哌嗪化合物的納米顆粒組合物和制劑的制作方法
【技術領域】
[0001] 本發明設及其中活性劑為贓嗦化合物的納米顆粒組合物和包含所述納米顆粒組 合物的藥物組合物。更具體地，本發明為包含1-(3,5-二甲氧基苯基)-4-[(6-氣-2-甲氧基 哇喔嘟-3-基)氨基幾基]贓嗦的納米顆粒組合物。所述組合物和制劑可用于治療和預防增 殖性疾病，包括癌癥。
【背景技術】
[0002] 在美國專利No.8，314,100中描述了 1-(3,5-二甲氧基苯基)-4-[ (6-氣-2-甲氧基 哇喔嘟-3-基)氨基幾基]贓嗦和相關化合物及衍生物，其通過引用整體并入本文。運樣的化 合物已顯示出具有顯著的抗腫瘤活性，但在水中的溶解性非常差。
[0003] 在例如均關于"Method of Grinding Pharmaceutical Substances"的美國專利 No.5,518,187和No.5,862,999、關于"Continuous Method of Grinding Pharmaceutical Substances"的美國專利No.5,718,388、W及關于"Process of Preparing Therapeutic Compositions Confining 化nopa;rticles"的美國專利No.5,510,118中描述了制備納米 微粒組合物的方法。
[0004] 發明概述
[0005] 本發明設及作為活性劑的贓嗦化合物和至少一種表面穩定劑的納米顆粒組合物， 所述贓嗦化合物例如1-(3,5-二甲氧基苯基)-4-[(6-氣-2-甲氧基哇喔嘟-3-基)氨基幾基] 贓嗦或如本文中別處所述的相關化合物及衍生物。
[0006] 本發明還設及制備本發明的納米顆粒組合物的方法。運樣的方法包括在足W提供 納米顆粒組合物的條件下使贓嗦化合物的顆粒大小減小一定時間W及使該化合物與至少 一種表面穩定劑接觸。一種或更多種表面穩定劑可W與所述贓嗦在贓嗦顆粒大小減小之 前、期間或者之后接觸。
[0007] 本發明還設及本發明納米顆粒組合物和可藥用載體W及任何可藥用賦形劑的藥 物組合物。
[000引本發明還設及使用本發明藥物組合物來治療病癥的方法，所述病癥例如增殖性疾 病或者與持續血管發生相關或由其觸發的疾病。
[0009] 在一些特定的實施方案中，本發明為穩定的組合物，其包含：
[0010] (a)式(1)化合物或其可藥用鹽的納米顆粒，
[0011]
[0012] 其中
[oou] X和Y獨立地為N或c-r7;
[0014] 對于變量Ri和R2的組合：
[001引r1為氨、Ci-C3烷氧基、Ci-C3烷基或面素并且護為F;或者
[0016] R1為F并且R2為氨、&-C3烷氧基、&-C3烷基或面素；
[0017] 護為C廣C3烷基;并且
[001引 R4、R日、R6和護獨立地為Η、C廣C6烷氧基、打-C6烷基、C廣C6
[0019] 面代烷基、C1-C6烷基幾基、氯基、硝基或面素;和
[0020] (b)至少一種表面穩定劑，其中所述納米顆粒的有效中值顆粒大小（effective median particle size，D50)小于約 1,000nm。式（1)化合物可W是1-(3,5-二甲氧基苯基)-4-[(6-氣-2-甲氧基哇喔嘟-3-基)氨基幾基]贓嗦。所述至少一種表面穩定劑可W是至少一 種聚環氧燒，例如聚環氧乙燒與聚環氧丙烷的嵌段共聚物。在一些實施方案中，所述至少一 種表面穩定劑為泊洛沙姆(poloxamer)，例如泊洛沙姆407或泊洛沙姆338。在一些實施方案 中，所述組合物為液體混懸液的形式。在另一些實施方案中，所述組合物為干燥固體的形 式。在一些實施方案中，所述組合物在儲存至少四周之后是穩定的。在另一些實施方案中， 特別是W粉末形式的那些，所述組合物在儲存至少6個月之后是穩定的。在一些實施方案 中，所述有效中值顆粒大小小于約500nm。在所述組合物中式（1)化合物與表面穩定劑的比 例(wt/wt)可W是約100:1至約5:1。
