)斜面試管菌種轉接到新鮮的試管斜面上，28°C培養l-2d，培養使用的斜面培養基為12婆美度麥芽汁培養基(含瓊脂2% )，然后從已培養成熟的斜面中用接種環挑取三環接入液體種子培養基中，液體培養基配方為麥芽浸粉2%，葡萄糖I %，初始pH為5-6。將接種后的液體培養搖瓶放在28°C，180r/min的丨旦溫振蕩器中培養24h。
[0032]4、植物乳桿菌(Lactobacillus plantaruml.2469)液體種子制備
[0033]將保藏在冷箱的植物乳桿菌(Lactobacillus plantaruml.2469)試管菌種轉接至裝有5mL培養基的試管中進行32°C靜止培養48h，培養使用的培養基為MRS培養基(蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母膏5g，葡萄糖20g，磷酸氫二鉀2g，梓檬酸二錢2g,吐溫801mL，硫酸鎂0.58g，硫酸錳0.25g，水100mL)，然后從已培養成熟的試管中用移液品吸取接種量為10 %液體種子加入種子培養基中，液體培養基配方為MRS培養基，初始pH為6-7。32 °C，恒溫靜置培養36_48h。
[0034]5、以多糖提取后的殘渣多菌種發酵過程
[0035]取提取過多糖后的麥冬殘渣50公斤，加入麩皮30公斤，將麥冬殘渣和麩皮混合均勻，加入水使配制好的發酵原料中初始水分含量為60-70%。將配制好的原料采用高壓蒸汽滅菌，滅菌參數為，蒸汽壓力為I公斤，溫度120°C，滅菌時間30分鐘。滅菌后的原料冷卻至30-35°C，按原料重量接入15%的靈芝液體菌種、0.5%的植物乳桿菌，0.5%產朊假絲酵母。混合均勻后，將物料攤至厚度10-12cm，在28°C溫度培養，當靈芝菌絲鋪滿整個培養基時結束發酵，發酵時間為10-13天。發酵結束后，將發酵物以60-70°C，通風干燥至恒重得富含靈芝多糖生物飼料產品。
[0036]實施實例2
[0037]1、麥冬多糖提取
[0038]取麥冬藥渣100公斤，用粉碎機粉碎并過篩至10目以下。加入1500公斤的水，混合均勻后，加熱至80°C并維持1.5h，減壓濃縮至體積為150公斤。在濃縮液中加入無水乙醇600公斤至最終醇濃度為80%，4°C低溫靜置過夜，沉淀離心后，60°C低溫真空干燥得到黃色麥冬多糖粉末。上清液進行乙醇回收，殘渣進行混合菌種發酵。
[0039]2、靈芝(Ganoderma sp.5.00067)液體種子制備
[0040]本發明所述靈芝(Ganoderma sp.5.00067)液體菌種制備接種前首先在試管斜面上進行26°C培養6-9d，培養使用的斜面培養基為PDA培養基(含蔗糖2 %，瓊脂2 % )，然后從已培養成熟的斜面中用接種鏟鏟下三塊菌塊接入一級液體種子培養基中，菌塊大小為
0.5cmX0.5cm左右，液體培養基配方為麥冬殘渣15%，玉米粉I %、酵母膏0.4%，葡萄糖2 %，硫酸鎂0.02%，初始pH為6-7。將接種后的液體培養搖瓶放在26-28 °C，170r/min的十旦溫振蕩器中培養5-6d。再按接種量的10%接入二級液體種子培養基中，二級種子培養基配方為新鮮麥冬藥渣藥渣25 %，玉米粉I %，葡萄糖I %，硫酸鎂0.02%，，初始pH為6-7，將接種后的液體培養搖瓶放在24_26°C，170r/min的丨旦溫振蕩器中培養5_6d。
[0041]3、產朊假絲酵母(Candida utilis2.1180)液體菌種制備
[0042]將保藏在冷箱的產朊假絲酵母(Candida utilis2.1180)斜面試管轉接到新鮮的試管斜面上，28°C培養l-2d，培養使用的斜面培養基為12婆美度麥芽汁培養基(含瓊脂2% )，然后從已培養成熟的斜面中用接種環挑取三環接入液體種子培養基中，液體培養基配方為12婆美度麥芽汁培養基。將接種后的液體培養搖瓶放在28°C，180r/min的恒溫振蕩器中培養24h。
[0043]4、植物乳桿菌(Lactobacillus plantaruml.2469)液體種子制備
[0044]將保藏在冷箱的植物乳桿菌(Lactobacillus plantaruml.2469)試管菌種轉接至裝有5mL培養基的試管中進行32°C靜止培養48h，培養使用的培養基為MRS培養基(蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母膏5g，葡萄糖20g，磷酸氫二鉀2g，梓檬酸二錢2g,吐溫801mL，硫酸鎂0.58g，硫酸錳0.25g，水100mL)，然后從已培養成熟的試管中用移液品吸取接種量為10 %液體種子加入種子培養基中，液體培養基配方為MRS培養基，初始pH為6-7。32 °C，恒溫靜置培養36_48h。
