一種二咖啡酰亞精胺衍生物糖苷及其用圖
【技術領域】
[0001] 本發明屬于天然藥物領域，更具體的涉及一種二咖啡酰亞精胺衍生物糖苷及其作 為抗氧化劑和抗病毒劑的用途。
【背景技術】
[0002] 生命活動的許多過程都涉及到自由基的產生和清除。正常生理情況下，生物體內 自由基的產生和清除呈平衡狀態。一旦平衡失調，過剩的自由基會攻擊靶器官，造成細胞膜 脂質過氧化，核酸主鏈、蛋白質及多肽鍵斷裂，細胞凋亡等，引起機體衰老和器官退行性變 化，導致心腦血管疾病、癌癥、糖尿病及老年性癡呆等多種疾病的發生。
[0003] 目前，已有大量的抗氧化劑被用于食品、藥品和化妝品行業。例如，從茶葉中提取 的茶多酚被廣泛用于食品添加劑和化妝品中，其抗氧化能力高于維生素 E 10-20倍;具有顯 著抗氧化能力的EGCG(epigallocatechingallate)，正被開發成治療老年癡呆的藥物 ;黃 酮類化合物，如木犀草素、蘆丁和橙皮苷，均具有較好的抗氧化效果，可以用于心血管病和 腫瘤預防。因此，抗氧化劑的研究和開發在食品藥品行業中越來越引起重視。0RAC分析方法 作為衡量物質抗氧化能力的標準分析方法已在業內廣泛認同，受到美國農業部和美國國立 衛生院等眾多科研機構的認可。0RAC值也成為了食品中抗氧化物含量的國際通用標準單 位。
[0004] 神經退行性疾病是一類慢性、進行性神經疾病，以特定區域的遲發性神經細胞退 行性病變、細胞丟失為共同特征，是由于神經元或其髓鞘的喪失導致的，并隨著時間的推移 而惡化，導致功能障礙，神經退行性疾病按照其表型一般分為兩類:一類是影響運動的，如 小腦性共濟失調，帕金森病等，一類是影響記憶及其相關的癡呆癥，目前神經退行性疾病的 治療藥物仍然較少。
[0005] 老年癡呆是退行性疾病中的一種，為多病機異質性疾病，以進行性認知功能障礙 和記憶損害為特征的中樞神經系統退行性疾病綜合征，其表現為智力(包括記憶力、學習能 力、方向辨認能力、語言能力、理解能力以及判斷力）上的減退。該病在多種因素(包括生物 和社會心理因素)作用下發病，可能的發病因素和假說多達30余種，如家族史、頭部外傷、甲 狀腺病、病毒感染等。老年癡呆一般常見的有阿爾茨海默病(Alzheimer's diseaSe，AD)、血 管性癡呆病（Vascular dementia，VA)、路易體癡呆病（Dementia with Lewy bodies，DLB) 以及額顳癡呆(Frontotemporal dementia，FTD)等。在所有的癡呆患者中，阿爾茨海默病患 者占50~70%，是老年癡呆中最常見的類型。
[0006] 對于老年癡呆的治療目前主要分為：（1)控制伴發精神病理狀態的對癥治療，用藥 主要包括抗焦慮藥，如阿普唑侖、奧沙西泮、三唑侖等，抗抑郁藥，如百優解、帕羅西汀、舍曲 林等，抗精神病藥，如利培酮、奧氮平等；（2)益智或改善認知功能，用藥主要以乙酰膽堿酯 酶抑制劑、N-甲基-D-天門冬氨酸受體拮抗劑(匪DA)、雌激素類藥物和促進腦代謝藥物為 主。以上這些藥物能在一定程度上改善患者的癡呆癥狀，但不能從根本上阻止病情的惡化、 逆轉病情，因此尋找抗老年癡呆癥藥物的研制已經引起全世界的重視，并已建立許多相關 的生物活性篩選和評價體系。在現有眾多整體動物模型中，果蠅是人們最為熟知的模式生 物之一，果蠅有著其它模式動物不能比擬的優勢，如:個體空間占位極小（一般一個試劑瓶 中可以培養上千只果蠅）、飼養成本低、易培養、繁殖速度快且繁殖能力強(篩選通量高）、樣 品消耗量少(5-50mg)、壽命周期短（約50天，活性測試周期短）、與年齡相關的神經元退化明 顯，是老年癡呆癥等神經退行性疾病研究和藥物篩選的理想模型。
