化合物的芐基6-位酰化，(iii)用氫化鋁鋰還原6位醛，(iv)使雌二醇化合物的被保護部位脫保護。制備雌二醇衍生物的反應方案在下列方案2中給出。通過下列方案中描述的以下方法，可以合成本發明的化合物。方案1方案2根據本發明的多種烷基氧基烷基衍生物涉及選擇烷化劑。知曉本發明的本領域技術人員將了解此類衍生物，并且可以通過本文描述的排序的合成過程獲得。因此，無限制的，可以如本文所描述的使用多種C1-C6烷基和取代的烷基試劑制備相應的烷基氧基烷基衍生物。在本發明的另一個方面，在下列反應方案中公開了制備雌二醇的6-氨基衍生物的方法。相應地，使用方案1-2中描述的6-甲氧基化的雌二醇，并將其轉化成其各自的氨基衍生物。方案3提供了用于預防阿爾茨海默氏病和有關障礙的方法和化合物。在本發明的一個方面，提供了一種用于開始、增強或增加細胞中編碼LPL蛋白基因和/或ApoC2蛋白基因的RNA的基因轉錄的方法，所述方法包括，使所述細胞與有效量的選自式(I)和(Ia)至(If)的6-取代的雌二醇衍生物接觸。應當理解，基因轉錄的這樣的開始、增強或增加可以針對這些基因中的一個或多個而發生。如本文中所指出的，本發明化合物的鹽意指無毒性的“藥學上可接受的鹽”。然而，其它的鹽可以用于制備本發明的化合物或其藥學上可接受的鹽。當本發明的化合物含有堿性基團時，術語“藥學上可接受的鹽”中包括的鹽意指一般通過使游離堿與適合的有機或無機酸反應制備的無毒性鹽。代表性的鹽包括本領域中已知的任何這類鹽。如果本發明的化合物攜帶酸性部分，那么其適合的藥學上可接受的鹽可以包括堿金屬鹽，例如鈉或鉀鹽；堿土金屬鹽，例如鈣或鎂鹽；和與適合的有機配體形成的鹽，例如季銨鹽。如本文中所指出的，本發明的化合物可以與其它藥劑或將增強哺乳動物受試者的治療方案的其它藥劑組合使用。例如，所述方法的化合物可以與其它雌激素受體-β調節劑組合使用。這類組合中的單個組分可以在療法過程期間在不同時間單獨地、或以分份的或單一的組合形式同時地施用于需要這類療法的患者或這類患者的部位。因此，應將本發明理解為包括所有同時或交替治療的這類方案，并且相應地解釋術語“施用”。應該理解，本發明化合物與其它可用于治療靶向疾病的藥劑的組合的范圍主要包括與可用于治療涉及雌激素起作用的障礙的任何藥物組合物的任何組合。下述非限制性實施例和數據解釋了與本發明的化合物、組合物和/或方法有關的不同方面和特征，包括6-取代的雌二醇衍生物的合成，如通過本文描述的方法可得到的。與現有技術相比，本發明化合物和方法提供了驚人的、意外的和與其相反的結果和數據。盡管通過幾種化合物、其部分和/或取代基的制備和使用來說明了本發明的實用性，本領域技術人員將理解，可比較的結果可用各種其它化合物、部分和/或取代基得到，這與本發明的范圍相稱。如上面所指出的，根據在U.S.S.N.12/627,874和U.S.S.N.13/232,798中公開的操作制備所述方法的化合物。為了舉例說明在上面和在U.S.S.N.12/627,874中詳細描述的合成方案，將化合物21的制備提供在實施例1中。實施例1用于制備化合物21的方法a)(8R,9S,13S,14S,17S)-3,17-雙(甲氧基甲氧基)-13-甲基-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6H-環戊二烯并[a]菲——將氯甲基甲基醚(7.0mL，92.0mmol)加到β-雌二醇(5g，18.4mmol)和二異丙基乙胺(16.0mL92mmol)在100mLTHF中的溶液中。將反應混合物加熱回流并攪拌18小時。在真空中移除THF，并將黃色/棕色的油分配在水和CH2Cl2之間。分離有機層，用鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)，過濾，并在真空中蒸發以得到金色的油。通過硅膠柱色譜法(10％EtOAc/Hex)純化提供了為粘稠澄清油的標題化合物(5.7g，86％)。b)(8R,9S,13S,14S,17S)-3,17-雙(甲氧基甲氧基)-13-甲基-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6H-環戊二烯并[a]菲-6-醇——向氬氣下冷卻至-78℃的叔丁醇鉀(8.87g，79.0mmol)和二異丙胺(11.2mL，79.0mmol)在80mL無水THF中的溶液中滴加正-丁基鋰(49.4mL，79.0mmol，在己烷中1.6M)。