N-羥基丁二酰亞胺作為發光共反應劑的應用
【技術領域】
[0001]本發明屬于化學發光分析方法技術領域，具體涉及N-羥基丁二酰亞胺作為發光共反應劑的應用。
【背景技術】
[0002]化學發光分析是一種常用的分析檢測方法，具有高靈敏度、線性范圍寬、所用儀器設備簡單、操作方便、分析速度快、背景噪聲小、價廉等優點。已廣泛應用于藥物分析、生物分析檢測、環境監測、食品科學和臨床醫學等諸多領域。
[0003]基于魯米諾的化學發光體系需要氧化劑和激活劑用于化學發光。一些經典的氧化劑如過氧化氫、高錳酸鉀、鐵氰化物、高碘酸鹽以及氧氣等，而經典的激活劑包括過氧化物酶、過氧化氫酶、細胞色素C、血紅蛋白、臭氧分子、過渡金屬離子及其配合物等。
[0004]N-羥基丁二酰亞胺(NHS)由于其反應活性高、親水性好、產量高、易形成肽鍵以及商業可用性等優點在有機和生物有機合成領域被廣泛用作激活劑或保護劑。例如，它可被用作溫和的氧化劑用于輔助氧化反應、活化反應劑選擇性還原以及作為Passerini反應的添加劑加速反應等。(B1sens B1electron ,2014,61,45-50; Chem Rev, 2004,104,3003-3036；Chem Soc Rev，2015，44，3117-3142.;Anal Chem，2014，86，3484-3492.;ChemCommun，2015，51，1620_1623;Phys.Chem.，1928，136，321_330;J Am Chem Soc,1964,86,1839-1842；J Am Chem Socj1963,85,3039-3039；J Am Chem Soc，2006，128,4936-4937.)
[0005]自1928年Albrecht報道魯米諾的發光性質后，關于魯米諾的研究受到廣泛關注。魯米諾-H2O2體系的化學發光反應能夠被多種底物如金屬離子、金屬復合物以及過氧化物酶等催化，因此該發光體系已被廣泛應用于各種分析應用中。然而，多種金屬離子及其復合物能夠與H2O2發生反應導致了魯米諾-H2O2體系的穩定性和選擇性較差。因此，發展穩定性好、選擇性高的魯米諾化學發光的高效共反應劑仍是解決問題的關鍵，它能克服這些限制，并拓寬魯米諾化學發光的應用。
【發明內容】
[0006]本發明提供一種N-羥基丁二酰亞胺作為發光共反應劑的應用，該N-羥基丁二酰亞胺作為發光共反應劑用于Co2+，魯米諾和NHS的分析檢測。
[0007]本發明提供一種N-輕基丁二酰亞胺作為發光共反應劑的應用。
[0008]優選的是，所述的N-輕基丁二酰亞胺作為發光共反應劑用于檢測NHS。
[0009]優選的是，所述的檢測NHS的方法為:在第一樣品流通管路和第二樣品流通管路分別進樣魯米諾的碳酸氫鈉-碳酸鈉緩沖溶液和樣品基底二次水，打開IFIS-C模式智能流動注射蠕動栗，再向進樣閥中加入NHS水溶液，化學發光檢測儀記錄發光強度信號，發光強度與NHS濃度呈線性關系，實現NHS的檢測。
[0010]優選的是，所述的NHS水溶液的濃度為10-10000μΜ。
[0011]優選的是，所述的N-輕基丁二酰亞胺作為發光共反應劑用于檢測魯米諾。
[0012]優選的是，所述的檢測魯米諾的方法為:在第一樣品流通管路和第二樣品流通管路分別進樣NHS水溶液和碳酸氫鈉-碳酸鈉緩沖溶液，打開IFIS-C模式智能流動注射蠕動栗，再向進樣閥中加入魯米諾溶液，化學發光檢測儀記錄發光強度信號，發光強度與魯米諾濃度呈線性關系，實現魯米諾的檢測。
[0013]優選的是，所述的魯米諾溶液的濃度為0.01-20000nM。
[0014]優選的是，所述的N-輕基丁二酰亞胺作為發光共反應劑用于檢測Co2+。
[0015]優選的是，所述的檢測Co2+的方法為:在第一樣品流通管路和第二樣品流通管路分別進樣魯米諾的碳酸氫鈉-碳酸鈉緩沖溶液和樣品基底二次水，打開IFIS-C模式智能流動注射蠕動栗，再向進樣閥中加入NHS溶液和Co2+溶液的混合液，化學發光檢測儀記錄發光強度信號，發光強度與Co2+濃度呈線性關系，實現Co2+的檢測。