[0007] 二咖啡酰亞精胺衍生物是一類稀少的植物成分，目前研究較少。二咖啡酰亞精胺 衍生物糖苷以前未見任何報道。本發明即為從枸杞子中發現并分離了一類二咖啡酰亞精胺 衍生物糖苷，經實驗證明了其具有抗氧化和抗病毒活性，并具有抗老年癡呆等神經退行性 疾病的作用。。
【發明內容】
[0008] 本發明的一個目的是提供一類二咖啡酰亞精胺衍生物糖苷或其藥學上可接受的 鹽，其結構式如下：
[0009]
[0010] 其中：
[0011] RiUs和R4為羥基、甲氧基或任選取代的糖基，且Ri、R2、R3和R4中至少有一個為任 選取代的糖基。R5和R6同為_CH =或-CH2-，其中所述任選取代為任選被下述糖基中的一個或 多個取代:葡萄糖基、葡萄糖醛酸基、甘露糖基、半乳糖基、阿洛糖基、果糖基、山梨糖基、夫 糖基、鼠李糖基、雞納糖基、阿拉伯糖基、來蘇糖基、木糖基、核糖基等各種單糖基，以及由上 述單糖所形成的各種二糖基及多糖基。
[0012] 在本發明進一步地實施方案中，所述式（I)化合物優選為具有以下結構式的化合 物：
[0014] 工以丄丄丄；= = = = ^[0015] 式（ιν):κ1 = βκ?(3，Κ2 = Η，Κ3 = Η，Κ4=Η[0016] 式（ν):辦=山1?2 = !1，1?3 = 11，1?4=卩-0-61。[0017] 式（71):辦=山1?2 = 3-〇-61。，1?3 = 0-〇-61。，1?4=11[0018] 式（￥11):辦=0-〇-61。，1?2 = 11，1?3 = 0-〇-61。，1?4=11
[0013]
[0019]
[0020] 式（νιιι) :κ1 = Η，Κ2 = β · D · G1c，R3 = P · D · G1c，R4=H
[0021]
''3
[0022] 式（ix):辦=山1?2 = !1，1?3 = 11，1?4=3-0-61。
[0023] 式（χ):辦=山1?2 = 3-〇-61。，1?3 = 11，1?4=11
[0024] 式（父1):辦=山1?2 = !1，1?3 =卩-0-61。，1?4=11
[0025] 式（XII):辦=0-〇-61。，1?2 = 11，1?3 =卩一D -G1c，R4=H
[0026] 式 = = =
[0027] 式（XIV):辦=0-〇-61。，1?2 = 11，1?3 = 11，1?4=3-〇-61。
[0028]在本發明中，式（I)的二咖啡酰亞精胺衍生物糖苷的藥學上可接受的鹽，為式（I) 的二咖啡酰亞精胺衍生物糖苷與鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸等無機酸或三氟乙酸、乙酸、丙 酸、丙二酸、丁酸、乳酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、對甲苯磺酸、馬來酸，苯甲酸、琥珀酸、苦味 酸、酒石酸、檸檬酸、富馬酸等有機酸形成的鹽。
[0029]本發明的另一個目的是提供二咖啡酰亞精胺衍生物糖苷及其藥學上可接受的鹽 作為抗氧化劑在制備預防或治療神經退行性疾病藥物中的應用，所述神經退行性疾病包括 但不限于老年癡呆、帕金森氏癥、多發性硬化癥和亨廷頓氏病中一種或幾種;優選的為老年 癡呆，更優選的所述老年癡呆為阿爾茨海默病、血管性癡呆病、路易體癡呆病以及額顳癡 呆。
[0030]本發明的再一個目的是提供二咖啡酰亞精胺衍生物糖苷及其藥學上可接受的鹽 在制備抗病毒藥物中的應用，所述病毒優選為呼吸道合胞病毒。
[0031 ] 上述二咖啡酰亞精胺衍生物糖苷是從寧夏枸杞(Lycium barbarum)的果實，枸杞 子中分離得到。枸杞子采自中國寧夏回族自治區中寧縣。樣品保存于暨南大學藥學院中藥 及天然藥物研究所(編號：LYBA-2013-NX-ZN，地點：中國廣州市黃埔大道西601號暨南大學 藥學院，510632)。