將反應混合物在-78℃攪拌30-45分鐘。然后滴加來自a)的化合物(5.7g，15.8mmol)在45mLTHF中的溶液，并將反應混合物在-78℃攪拌3小時。在加入來自a)的化合物期間，反應物轉變為深紅色。然后緩慢加入硼酸三甲酯(10.6mL，94.8mmol)，并將混合物加熱至0℃，并攪拌2小時。然后加入過氧化氫(24mL30％水溶液)，并將反應混合物加熱至室溫，并再攪拌1小時。將反應冷卻回0℃，并用10％的Na2S2O3水溶液(70ml)小心淬滅。將所得混合物用EtOAc(2×)萃取，并將合并的有機萃取物干燥(Na2SO4)，過濾，并在真空中蒸發以得到黃色/棕色的油。通過硅膠柱色譜法(25％EtOAc/Hex)純化提供了為白色固體的標題化合物(3.5g，59％)。c)(8R,9S,13S,14S,17S)-3,17-雙(甲氧基甲氧基)-13-甲基-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6H-環戊二烯并[a]菲-6-酮——將戴斯-馬丁氧化劑(Dess-MartinPeriodinane)(9.46g，22.3mmol)分次加到來自b)的化合物(7.0g，18.6mmol)在300mLCH2Cl2中的溶液中。將所得反應混合物在室溫攪拌3小時。將混合物傾注至水中，并分離層。用CH2Cl2萃取水層，并用鹽水洗滌合并的有機萃取物，干燥(Na2SO4)，過濾，并在真空中蒸發以得到膠粘的、棕色固體。通過硅膠柱色譜法(15％EtOAc/Hex)純化提供為淡黃色、粘稠油狀物的標題化合物(6.0g，86％)。d)2-(((8R,9S,13S,14S,17S)-3,17-雙(甲氧基甲氧基)-13-甲基-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6H-環戊二烯并[a]菲-6-亞基(ylidene))乙酸乙酯——將膦酰基乙酸三乙酯(4.1mL，20.8mmol)在室溫加到氫化鈉(832mg，20.8mmol)在25mLTHF中的混合物中。在約10分鐘之后，滴加來自c)的化合物(3.9g，10.4mmol)在10mLTHF中的溶液。將所得反應混合物在密封的管中加熱回流72小時。將混合物在真空中濃縮，并通過硅膠柱色譜法(梯度從5％EtOAc/Hex至40％EtOAc/Hex)純化以得到為澄清的、粘稠油狀物的標題化合物(3.4g，74％)。e)2-((8R,9S,13S,14S,17S)-3,17-雙(甲氧基甲氧基)-13-甲基-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6H-環戊二烯并[a]菲-6-亞基)乙醇——將來自d)的化合物(3.1g，6.97mmol)在65mLTHF中的溶液在0℃用氫化鋁鋰(5.2mL，10.46mmol，在THF中2M)逐滴處理。移除冷水浴，并將反應混合物在室溫攪拌15分鐘。將反應冷卻回0℃并通過小心加入1.3mL水，接著2.6mL2NNaOH，然后1.3mL水淬滅。將混合物強力攪拌直至白色固體形成。過濾混合物，并將濾液在真空中濃縮以得到為澄清油的標題化合物(2.8g，99％)。f)2-((6S,8R,9S,13S,14S,17S)-3,17-雙(甲氧基甲氧基)-13-甲基-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6H-環戊二烯并[a]菲-6-基)乙醛——將來自e)的化合物(3.09g，7.68mmol)和10％Pd/C(500mg)在100mL乙酸乙酯中的混合物在40psiH2(g)下在室溫攪拌5小時。通過硅藻土過濾混合物，并用乙酸乙酯充分洗滌硅藻土。將濾液在真空中濃縮以得到淺黃色的油(3.1g)。將該油溶解于100mL二氯甲烷中，并分次加入戴斯-馬丁氧化劑(3.9g，9.22mmol)。將所得反應混合物在室溫攪拌30分鐘。將混合物傾注至水中并用CH2Cl2萃取。將合并的有機萃取物用鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)，過濾，并在真空中蒸發以得到棕色固體。