[0016]優選的是，所述的混合溶液中Co2+的濃度為0.1-5000ηΜ。
[0017]本發明的有益效果
[0018]本發明提供一種N-羥基丁二酰亞胺作為發光共反應劑的應用，該N-羥基丁二酰亞胺作為發光共反應劑可用于檢測Co2+，魯米諾和NHS。和現有技術相對比，本發明的檢測方法靈敏度高、操作簡單、分析速度快。實驗結果表明:本發明的NHS作為一種新的高效的魯米諾化學發光共反應劑，能夠產生比魯米諾-H2O2化學發光體系強約22倍的化學發光信號，且該魯米諾-NHS化學發光體系在Co2+存在下能夠選擇性地增強發光，因此可被應用于高效選擇性地檢測Co2+、魯米諾和NHS。
【附圖說明】
[0019]圖1為本發明流動注射-化學發光分析裝置的示意圖；
[0020]圖2為本發明實施例1-3發光強度與NHS濃度的線形關系曲線圖；
[0021 ]圖3為本發明實施例4-6發光強度與魯米諾濃度的線形關系曲線圖；
[0022]圖4為本發明實施例7-9發光強度與Co2+濃度的線形關系曲線圖。
【具體實施方式】
[0023]本發明提供一種N-輕基丁二酰亞胺作為發光共反應劑的應用。
[0024]按照本發明，所述的N-羥基丁二酰亞胺作為發光共反應劑用于檢測NHS、魯米諾和Co2+。優選采用流動注射-化學發光分析方法對NHS、魯米諾和Co2+進行檢測，如圖1所示，圖1為本發明流動注射-化學發光分析裝置的示意圖。
[0025]按照本發明，所述的檢測NHS的方法優選為:在第一樣品流通管路A和第二樣品流通管路B分別進樣魯米諾的碳酸氫鈉-碳酸鈉緩沖溶液和樣品基底二次水，所述的第一樣品流通管路A和第二樣品流通管路B進樣速度相同，優選為l-2mL/min，打開IFIS-C模式智能流動注射蠕動栗C，再向進樣閥D中加入NHS溶液，化學發光檢測儀E記錄發光強度信號，發光強度與NHS濃度呈線性關系，實現NHS的檢測，檢測完成后，廢液用廢液池F回收。所述的樣品基底二次水為二次水，所述的魯米諾的碳酸氫鈉-碳酸鈉緩沖溶液中，魯米諾的濃度優選為10-100μΜ，碳酸氫鈉-碳酸鈉的濃度優選為0.10Μ，ρΗ值優選為8.5-13.5;所述的NHS溶液的濃度優選為10-1 ΟΟΟΟμΜ，更優選為10_5000μΜ。
[0026]按照本發明，所述的檢測魯米諾的方法優選為:在第一樣品流通管路和第二樣品流通管路分別進樣NHS水溶液和碳酸氫鈉-碳酸鈉緩沖溶液，所述的第一樣品流通管路A和第二樣品流通管路B進樣速度相同，優選為l-2mL/min，打開IFIS-C模式智能流動注射蠕動栗，再向進樣閥中加入魯米諾溶液，化學發光檢測儀記錄發光強度信號，發光強度與魯米諾濃度呈線性關系，實現魯米諾的檢測。所述的NHS水溶液的濃度優選為5-20mM，碳酸氫鈉-碳酸鈉緩沖溶液的濃度優選為0.10M，pH值優選為8.5-13.5 ；所述的魯米諾溶液的濃度優選為
0.01-20000nM，更優選為 0.0l-lOOOOnM。
[0027]按照本發明，所述的檢測Co2+的方法優選為:在第一樣品流通管路和第二樣品流通管路分別進樣魯米諾的碳酸氫鈉-碳酸鈉緩沖溶液和樣品基底二次水，所述的第一樣品流通管路A和第二樣品流通管路B進樣速度相同，優選為l-2mL/min，打開IFIS-C模式智能流動注射蠕動栗，再向進樣閥中加入NHS溶液和Co2+溶液混合液，化學發光檢測儀記錄發光強度信號，發光強度與Co2+濃度呈線性關系，實現Co2+的檢測。所述的魯米諾的碳酸氫鈉-碳酸鈉緩沖溶液中，魯米諾的濃度優選為10-100μΜ，碳酸氫鈉-碳酸鈉的濃度優選為0.10Μ，ρΗ值優選為8.5-13.5;所述的混合液中Co2+溶液的濃度優選為0.1-5000ηΜ，更優選為0.1_3000ηΜ，混合液中NHS的濃度為I _5mM。
[0028]下面結合具體實施例對本發明做進一步詳細的描述。
[0029]實施例1 NHS的檢測
[0030]在第一樣品流通管路A和第二樣品流通管路B分別以1.25mL/min的流速進樣10μΜ魯米諾的碳酸氫鈉-碳酸鈉緩沖