防腐劑組合物及其用圖
【技術領域】
[0001] 本發明設及食品添加劑技術領域，具體設及一種防腐劑組合物及其用途。
【背景技術】
[0002] 隨著社會的發展、人民生活水平的提高，食品安全越來越受到人們的重視。但無論 是在發展中國家還是發達國家，人類健康均遭受著食源性疾病的威脅。據統計，每年全球大 約=分之一的人有犯食源性疾病的經歷。
[0003] 食源性病原菌是導致食物變質和引發食源性疾病的主要因素，也是食品安全面臨 的長期難題。目前，國內外的研究工作主要集中在食品中游離致病致腐微生物方面。然 而，越來越多的研究表明，細菌生物被膜、亞致死細胞的修復W及病毒的變異等問題是食品 安全的重要隱性危害，也是導致食源性疾病爆發的重要原因。據估計，約65%-80%細菌性 感染是由生物被膜引起的（化Il-StoodleyLCostertonJW,Stoodl巧P.Bacterial biofilms:fromthenaturalenvironmenttoinfectiousdiseases[J].Natural ReviewsMicrobiology, 2004, (2): 95-108)。其中，食品工業中形成的生物被膜最有可 能是食源性疾病的罪魅禍首。例如，在食品發酵中，一些腐敗菌和病原菌會形成生物被膜， 從而導致最終產品的腐敗和疾病的爆發。因此，食品工業中生物被膜對食品安全的威脅是 不容忽視的。
[0004] 生物被膜是微生物為適應自然環境而特有的生命現象，在不利于其生長或存在的 條件下，細菌間相互粘連，并分泌聚合物基質形成膜狀物。任何細菌在特定的條件下均能 形成生物被膜，常見的被膜性致病菌包括單核細胞增生性李斯特菌、大腸桿菌、蠟樣芽抱桿 菌、金黃色葡萄球菌、糞腸球菌、克雷伯氏肺炎桿菌和銅綠假單胞菌等生物被膜。其中，蠟樣 芽抱桿菌是一種能引起食物中毒的常見病源菌，在自然界中廣泛存在，極易污染富含蛋白 質和淀粉的米飯、肉制品、豆類食品、乳制品及賠烤食品等。該菌引起的食品中毒案例在我 國食物中毒中位居前列。但是，迄今為止，國內尚未見關于蠟樣芽抱桿菌生物被膜研究的報 道；在國外相關研究也較少。 陽〇化]與浮游微生物相比，生物被膜對環境壓力的抗性更強且危害更大、更難清除。據報 道，生物被膜對各種化學殺菌劑的敏感程度只是同種浮游菌的1/10~1/1000。由于生物被 膜對消毒劑的抗性更強，故生物被膜給食品工業如釀造、海產品加工、乳品加工、家禽屠宰 場及肉類加工等帶來嚴重的食品安全問題。食品加工的任何階段，從食品生產到消費均可 能感染各類微生物，特別是腐敗菌和病原菌易粘附于食品表面，在食品加工系統中形成生 物被膜。生物被膜一旦形成，不僅會污染食品、增加設備清洗難度，使就地清洗系統失效，成 為其他有害微生物的藏身之地，生物被膜還會促使更多細菌協同共生，使設備內外表面成 為傳播食源性疾病的隱性生物危害源，導致難W解決的食品質量與安全問題。因此，食品加 工過程中，生物被膜的控制和清除對保障食品安全尤為重要。