[0032]上述二咖啡酰亞精胺衍生物糖苷及其藥學上可接受的鹽的制備方法具體包括以 下步驟：
[0033] (1)枸杞子用體積比60:40的乙醇-水加熱回流提取3次，每次2小時，過濾后，濾液 經減壓濃縮得濃縮液；
[0034] (2)濃縮液經大孔樹脂柱層析，依次用體積比為0:100、30:70、50:50、70:30和95:5 的乙醇-水洗脫，得到5個餾分FI、F2、F3、F4、F5;
[0035] (3)將體積比為30:70的乙醇-水洗脫得到的餾分F2,進行常壓硅膠柱層析，依次用 體積比為 95:5:0、90:10:1、85:15:1.5、80:20:2、70:30:3、60:40:4、50:50:5、40:60:6和0: 100:0的氯仿-甲醇-水洗脫，得到卩2.1、？2.2、？2.3、？2.4、？2.5、？2.6、？2.7、？2.8、？2.9和 F2.10共10個子餾分；
[0036] (4)將體積比50: 50: 5氯仿-甲醇-水洗脫得到的子餾分F2.8,過中低壓液相0DS柱 層析，依次用體積比為 10 :90:0 · 1、15:85:0 · 1、20 :80:0 · 1、25: 75:0 · 1、30 :70 :0 · 1、40:60: 0.1和100:0:0的甲醇-水-三氟乙酸洗脫，得到卩2.8.1、卩2.8.2、卩2.8.3、卩2.8.4、卩2.8.5、 F2.8.6、F2.8.7和F2.8.8共8個子餾分；
[0037] (5)將體積比為10:90:0.1的甲醇-水-三氟乙酸洗脫得到的子餾分F2.8.1，經過反 相制備級即]^制備(&381]1〇8；[1?301^(1(]18(3〇1111]111)，使用流速為811117/111；[11的體積比為20:80: 0· 1的甲醇-水-三氟乙酸進行洗脫，得到F2.8.1 · 1、F2.8.1.2、F2.8.1.3、F2.8.1.4和 F2.8.1.5共5個子饋分；
[0038] (6)將子饋分F2.8.1.3經反相制備級HPLC制備(Cosmosil Packed C18column)，使 用流速為8mL/min的體積比10:90:0.1的乙腈-水-三氟乙酸進行洗脫，得到式(XI)化合物的 三氟乙酸鹽；
[0039] (7)將子饋分F2.8.1.4經反相制備級HPLC制備(Phenomex Gemini C18column)，使 用流速為8mL/min的體積比為20:80:0.1的甲醇-水-三氟乙酸進行洗脫，得到式（II)化合物 的三氟乙酸鹽；
[0040] (8)將子饋分F2.8.1.5經反相制備級HPLC制備(Cosmosil Packed C18column)，使 用流速為8mL/min的體積比為10:90:0.1的乙腈-水-三氟乙酸進行洗脫，得到式（III)化合 物和式（IV)化合物的三氟乙酸鹽；
[0041] (9)將體積比40:60:6氯仿-甲醇-水洗脫得到的子餾分F2.9,過中低壓液相0DS柱 層析，依次用體積比為5 :95 :0 · 1、10 :90 :0 · 1、15: 85:0 · 1、20 :80 :0 · 1、25: 75: 0 · 1、30 : 70 : 0.1、40:60:0.1和100:0:0的甲醇-水-三氟乙酸洗脫，得到卩2.9.1小2.9.2、卩2.9.3、卩2.9.4、 F2 · 9 · 5、F2 · 9 · 6、F2 · 9 · 7、F2 · 9 · 8和F2 · 9 · 9共9個子餾分；
[0042] (10)將體積比為10:90:0.1的甲醇-水-三氟乙酸洗脫得到的子餾分F2.9.2,經過 反相制備級HPLC制備(Cosmosil Packed C18column)，使用流速為8mL/min的體積比為18: 82 : 0 · 1 的甲醇-水-三氟乙酸進行洗脫，得到F2.9.2.1