通過硅膠柱色譜法(15％EtOAc/Hex)純化提供為澄清油的標題化合物(2.0g，65％)。g)4-((6R,8R,9S,13S,14S,17S)-3,17-雙(甲氧基甲氧基)-13-甲基-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6H-環戊二烯并[a]菲-6-基)丁-2-烯-1-醇——將雙(三甲基硅烷基)氨基鋰(18.4mL，18.4mmol，在THF中1.0M)在0℃滴加到(2-羥乙基)溴化三苯膦(3.37g，8.70mmol)在60mLTHF中的混懸液中。在1小時之后，將金棕色溶液用來自f)的化合物(1.4g，3.48mmol)在10mLTHF中的溶液逐滴處理。將所得反應混合物在0℃攪拌40分鐘，然后用飽和NH4Cl水溶液淬滅。將所得混合物用EtOAc(2×)萃取，并將合并的有機萃取物干燥(Na2SO4)，過濾，并蒸發以得到棕色的油。通過硅膠柱色譜法(梯度從20％EtOAc/Hex至75％EtOAc/Hex)純化提供為淡黃色、粘稠油的標題化合物(680mg，45％)。h)4-((6R,8R,9S,13S,14S,17S)-3,17-雙(甲氧基甲氧基)-13-甲基-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6H-環戊二烯并[a]菲-6-基)丁-2-烯醛——將戴斯-馬丁氧化劑(437mg，1.03mmol)在室溫加到來自g)的化合物(370mg，0.86mmol)在15mLCH2Cl2中的溶液中。將所得反應混合物攪拌10分鐘，然后傾注至水中。分離層并將水層用CH2Cl2(2×)萃取。將合并的有機萃取物用鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)，過濾，并在真空中蒸發以得到棕色的油。通過硅膠柱色譜法(梯度從5％EtOAc/CH2Cl2至10％EtOAc/CH2Cl2)純化提供為淡黃色、粘稠油的標題化合物(358mg，86％)。i)6-((6R,8R,9S,13S,14S,17S)-3,17-雙(甲氧基甲氧基)-13-甲基-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6H-環戊二烯并[a]菲-6-基)六-2,4-二烯-1-醇——將雙(三甲基硅烷基)氨基鋰(4.3mL，4.29mmol，1.0M在THF中)在0℃滴加到(2-羥乙基)溴化三苯膦(786mg，2.03mmol)在14mLTHF中的混懸液。在30分鐘之后，將金棕色溶液用來自h)的化合物(345mg，0.81mmol)在2mLTHF中的溶液逐滴處理。將所得反應混合物在0℃攪拌20分鐘，并用飽和NH4Cl水溶液淬滅。將所得混合物用EtOAc(2×)萃取，并將合并的有機萃取物干燥(Na2SO4)，過濾，并蒸發以得到棕色的油。通過硅膠柱色譜法(梯度從5％EtOAc/CH2Cl2至40％EtOAc/CH2Cl2)純化提供為黃色、粘稠油的標題化合物(140mg，38％)。j)(6R,8R,9S,13S,14S,17S)-6-(6-甲氧基己-2,4-二烯-1-基)-3,17-雙(甲氧基甲氧基)-13-甲基-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6H-環戊二烯并[a]菲——將在i)中的化合物(135mg，0.3mmol)的溶液冷卻至0℃，分次加入氫化鈉(120mg，3.0mmol)。在5-10分鐘之后，滴加碘甲烷(0.19mL，3.0mmol)，并將所得反應混合物加熱至室溫，并攪拌4小時。加入EtOAc并將反應用水小心淬滅。分離層并將有機層干燥(Na2SO4)，過濾，并蒸發以得到棕色油狀殘余物。通過硅膠柱色譜法(梯度從5％EtOAc/Hex至20％EtOAc/Hex)純化提供為澄清油的標題化合物(92mg，65％)。k)(6R,8R,9S,13S,14S,17S)-6-(6-甲氧基己基)-3,17-雙(甲氧基甲氧基)-13-甲基-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6H-環戊二烯并[a]菲——將在j)中的化合物(90mg，0.19mmol)和10％Pd/C(100mg)在5-10mL乙酸乙酯中的混合物在H2(g)氣球下和室溫下攪拌16小時。