一種噁唑烷酮類抗菌藥磷酸鹽及其制備方法
【技術領域】
[0001] 本發明屬于醫藥領域，特別涉及噁唑烷酮類抗菌藥二磷酸鹽及其制備方法 技術背景
[0002] (S) -N- [ [3- [3-氟-4- (4- (2-吡啶）-1H-吡唑-1-基）苯基]-2-氧代-5-噁唑烷 基]甲基]-乙酰胺是新一代抗革蘭氏陽性菌候選藥，特別是對耐甲氧西林金黃色葡萄球菌 (MRSA)等耐藥革蘭氏陽性菌具有優良的體內外抗菌活性。但其在水中的溶解度低，不利于 給藥，在藥物評價過程中容易造成組內差異，阻礙藥物的進一步轉化。
【發明內容】
[0003] 本發明提供一種⑶-N- [ [3- [3-氟-4- (4- (2-吡啶）-1H-吡唑-1-基）苯 基]-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基]-乙酰胺二磷酸鹽（式I)及其制備方法，采用HPLC法或 i-NMR內標法測定制備的二磷酸鹽中⑶-N- [ [3- [3-氟-4- (4- (2-吡啶）-1H-吡唑-1-基） 苯基]-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基]-乙酰胺的含量，采用鑰藍分光光度法測定二磷酸鹽中 磷酸根的含量，通過TG/DSC測定制備得到的二磷酸鹽的熔點及結晶水含量。通過C57小鼠 系統感染模型比較二磷酸鹽同裸藥（S)-N-[ [3-[3-氟-4-(4-(2-吡啶）-1Η-吡唑-1-基） 苯基]-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基]-乙酰胺、上市藥物利奈唑胺的治療效果。
[0004]
[0005] 其中 η = 0-4
[0006] 本發明所涉及的兩種（S)-N-[[3-[3-氟-4-(4-(2-吡啶）-1Η-吡唑-1-基）苯 基]-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基]-乙酰胺二磷酸鹽的制備方法 ：
[0007] 方法一為將（3)4-[[3-[3-氟-4-(4-(2-吡啶）-1!1-吡唑-1-基）苯基]-2-氧 代-5-噁唑烷基]甲基]-乙酰胺加入到溶劑中，將體系溫度調整至0°C -30°C，攪拌均勻后， 加入磷酸，攪拌過夜，過濾，用溶劑洗滌，所得固體在0-80°C真空干燥24小時。
[0008] 上述反應中，發明人優選了所需的有機溶劑，選擇溶解性較好的丙酮作為反應溶 劑，并且為三類溶劑，毒性較小。避免了溶解性不好的溶劑在做反應溶劑時對反應轉化率的 影響，避免了毒性較大的溶劑作為反應溶劑時溶劑殘留的問題。
[0009] 進一步的，發明人考察了溶劑為丙酮時，反應溫度對轉化率的影響，確定了反應溫 度在20至30°C區間反應最為快速和經濟。避免了低溫反應時轉化速率慢的問題。
[0010] 進一步的，發明人優選加入磷酸的量為2-6倍當量，最優選的是加入85%含量的 磷酸2-4倍當量。
[0011] 進一步的，發明人優選了過濾時洗滌濾餅的有機溶劑為丙酮，二氯甲烷，乙酸乙 酯，乙醇，甲醇，N，N-二甲基甲酰胺，二甲亞砜，四氫呋喃中的一種或幾種，最優選的為與反 應溶劑一致的有機溶劑，如丙酮。
[0012] 方法二為將（3)4-[[3-[3-氟-4-(4-(2-吡啶）-1!1-吡唑-1-基）苯基]-2-氧 代-5-噁唑烷基]甲基]-乙酰胺加入到水中，將體系溫度調整至0°C -30°C，攪拌均勻后， 加入磷酸，攪拌2小時，加入有機溶劑，攪拌均勻，過濾，用溶劑洗滌，所得固體在0-80°C真 空干燥24小時。
[0013] 上述反應中，發明人優選了水作為溶劑時需用的量為每克裸藥使用10-40mL，最優 選的為20-30mL。
[0014] 進一步的，發明人考察水做溶劑時反應溫度對反應的影響，優選溫度為2°C至 25°C，最優的溫度為5°C至15°C。
[0015] 進一步的，發明人優選加入磷酸的量為2-6倍當量，最優選的是加入85%含量的 磷酸2-4倍當量。
[0016] 進一步的，發明人優選了過濾時洗滌濾餅的有機溶劑為丙酮，二氯甲烷，乙酸乙 酯，乙醇，甲醇，N，N-二甲基甲酰胺，二甲亞砜，四氫呋喃中的一種或幾種，最優選的為與水 混溶的丙酮、乙醇。
[0017] 本發明另一特點是米用了 HPLC法或1H-NMR內標法確定了本制備方法所獲得 的⑶-N- [ [3- [3-氟-4- (4- (2-吡啶）-1H-吡唑-1-基）苯基]-2-氧代-5-噁唑烷 基]甲基]-乙酰胺二磷酸鹽中⑶-N-[ [3-[3-氟-4-(4-(2-吡啶）-1Η-吡唑-1-基）苯 基]-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基]-乙酰胺的效價（含量），采用鑰藍分光光度法直接測定 (S) -N-[ [3-[3-氟-4- (4- (2-吡啶）-1H-吡唑-1-基）苯基]-2-氧代-5-噁唑烷基]甲 基]-乙酰胺二磷酸鹽中中磷酸根的含量。其熔點采用TG/DSC法測定熔點及結晶水含量。 附圖1為實施例二制備得二磷酸鹽的TG/DSC分析圖。由附圖1可知，所測定二磷酸鹽樣品 中不含結晶水，熔點為208. 7°C。