[0006] 現有技術中，食品工業中的研究方向仍是針對食品及其加工設備中的病原菌，主 要是采用消毒劑或殺菌劑等化學試劑來殺滅食品中的病原菌。但殺菌劑能夠殺滅食品中的 普通病原菌卻難W殺滅被膜態菌及其生物被膜。再者，食品工業對殺菌劑的使用有嚴格的 要求，殺菌劑必須安全、有效、使用方便、用完后能從載體表面去除、無毒性殘留。但傳統的 化學殺菌劑只在高濃度、大劑量時才對生物被膜有較顯著的殺滅作用，而高濃度、大劑量化 學殺菌劑的使用對人類健康構成嚴重威脅。因此，在生物被膜尚未形成前采取措施抑制生 物被膜的形成是控制生物被膜的首選。但生物被膜的形成是一個非常迅速的過程，到目前 為止，還沒有一種方法能完全有效地抑制生物被膜的形成。在食品工業中，很難通過頻繁消 毒抑制生物被膜的形成，故選擇不易形成生物被膜甚至能抑制生物被膜形成的材料作為食 品加工接觸表面是抑制被膜形成的重要途徑。近年來，一些含殺菌劑成分的食品包裝材料 在抑制食品表面病原菌和腐敗菌的生長方面表現出廣闊的應用前景。研究發現，某些化學 試劑可顯著抑制生物被膜的形成。Shanks等研究了巧樣酸鋼濃度對抑制金黃色葡萄球菌生 物被膜形成的影響，發現當其濃度大于0. 5%時，可有效抑制金黃色葡萄球菌生物被膜的形 成；相反，當濃度低于0. 5%時，會促進大多數金黃色葡萄球菌菌株生物被膜的形成（Shanks RMQ,SargentJL,MartinezRM,etal.Catheterlocksolutionsinfluence staphylococcalbiofilmformationonabioticsurfaces[J].NephrologyDialysis Transplantation, 2006, 21 (8): 2247-2255)。目前，還發現諸多化合物是生物被膜的專 一性抑制劑，但是出于安全的考慮，運些生物被膜抑制劑難W直接用在食品加工中。
[0007] 食品添加劑是為改善食品色、香、味等品質，W及為防腐和加工工藝的需要而加入 食品中的人工合成或者天然物質，目前我國食品添加劑有23個類別，2000多個品種，包括 抗氧化劑、膨松劑、著色劑酶制劑、增味劑、營養強化劑、防腐劑、甜味劑、增稠劑、香料等等。 其中，食品防腐劑是能防止由微生物引起的腐敗變質、延長食品保質期的添加劑。現有的防 腐劑僅僅是起到抑制食品中微生物的繁殖的作用，并不具有抑制食源性致病菌生物被膜活 動的作用，而且防腐劑必須嚴格按中國《食品添加劑使用衛生標準》規定添加，不能超標使 用。防腐劑在實際應用中存在很多問題，例如：達不到防腐效果，影響食品的風味食品防腐 劑和品質等；例如茶多酪作為防腐劑使用時，濃度過高會使人感到苦澀味，還會由于氧化而 使食品變色。
[0008] 由于食品添加劑通常較安全，故從食品安全性的角度來說，利用具有抗生物被膜 形成的食品添加劑來控制食品加工中的生物被膜是最理想的。但目前尚未有關于食品添 加劑能夠抑制食源性致病菌生物被膜，特別是抗性較強的蠟樣芽抱桿菌生物被膜形成的報 道。因此，亟需研究能夠抑制具有抗性強、危害大的食源性致病菌生物被膜形成，并且能夠 安全地添加到食品中的技術，從而為食品工業中生物被膜的控制、清除W及保障食品安全 提供新的途徑。
【發明內容】
[0009] 本發明的目的之一在于針對現有技術的不足，提供一種能夠顯著抑制蠟樣芽抱桿 菌等食源性致病菌生物被膜形成的防腐劑組合物。
[0010] 本發明的目的之二在于針對現有技術的不足，提供一種防腐劑組合物在抑制蠟樣 芽抱桿菌等食源性致病菌生物被膜形成的新用途，可用于制備抑制食源性致病菌生物被膜 形成的藥物、食品添加劑W及飼料添加劑。