通過硅藻土過濾混合物，并用乙酸乙酯充分洗滌硅藻土。將濾液在真空下濃縮以得到為澄清油的標題化合物(90mg，99％)。l)(6R,8R,9S,13S,14S)-6-(6-甲氧基己基)-13-甲基-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6H-環戊二烯并[a]菲-3,17-二醇(化合物21)——將來自k)的化合物(90mg，0.19mmol)在各自1.5mL的6NHCl和THF中的溶液在室溫攪拌5小時。將反應混合物用水稀釋，并用EtOAc(2×)萃取。將合并的有機萃取物干燥(Na2SO4)，過濾，并在真空中蒸發以得到澄清的，油狀殘余物。通過硅膠柱色譜法(梯度從CH2Cl2至30％EtOAc/CH2Cl2)純化，得到為白色穩定泡沫的化合物21(38mg，52％)。實施例2用于制備化合物3和4的方法正如方案2中概括的，按照下列方式合成雌二醇衍生物化合物3和4。通過使用甲苯磺酸或樟腦磺酸作為催化劑，使β-雌二醇與二氫吡喃在THF中反應，制備被保護的雌二醇化合物。如本領域普通技術人員可以理解的，該反應為平衡反應并且在這種條件下可能無法進行完成。因此，可以在該反應混合物中發現兩種單保護的雌二醇。這樣的粗反應混合物可以與乙腈一起經歷研磨步驟，產生以大約70％收率結晶的所需雙-THP雌二醇。如方案2中所示，通過使用稱作LiDAKOR的強堿混合物(丁基鋰、二異丙胺和叔戊醇鉀)使芐基6-位酰化，獲得關鍵中間體。在-70℃的這類條件下，本領域普通技術人員可以理解在芐基位置上奪取質子。然后通過柱色譜法純化中間體以大約50％收率得到糖漿狀物，其仍然含有小量雜質和柱溶劑。使用過量的氫化鋁鋰還原醛，得到高收率的外消旋的羥甲基雌二醇化合物。為了制備化合物3和4的目的，通過用氫化鈉和甲基碘使羥甲基雌二醇化合物甲基化而制備甲氧基甲基化合物。通過柱色譜法純化甲氧基甲基化合物而得到玻璃狀泡沫。使保護基團脫保護得到外消旋的6-甲氧基甲基雌二醇化合物。使用手性制備型HPLC分離對映異構體而得到化合物3和4。就化合物4而言，實現>95:5R:S的手性純度。就化合物3而言，實現86:14S:R的手性純度。采用NMR確定6-位的絕對立體化學(其中4-和6-質子為特征)完全是在本領域普通技術人員的水平內。實施例3化合物在肺、胰腺和卵巢腫瘤細胞系中的表達譜該研究包括3個人腫瘤細胞系：A549、Panc-1和SK-OV-3。將所述系各自在2個燒瓶中培養至大約40％匯合。通過向培養基中加入不同濃度(即10μM、20μM50μM或100μM)的化合物，處理燒瓶之一。另一個模擬處理的燒瓶僅使用用于溶解和遞送藥物的媒介物處理。對提取自所述處理過的樣品和未處理過的樣品對的RNA進行在Agilent全人基因組微陣列(G4112F)上的微陣列分析。每個分析報告出在所述陣列上的41,000個特異性的mRNA檢測器各自的信使RNA豐度的差異。每個細胞系的這種處理過的樣品相對于未處理過的樣品的直接對比，會提供由藥物處理引起的mRNA豐度變化的極其靈敏的檢測。由于每個細胞系對比是自身標準化的，可以以高置信度在樣品之間對比結果。細胞制備將3個人腫瘤細胞系A549、Panc-1和SK-OV-3各自在2個燒瓶中培養至大約40％匯合。通過向培養基中加入10μM、50μM和100μM濃度的化合物，處理燒瓶之一。另一個模擬處理的燒瓶僅使用用于溶解和遞送藥物的媒介物處理。將所有燒瓶培養另外24小時，然后刮離細胞，并在冰冷的PBS中洗滌，然后離心收集。立即冷凍收獲的細胞，并在-80℃或更低保存。RNA純化使用基于Trizol的細胞裂解，從冷凍的組織樣品制備總RNA，隨后進行65℃熱苯酚提取和RNeasy色譜法純化。通過分光光度計法，分析純化的RNA樣品。通過測量在260nm的吸光度(A260)，確定RNA的濃度。當在pH11測量時，在260nm的1個單位的吸光度對應著35μgRNA/ml。RNA質量評估-A260/A280吸光度比率在260nm和280nm的讀數的比率(A260/A280)會提供就吸收紫外線的污染物(諸如蛋白)而言的RNA純度的估測。RNA具有大約2.1的理論A260/A280比率(10mMTris·Cl,pH7.5)。