[0021] 在另一個方面中，本發明為通過如下來制備如上所述組合物的方法:制備式（1)化 合物或其可藥用鹽(例如，1-(3,5-二甲氧基苯基)-4-[(6-氣-2-甲氧基哇喔嘟-3-基)氨基 幾基]贓嗦）的顆粒和(b)至少一種表面穩定劑的混合物，并且在足W提供有效中值顆粒大 小小于約l，〇〇〇nm的納米顆粒混懸液的條件下減小式（1)化合物的顆粒大小，W形成穩定的 組合物。所述方法還可包括對納米顆粒混懸液進行干燥W形成粉末的步驟，例如通過對凍 結的混懸液進行凍干。所述方法還可W在所述混合物中包含水。所述混合物可W包含約5% 至約50%的式（1)化合物和約0.1%至約5%的表面穩定劑，或者通常為固體形式的約75% 至約90%的式（1)化合物和約10%至約25%的表面穩定劑。式（1)化合物與表面穩定劑的比 例可W是約100:1至約5:1。可W通過研磨、均質化或沉淀來實現減小顆粒的大小，例如通過 濕研磨。研磨可W是任何適合于提供期望大小的時間量，例如為約600分鐘或約360分鐘或 其間的任何時間段。在減小所述顆粒的大小之后可W用溶劑(例如水)來稀釋所述混懸液。 也可W在減小所述顆粒的大小之后將泊洛沙姆溶液添加到所述混合物中。
[0022] 在另一個方面中，本發明為包含如上所述的納米顆粒組合物和至少一種可藥用賦 形劑的藥物組合物。所述至少一種可藥用賦形劑可W是例如水或徑丙基甲基纖維素。所述 組合物可W是經口劑型或腸胃外劑型，并且可W包含例如約O.Olmg至約250mg的式（1)化合 物，并且可W包含例如約0.001 %至約99.5 %的式（1)化合物。
[0023] 本發明還包括通過向有此需要的動物施用如上所述的組合物或藥物組合物來治 療腫瘤的方法。
[0024] 進一步的目標和優點W及優選實施方案的結構和功能將通過對說明書、附圖和實 施例的考慮而變得明顯。
[00巧]附圖詳述
[0026] 圖1:在400倍放大率下的1-(3，5-二甲氧基苯基)-4-[ (6-氣-2-甲氧基哇喔嘟-3-基)氨基幾基]贓嗦。
[0027] 圖2:在偏振光、400倍放大率下的1-(3,5-二甲氧基苯基)-4-[(6-氣-2-甲氧基哇 喔口林-3-基)氨基幾基]贓嗦。
[002引圖3:1-(3,5-二甲氧基苯基)-4-[(6-氣-2-甲氧基哇喔嘟-3-基)氨基幾基]贓嗦的 熱重分析。
[0029] 圖4:1-(3,5-二甲氧基苯基)-4-[(6-氣-2-甲氧基哇喔嘟-3-基)氨基幾基]贓嗦的 差示掃描量熱法熱圖。
[0030] 發明詳述
[0031] W下詳細討論了本發明的實施方案。在描述一些實施方案時，為了清楚起見采用 了特定的術語。然而，本發明并不旨在限于如此選擇的特定術語。雖然對一些具體的示例性 實施方案進行了討論，但是應當理解，運樣做僅是為了舉例說明的目的。相關領域技術人員 將認識到，在不脫離本發明的精神和范圍的情況下可W使用其他組分和配置。本文中引用 的所有參考文獻通都過引用并入，如同每個已單獨地并入。
[0032] 式(1)的贓嗦化合物已表現出可用于治療過度增殖性疾病，
[0033]
[0034] 其中
[0035] X和Y獨立地為N或C-R7;
[0036] 對于變量r1和R2的組合：
[0037] Ri為氨、C1-C3烷氧基、打-C3烷基或面素并且R2為F;或者 [003引 Ri為F并且R2為氨、&-C3烷氧基、C1-C3烷基或面素；