[0011] 為了實現上述目的，本發明采用如下技術方案： 提供一種防腐劑組合物，所述防腐劑組合物是用于抑制食源性病原菌生物被膜形成， 其包括W下組分： 對徑基苯甲酸乙醋0. 005~0.Ig; 乙二胺四乙酸二鋼0. 005~0.Ig; 溶劑每1000血； 其中： 所述溶劑為濃度為20%~35%的乙酸或乙醇溶液； 所述對徑基苯甲酸乙醋和所述乙二胺四乙酸二鋼的質量比為0. 5~1:0. 5~1 ; 其制備方法如下： 按配比將對徑基苯甲酸乙醋和乙二胺四乙酸二鋼依次添加至溶劑中，待充分溶解后， 即獲得所述防腐劑組合物。
[0012] 優選的，所述防腐劑組合物包括W下組分： 對徑基苯甲酸乙醋0.01~0.Ig; 乙二胺四乙酸二鋼0.Ol~0.Ig; 溶劑每1000血。
[0013] 優選的，所述防腐劑組合物包括W下組分： 對徑基苯甲酸乙醋0.05g; 乙二胺四乙酸二鋼0.05g; 溶劑每1000血。
[0014] 優選的，所述防腐劑組合物包括W下組分： 對徑基苯甲酸乙醋0.03g; 乙二胺四乙酸二鋼0.02g; 溶劑 每1000血。
[0015] 優選的，所述防腐劑組合物中，對徑基苯甲酸乙醋和乙二胺四乙酸二鋼的質量比 為 1:1。
[0016] 優選的，所述防腐劑組合物的抑值為4~8。
[0017] 本發明還提供了上述防腐劑組合物用于抑制食源性致病菌生物被膜形成的新用 途。
[0018] 所述防腐劑組合物在制備抑制食源性致病菌生物被膜形成的藥物或食品添加劑 組中的應用。
[0019] 所述防腐劑組合物在制備抑制食源性致病菌生物被膜形成的飼料添加劑中的應 用。
[0020] 所述食源性致病菌生物被膜為蠟樣芽抱桿菌生物被膜。
[0021] 本發明的有益效果是： 本發明的防腐劑組合物，是由每1000 mL溶劑中含有0. 005~0.Ig對徑基苯甲酸乙醋和 0. 005~0.Ig乙二胺四乙酸二鋼經過混合而成，其中對徑基苯甲酸乙醋和乙二胺四乙酸二鋼 的質量比為0. 5~1:0. 5~1的防腐劑組合物。與現有技術相比，本發明具有W下優點： 1)本發明的防腐劑組合物中，對徑基苯甲酸乙醋和乙二胺四乙酸二鋼的質量比為 0. 5~1:0. 5~1，對徑基苯甲酸乙醋和乙二胺四乙酸二鋼復合使用，能夠對食源性致病菌生物 被膜產生強烈的協同抑制效應，從而具有顯著抑制食源性致病菌生物被膜形成的功效； 2) 本發明的防腐劑組合物安全性好，具有高效、低毒、廣譜、易配伍、低成本的優點，而 且該防腐劑組合物的濃度為0. 02~0.Ig/l，其符合國家對食品添加劑的用量要求，其在低濃 度范圍內即具有顯著抑制食源性致病菌生物被膜的作用，運對于在保障食品合理保存期的 前提下盡可能少地使用防腐劑、增加食品的安全性W及降低產品成本是具有積極意義的； 3) 本發明提供了防腐劑組合物在抑制食源性致病菌生物被膜形成的新用途，可用于制 備抑制食源性致病菌生物被膜形成的藥物、食品添加劑W及飼料添加劑，為食品工業中生 物被膜的控制、清除提供了新的途徑，進而為食品的安全性提供可靠的保障。
【附圖說明】
[0022] 圖1是本發明的防腐劑組合物及其用途的實施例1的蠟樣芽抱桿菌生物被膜生長 曲線圖。
【具體實施方式】
[0023] 結合W下實施例及附圖對本發明作進一步說明。
[0024] W下實施例均采用廣東省微生物研究所菌種保藏中屯、的蠟樣芽抱桿菌(菌種保藏 號：CMCC63303)，按菌懸液定量殺菌進行試驗。
[00巧]1實驗材料與儀器設備 對徑基苯甲酸乙醋、乙二胺四乙酸二鋼、山梨酸鐘、苯甲酸等均購自諾維信生物技術有 限公司；其他試劑均為分析純試劑或生化試劑。不誘鋼片（304型，規格1.2cmX1.2cm) 由廣州南聯實業有