具有1.8或更高的A260/A280比率的提取的RNA會在該測定中提供優良結果。RNA質量評估-毛細管電泳通過使用毛細管電泳(AgilentBioAnalyzer)確定完整的28S和18S核糖體RNA的比率，試驗所述RNA的相對完整性。十分完整的RNA具有2.2的28S/18S比率。接收用于陣列分析的所有RNA具有超過1的比率，通過檢查具有不同28S/18S比率的樣品的內部再現性，確定可靠地再現的微陣列結果的最小28S/18S比率。探針生產和芯片雜交使用1微克RNA作為向Agilent低輸入標記反應的輸入，標記所有RNA。用Cy5(650nm發射體)核苷酸標記試驗RNA，并用Cy3(550nm發射體)核苷酸標記參照RNA。在AgilentH1Av2人表達芯片上進行標記、雜交和隨后的洗滌。在Agilent微陣列掃描儀上掃描得到的雜交的芯片，并使用Agilent特征提取軟件，從掃描的圖像中提取每個檢測器斑點的強度信息。雜交質量的最有效試驗是，得自在這些芯片上印制的大量基因副本的報告比率的差異水平。將一組基因探針各自在陣列上的隨機位置處印制10次。將所有集合之間的log2比率的標準差的中位值用作在整個陣列中的總標準差的估測器。數據和分析在FileMakerPro關系數據庫中收集所有3種雜交的關鍵數據，以實現搜索的容易公式化，所述搜索可以鑒別表現出特定轉錄模式的基因。報告的數據是減去紅色(處理過)和綠色(未處理過)背景的信號。這是數據的最少修改形式。基于眾多不與人DNA互補的探針，從載玻片(slide)估測背景“表面”。這些充當標記的cRNA與陣列表面的非特異性結合以及標記的cRNA與固定化的DNA寡聚體的非特異性結合的估測器。使用該信息，估測在每個探針周圍的局部噪音，并將其從在陣列上的每個特有探針特征的寡核苷酸沉積區域處發現的信號(gBGSubSignal,rBGSubSignal)中減去。將得自處理過的細胞的RNA和未處理過的細胞的RNA的信號的比率報告為直接比率和log2比率(Ratio,Log2Ratio)。在將每個通道中的強度標準化的迭代過程中確定比率，從而發現使具有幾乎相同的轉錄水平并因而具有非常接近1的比率的大量基因的強度相似性最大化的標量。在已經計算出標準化的數據的比率以后，分析不同的對照樣品和副本樣品，以構建關于結果的可再現性和該再現性如何隨信號強度和噪音而變化的模型。利用這些參數，可以估測在從產生相同強度分布的單個過程中隨機抽取紅色和綠色強度時產生每個比率的可能性。報告每個樣品的這種可能性，且其是指示處理過的和未處理過的信號強度之間的差異的比率(PValLogRatio)的可能性的量度。該可能性可以用作將結果分成變化的和未變的基因的閾值。在數據庫中，使用p≤0.001的閾值作為處理過的和未處理過的樣品之間的mRNA豐度的顯著變化的切割點(Sig0.001)。鑒于在每個測定中觀察～40,000比率，該閾值會將預期的假陽性的數目減少至合理水平。指示相對于未處理過的樣品的顯著變化和變化方向的域(field)，會將測定結果減少至3類(trinarycategorical)：1，與未處理過的樣品相比上調；0，與未處理過的樣品相比未變；和-1，與未處理過的樣品相比下調(Tri)。使用該表示法，可容易地構建搜索，所述搜索會鑒別在任意單個或多個實驗集合中已經變化的基因。在下面表1中發現的基因表達數據表明，化合物4和化合物21上調LPL和ApoC2基因，但是不上調ApoC3基因。在表1中顯示的基因表達值是log2值和從三個人腫瘤細胞系(SKOV-3、A549和Panc-1)得到的數據的平均值。基因表達的顯著變化是p≤0.001。基因ID符合在NationalCenterforBiotechnologyInformation(NCBI)為EntrezGene數據庫開發的標準。表1所有文章和參考文獻(包括專利)的公開內容通過引用并入本文。現在以完整的、清楚的、簡明的和精確的術語描述本發明以及制備和使用它的方式和方法，從而使它所屬領域的任何技術人員能夠制備和使用它們。在本說明書中引用的所有參考文獻通過引用并入本文。應當理解，前述內容描述了本發明的優選實施方案，并且可以在其中做出修改而不背離本發明的精神或范圍。當前第1頁1 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