[0018] 本發明的另一個特點是，采用HPLC法或1H-NMR內標法測定 (S) -N-[ [3-[3-氟-4- (4- (2-吡啶）-1H-吡唑-1-基）苯基]-2-氧代-5-噁唑烷基]甲 基]-乙酰胺二磷酸鹽中（S) -N- [ [3- [3-氟-4- (4- (2-吡啶）-1H-吡唑-1-基）苯基]-2-氧 代-5-噁唑烷基]甲基]-乙酰胺的效價為59. 59% -66. 85%。
[0019] 本發明的另一個特點是采用鑰藍分光光度法測定⑶-N- [ [3- [3-氟-4- (4- (2-吡 啶）-1H-吡唑-1-基）苯基]-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基]-乙酰胺二磷酸鹽中磷酸的含 量為 29. 55% -33. 15%。
[0020] 本發明的另一個特點是所制備的二磷酸鹽，通過HPLC標準曲線法，25°C在水中熱 力學溶解度為30-150mg/mL。相比于（S) -N-[ [3-[3-氟-4- (4- (2-吡啶）-1H-吡唑-1-基） 苯基]-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基]-乙酰胺裸藥在水中的溶解度提高100倍以上。
[0021 ] 本發明的另一個特點是所涉及的⑶-N- [ [3- [3-氟-4- (4- (2-吡啶）-1H-吡 唑-1-基）苯基]-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基]-乙酰胺二磷酸鹽在MRSA ATCC33591系 統感染的小鼠模型上的體內抗菌活性，優于（S)-N-[[3-[3-氟-4-(4-(2-吡啶）-1Η-吡 唑-1-基）苯基]-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基]-乙酰胺裸藥和上市藥物利奈唑胺（實施 例9)。體內藥效的提升是因為本發明所制備得的二磷酸鹽具有更好的水溶性的原因。
【具體實施方式】
[0022] 下面將結合實施例詳細描述本發明，該實施例不應解釋為對本發明的限制。
[0023] 實施例1:將58(3)4-[[3-[3-氟-4-(4-(2-吡啶）-1!1-吡唑-1-基）苯基]-2-氧 代-5-噁唑烷基]甲基]-乙酰胺加入到乙醇1L中，室溫（25°C)攪拌均勻后，加入磷酸 2. 7mL，攪拌過夜，過濾，用200mL乙醇洗滌，所得淡黃色固體真空干燥24小時，得到6. 81g， 熔點：201. 2-204. 4°C。通過鑰藍分光光度法直接測定磷酸根含量，通過HPLC或1H-NMR測 定⑶-N-[ [3-[3-氟-4- (4- (2-吡啶）-1H-吡唑-1-基）苯基]-2-氧代-5-噁唑烷基] 甲基]-乙酰胺效價及結晶水含量分析，確定為二磷酸鹽二水合物。
[0024] 實施例2:將58原料藥說4-[[3-[3-氟-4-(4-(2-吡啶）-1!1-吡唑-1-基）苯 基]-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基]-乙酰胺加入到丙酮400mL中，室溫（25°C )攪拌均勻 后，加入磷酸2. 7mL，攪拌過夜，過濾，用200mL丙酮洗滌，所得淡黃色固體真空干燥24小時， 得到7. 14g，熔點：208. 7°C。通過鑰藍分光光度法直接測定磷酸根含量，通過HPLC或1H-NMR 測定⑶-N- [ [3- [3-氟-4- (4- (2-吡啶）-1H-吡唑-1-基）苯基]-2-氧代-5-噁唑烷基] 甲基]-乙酰胺效價及結晶水含量分析，確定為二磷酸鹽，無結晶水。
[0025] 實施例 3 :將 10g(S)-N-[[3-[3-氟-4-(4-(2-吡啶）-1Η-吡唑-1-基）苯 基]-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基]-乙酰胺加入到丙酮800mL中，室溫（25°C )攪拌均勻 后，加入磷酸3. 6mL，攪拌過夜，過濾，用400mL丙酮洗滌，所得淡黃色固體真空干燥24小時， 得到14. lg，熔點：207. 5-208. 2°C。通過鑰藍分光光度法直接測定磷酸根含量，通過HPLC或 i-NMR測定⑶-N-[[3-[3-氟-4-(4-(2-吡啶）-1Η-吡唑-1-基）苯基]-2-氧代-5-噁 唑烷基]甲基]