[0039] R3為C廣C3烷基；并且
[0040] r4、R日、r6和護獨立地為Η、。-〔6烷氧基、C廣C6烷基、C廣C6面代烷基、C廣C6烷基幾基、 氯基、硝基或面素；
[0041] 例如，運樣的化合物可用于治療腫瘤，特別是腫瘤(或癌癥和/或任何轉移）。可使 用式（1)化合物治療的腫瘤包括W下腫瘤：乳腺癌、肺癌、胃腸癌（包括食管癌、胃癌、小腸 癌、大腸癌和直腸癌）、膠質瘤、肉瘤（例如設及骨、軟骨、軟組織、肌肉、血管和淋己管的那 些）、卵巢癌、骨髓瘤、淋己瘤、白血病、子宮頸癌、子宮內膜癌、頭頸癌、間皮瘤、腎癌、輸尿管 癌、膀脫癌和尿道癌、結腸癌、結腸直腸癌、肝癌、膜腺癌、前列腺癌、皮膚癌和黑素瘤。使用 式（1)化合物的有效治療需要可將所述化合物遞送至腫瘤的組合物。已經在體外針對癌細 胞系對本發明的化合物進行了測試，并且所述化合物在癌細胞生長的抑制中表現出活性。 例如，美國專利No.8,314,100描述了本發明的化合物對W下的活性:來自美國典型培養物 保藏中屯、（American Type Culture Collection,ATCC)(Manassas，VA)的人0VCAR-3(卵 巢）、MCF-7 (乳腺，激素依賴性）、MDA-MB-231 (乳腺）、PC3(前列腺）、Η邱G2 (肝）、A549(肺）、 Caki-1 (腎）、HT-29 (結腸）、肥T116 (結腸)和PANC-1 (膜腺）；來自 DSMZ (德國）的MKN-45 (胃）； 來自美國國家癌癥研究所(Bethesda，MD)的UMRC2(腎）；來自韓國細胞系庫(Seoul，韓國）的 Huvec(人廝靜脈內皮細胞）、HEK293(人胚腎）和SK-0V-3(卵巢）。
[0042] 式（1)化合物的一個實例是1-(3,5-二甲氧基苯基)-4-[(6-氣-2-甲氧基哇喔嘟-3-基)氨基幾基]贓嗦(化合物A):
[0043]
[0044] 化合物A在水中的溶解性非常差，小于0.化g/mL。在水中的溶解性差使得式（1)化 合物及相關化合物難W遞送并且限制了臨床開發，因而產生了用于開發適用于臨床使用之 制劑的需要。本發明W獲得適當的制劑(可在約lOOmg/mL的濃度下提供所述化合物的穩定 混懸液)或者干燥制劑(可W經口遞送或用于制備穩定混懸液)為目標進行了開發。盡管本 發明主要針對1-(3,5-二甲氧基苯基)-4-[(6-氣-2-甲氧基哇喔嘟-3-基)氨基幾基]贓嗦進 行了描述和示例，但應當理解，本發明也適用于其他式(1)化合物。
[0045] 為了提高生物利用度，本發明制劑W獲得所述贓嗦化合物在混懸液中的亞微米顆 粒大小分布為構思進行了開發，使用了通常認為是安全的(GRAS)最小量的賦形劑W減少在 研究期間潛在的毒性干擾。原型制劑的測試制品將通過在最佳清潔條件下的放大過程來制 成。此外，剩余的混懸液旨在用作未來工作(開發例如1-(3,5-二甲氧基苯基)-4-[(6-氣-2-甲氧基哇喔嘟-3-基)氨基幾基]贓嗦的固體劑型制劑)的基礎。
[0046] 本文中使用的"活性劑"、"藥物"、"活性藥物成分（Active Pharmaceutical Ingredient r或者"API"是指式（1)化合物，
[0047]
[004引 其中
[0049] X和Y獨立地為N或C-R7;
[(K)加]對于變量r1和R2的組合：
[00引]Ri為氨、C1-C3烷氧基、打-C3烷基或面素并且R2為F;或者 [0052] Ri為F并且R2為氨、&-C3烷氧基、C1-C3烷基或面素；
[00對 R3為C廣C3烷基；并且
[0化4]