一種黃曲霉毒素分子印跡材料及其制備方法
【技術領域】
[0001] 本發明屬于高分子材料技術領域，尤其是涉及一種富集痕量黃曲霉毒素(B^Bh Gi、G2)的分子印跡材料及其制備方法。
【背景技術】
[0002] 黃曲霉毒素(AFT)是一組化學結構類似的化合物，目前已分離鑒定出12種，主要分 子型式含出、82、61、62屬爲等。黃曲霉毒素被世界衛生組織(1!10)的癌癥研究機構劃定為1 類致癌物，是一種毒性極強的劇毒物質。黃曲霉毒素存在于土壤、動植物、各種堅果，特別是 花生和核桃中。在大豆、稻谷、玉米、通心粉、調味品、牛奶、奶制品、食用油等制品中也經常 發現黃曲霉毒素。
[0003] 隨著人們對食品安全關注度的快速上升，毒素的快速檢測已成為國內外研究的發 展趨勢。但是薄膜層析法、液相色譜法、金標試紙法和免疫親和柱法具有檢測周期長，程序 復雜所需試劑繁多，檢測費用過高等缺點，已遠遠不能滿足現代檢測要求。隨著分子印跡技 術的發展和真菌毒素檢測要求的不斷提高，分子印跡技術在真菌毒素檢測中的應用越來越 廣泛。將分子印跡聚合物填充于固相萃取小柱中，可用于樣品的分離、純化和濃縮，與抗體 相比，分子印跡聚合物制備步驟簡單、穩定性好、使用壽命長。但目前由于沒有合適的對黃 曲霉毒素具有很強識別功能的分子印記材料，所以還沒有廣泛使用分子印跡方法檢測黃曲 霉毒素。
【發明內容】
[0004] 有鑒于此，本發明創造旨在提出一種對黃曲霉毒素(1?1、132、61、62)具有尚選擇性的 分子印跡材料。
[0005] 本發明利用功能單體負載型離子液體為載體，表面溶膠-凝膠方法合成出一種用 于選擇性富集痕量黃曲霉毒素(B^Bs 的吸附材料。該材料可用作固相萃取材料，可 克服環境樣品體系復雜的預處理過程，為樣品的富集和分離提供很大的方便，與免疫親和 柱相比，成本也低。在食品領域的痕量分析中起重要作用，具有可適用性。
[0006]為達到上述目的，本發明創造的技術方案是這樣實現的：
[0007]采用功能單體負載型離子液體作為載體，合成了一種黃曲霉毒素 子印跡材料。
[0008]本發明的分子印跡材料對黃曲霉毒素(Βι、B2、Gi、G2)有很強的識別功能。
[0009] 本發明還公開了這種分子印跡材料的制備方法：
[0010] -種黃曲霉毒素分子印跡材料的制備方法，包括如下步驟：
[0011] (1)將黃曲霉毒素的結構類似物DMC作為模板分子加入到DMF溶液中，攪拌使其充 分溶解，加入功能單體負載型離子液體，攪拌30min，再加入四乙氧基硅烷和催化劑，40°C水 浴孵化24h;
[0012] (2)將步驟(1)所得產物先用DMF淋洗，再用甲醇淋洗除去未反應物，50°C真空干燥 老化8h;將老化后的反應產物放于索氏萃取器中，洗去模板分子;50°C真空干燥，得到對黃 曲霉毒素具有高選擇性的分子印跡材料。
[0013]進一步，步驟（1)中DMC與負載型離子液體的質量比為0.5-1:1;四乙氧基硅烷與催 化劑的體積比為5-6:1。
[0014]進一步，步驟(1)所述催化劑是氨水。
[0015]進一步，步驟(2)中洗去模板分子是使用體積比為8-10:1甲醇和冰乙酸混合溶液 索氏提取48h后，再用甲醇索氏提取12h，直至萃取液中無 DMC檢出為止。得到本發明的分子 印跡聚合物(MIP)。
[0016]以功能單體負載型離子液體為支持體，合成對黃曲霉毒素具有高選擇性的分子印 跡材料;所使用的功能單體負載型離子液體是核心為咪唑環的一類物質，的結構式為：
[0018]按照上述方法，但不加模板分子DMC，制備本發明對應的非印跡聚合物(NIP)。
[0019 ]本發明黃曲霉毒素分子印跡材料，用于食品中黃曲霉毒素的快速檢測。
[0020] 相對于現有技術，本發明創造所述的黃曲霉毒素分子印跡材料的制備方法及應用 在黃曲霉毒素檢測中具有以下優勢：
[0021] 本發明利用表面溶膠-凝膠方法合成的分子印跡材料，具有傳質速度快，比表面積 大，顆粒粒徑均一的優點。該材料可以快速吸附黃曲霉毒素，對目標物具有強的選擇性;該 材料用化學方法制備，具有較好的穩定性，較長的使用壽命。本發明成本低廉，實驗操作簡 單，反應條件容易控制，制得的黃曲霉毒素分子印跡聚合物作為固相萃取的填料與液相色 譜聯用，適用于食品中痕量黃曲霉毒素的分離與富集。與商品化的免疫親和柱相比，該材料 具有制備方便，選擇性高，成本低的優點。
【附圖說明】
[0022]構成本發明創造的一部分的附圖用來提供對本發明創造的進一步理解，本發明創 造的示意性實施例及其說明用于解釋本發明創造，并不構成對本發明創造的不當限定。
【附圖說明】
[0023]
[0024]圖1分子印跡聚合物和非印跡聚合物動力學實驗；
[0025]圖2赭曲霉毒素六(01六)為黃曲霉毒素(131、132、61、62)的競爭物，研究該分子印跡材 料的選擇性能。
【具體實施方式】
[0026]為了使本發明上述特征和優點更加清楚和容易理解，下面將結合附圖對本發明的 實施方式作進一步詳細描述。
[0027]下述實施例中所述負載型離子液體為自己合成，其他(DMC、黃曲霉毒素 G2)、四乙氧基硅烷、氨水、DMF、甲醇、冰乙酸)均為市售，使用前未經任何處理。
[0028] 實施例1
[0029 ] -種黃曲霉毒素(Βι、B2、Gi、G2)分子印跡材料的制備：
[0030] (1)將0.6mmol DMC加入到1.7ml DMF中，攪拌15min至完全溶解，加入100mg負載型 離子液體，繼續攪拌30min，隨后加入9mmol四乙氧基硅烷，攪拌反應30min，再加入0.4ml氨 水(3. Omol/L)，攪拌反應20min，40°C水浴孵化24h;
[0031] (2)抽濾，先用DMF淋洗，再用甲醇進