[0045]5、以多糖提取后的殘渣多菌種發酵過程
[0046]取提取過多糖后的麥冬殘渣50公斤，加入麩皮20公斤，加入稻殼10公斤，將三者混合均勻，加入水使配制好的發酵原料中初始水分含量為60-70% ο將配制好的原料采用高壓蒸汽滅菌，滅菌參數為，蒸汽壓力為I公斤，溫度120°C，滅菌時間30分鐘。滅菌后的原料冷卻至30-35°C，按原料重量接入10%的靈芝液體菌種、0.1 %的植物乳桿菌，0.1%產朊假絲酵母。混合均勻后，將物料攤至厚度10-12cm，在28°C溫度培養，當靈芝菌絲鋪滿整個培養基時結束發酵，發酵時間為10-15天。
[0047]6、干燥
[0048]發酵結束后，將發酵物以60-70°C，通風干燥至恒重得富含靈芝多糖生物飼料產品O
【主權項】
1.一種麥冬藥渣的資源化綜合利用技術，其主要特征在于以中藥制藥企業廢取物麥冬藥渣為原料提取麥冬多糖及發酵制備富含靈芝多糖的生物飼料。能有效的綜合利用廢棄麥冬藥渣，減少環境污染，實現資源化最大利用。其具體工藝特征如下: (1)麥冬多糖的提取回收 麥冬藥渣用粉碎機粉碎并過篩至10目以下。加入麥冬藥渣10倍量的水回流提取2次，每次1.5h，提取溫度為80°C。減壓濃縮至原液體積的1/10左右。在濃縮液中加入無水乙醇至最終醇濃度為80%，4°C低溫靜置過夜，沉淀離心后，冷凍干燥得到淺黃色麥冬多糖粉末。上清液進行乙醇回收，殘渣發酵富含靈芝多糖的生物飼料。 (2)麥冬殘渣混菌發酵生產富含靈芝多糖生物飼料 提取過多糖后的麥冬殘渣50公斤，加入麩皮30公斤，將麥冬殘渣和麩皮混合均勻，加入水使配制好的發酵原料中初始水分含量為60-70%。將配制好的原料采用高壓蒸汽滅菌，滅菌參數為，蒸汽壓力為I公斤，溫度120°C，滅菌時間30分鐘。滅菌后的原料冷卻至30-35°C，按原料重量接入15%的靈芝液體菌種、0.5%的植物乳桿菌，0.5%產朊假絲酵母。混合均勻后，將物料攤至厚度10-12cm，在28°C溫度培養，當靈芝菌絲鋪滿整個培養基時結束發酵，發酵時間為10-13天。發酵結束后，將發酵物以60-70°C，通風干燥至恒重得富含靈芝多糖生物飼料產品。2.根據權利用求I所述的方法其特征在于所采用的混合發酵菌種為靈芝菌(Ganoderma sp.5.00067)，植物乳桿菌(Lactobacillus plantaruml.2469)，產H元假絲酵母(Candida utilis2.1180)。3.根據權利用求I所述的方法其特征在于靈芝菌使用液體菌種，靈芝液體菌種制備接種前首先在試管斜面上進行28°C培養5-8d，培養使用的斜面培養基為PDA培養基(含蔗糖2%，瓊脂2% )，然后從已培養成熟的斜面中用接種鏟鏟下三塊菌塊接入一級液體種子培養基中，菌塊大小為0.5cmX 0.5cm左右，液體培養基配方為麥冬殘渣15 %，玉米粉I %、酵母膏0.4%，葡萄糖2 %，硫酸鎂0.02%，初始pH為6-7。將接種后的液體培養搖瓶放在26-28°C, 170r/min的恒溫振蕩器中培養5_6d。再按接種量的10%接入二級液體種子培養基中，二級種子培養基配方為新鮮麥冬藥渣藥渣20 %，玉米粉I %，葡萄糖I %，硫酸鎂0.02%,,初始pH為6-7，將接種后的液體培養搖瓶放在25-28°C，170r/min的恒溫振蕩器中培養4d后液體菌種成熟。4.根據權利用求I所述的方法富含靈芝多糖生物飼料其特征在于其可溶性活性多糖含量在20%以上，植物乳桿菌含量為0.82X 19個/g，產朊假絲酵母為0.16X10 12個/g。
【專利摘要】本發明屬于廢棄資源再生利用的技術領域，針對目前麥冬藥渣這種可再生利用資源處理存在的浪費和環境污染的問題，提供了一種中藥制藥企業麥冬藥渣回收麥冬多糖及其殘渣發酵生產富含靈芝多糖生物飼料綜合利用技術。其包括麥冬多糖提取、靈芝液體菌種馴化及制備，麥冬殘渣多菌種混合發酵等工藝階段。該方法不僅能有效的綜合利用廢棄麥冬藥渣，減少環境污染，而且可以從麥冬藥渣中獲得附加值較高的麥冬多糖及為麥養殖業提供一種具有提高免疫力的新型生物飼料產品，該方法獨特、工藝新穎，具有良好的經濟效益，社會效益，極有推廣應用價值。<pb pnum="1" />
【IPC分類】A23K1/14, C08B37/00, A23K1/00
【公開號】CN104996729
【申請號】CN201410165775
【發明人】胡偉蓮, 戴德慧, 劉靂, 胡濟宏, 李娟
【申請人】浙江科技學院, 正大青春寶藥業有限公司
【公開日】2015年10月28日
【申請日】2014年4月21日