一種高含量豬去氧膽酸精制的方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及生物化工領域，尤其涉及一種粗品豬去氧膽酸的精制，通過除雜、酸 化、脫色結(jié)晶得到高含量豬去氧膽酸的方法。
【背景技術】
[0002] 豬去氧膽酸（HyodesoxycholicAcid，HDCA)又稱異去氧膽酸，a-豬去氧膽酸，分 子量為392. 58,可以從豬膽汁中提取得到。豬去氧膽酸為降血脂藥，能抑制膽酸的形成及 溶解脂肪，降低血中膽固醇和甘油三酯，適用于Ia或Ib型高血脂癥、動脈粥樣硬化癥。對 百日咳桿菌、白喉桿菌、金黃色葡萄球菌等有一定的抑菌作用。它能刺激膽汁分泌，使膽汁 稀釋而不增加固含量，適用于膽道炎、膽囊炎、膽石癥和其它非阻塞性膽汁郁積，尚能促進 腸道脂肪分解和脂溶性維生素吸收，可用于肝膽疾患引起的消化不良。臨床上還作為中藥 清開靈注射劑、清開靈滴丸的有效成分，是人工牛黃配方的重要原料。
[0003] 目前，《中國藥典》載入的豬去氧膽酸的含量大于90%，是采用酸堿滴定法測定的。 市售豬去氧膽酸標示的含量為98%，熔點170-190°C，然而，通過薄層色譜分析表明，其中 含有較多量的雜質(zhì)，通過高效液相色譜進一步分析，發(fā)現(xiàn)除了豬去氧膽酸外，雜質(zhì)含量約占 10-25%左右。
[0004] 中國專利公開號CN101037463A (公開日2007-09-19)利用不同膽汁酸甲酯-苯 加成物在苯中的不同溶解度，將HDCA轉(zhuǎn)化為豬去氧膽酸甲酯-苯加成物后堿分解，調(diào) 節(jié)pH，沉淀，得HDCA純品（熔點為197-198.2°C，純度>99%);CN102617689A(公開日 2012-08-01)將HDCA粗品用氨水溶解過濾去除不溶性雜質(zhì)，乙酸乙酯除去脂溶性物質(zhì)，酸 化，析晶，過濾，水洗，干燥得HDCA純品（純度彡99. 8%，熔點> 197. 5°C ) ;CN102775459A (公開日2012-11-14)將HDCA粗品經(jīng)甲酯化、柱層析分離、堿水解后，加入無水乙醇或乙酸 中，在機械攪拌條件下加熱至有機溶劑水溶液完全沸騰，待HDCA溶解后，分次加入水，繼續(xù) 攪拌，待溫度降至10~20°C，再機械攪拌30~60min，進行抽濾，得晶體，真空干燥，得HDCA 純品（純度>99%)。CN102838647A (公開日2012-12-26)將粗HDCA轉(zhuǎn)化為粗豬去氧膽酸 鎂后，酸化、結(jié)晶，獲得HDCA純品（純度>99%，熔點199-200°C);上述四種方法均需要將 HDCA進行化學預處理，工藝步驟繁瑣、不易操作、生產(chǎn)周期長，其中使用的苯為致癌物質(zhì)。 CN102863497A (公開日2013-01-09)將HDCA粗品加入5~10倍重量的甲醇、乙醇、乙二 醇、N，N-二甲基甲酰胺、冰醋酸或異丙醇，加熱回流1~2小時，待其全部溶解后降至15~ 25°C，向其中滴加水，直至出現(xiàn)混濁物，停止滴加，繼續(xù)攪拌1小時，過濾后，再加入5~10 倍重量的甲醇、乙醇、乙二醇、N，N-二甲基甲酰胺、冰醋酸或異丙醇，加熱回流1~2小時， 待其全部溶解后降至15~25°C，向其中滴加水，直至出現(xiàn)混濁物，立即停止滴加，繼續(xù)攪 拌1小時，過濾干燥即得HDCA純品（純度> 98%)。由于甲醇、乙醇、乙二醇、異丙醇、N，N-二甲基甲酰胺對HDCA的溶解度太大，加入水以降低溶解度進行析晶，這是一種很常規(guī)的析 晶方法，且由于本品的性質(zhì)，加水后并未析出晶體而只是混濁，再進行過濾，不利于大生產(chǎn)。 另外，采用重結(jié)晶工藝處理，產(chǎn)品的收率將會大大降低。
[0005]針對目前，現(xiàn)有的高含量豬去氧膽酸精制的方法中存在的問題，本發(fā)明的目的是 提供一種工藝簡單，生產(chǎn)成本低，操作簡單，產(chǎn)品質(zhì)量好，純度高，收率高，本發(fā)明通過除雜、 酸化、脫色結(jié)晶對粗品豬去氧膽酸進行提純。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0006]本發(fā)明的目的是為了解決上述豬去氧膽酸精制方法的不足，提供一種通過粗品除 雜、酸化、脫色結(jié)晶對粗品豬去氧膽酸進行提純，該方法具有純度高，收率高，有機溶劑用量 少的特點。
[0007] 為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取的技術方案是： 一種高含量豬去氧膽酸精制的方法，其特征在于：它是按以下步驟制備1、將粗品溶解 在水中，加澄清劑，保溫反應，降溫過濾，收集濾液；2、濾液酸化，過濾，收集濾餅；3、向濾餅 中加乙酸乙酯和活性炭，加熱回流，降溫過濾，收集濾液，濃縮，結(jié)晶，干燥即得高含量豬去 氧膽酸。
[0008]所述的一種高含量豬去氧膽酸精制的方法，其特征是：取粗品豬去氧膽酸，加5~ 8倍量的水、加氫氧化鈉調(diào)pH8. 5~10. 5,加熱至完全溶解，再加0. 5%~1. 0%的澄清劑， 80~90°C保溫反應2~4h，降至常溫，過濾，收集濾液。
[0009]所述的一種高含量豬去氧膽酸精制的方法，其特征是：向上述濾液中加入5%_10% 的稀鹽酸進行酸化，酸化至PH2-3,過濾，收集濾餅。
[0010] 所述的一種高含量豬去氧膽酸精制的方法，其特征是：向上述濾餅中加入6~8倍 量的乙酸乙酯，0. 5%-1. 0%的活性炭，加熱回流2~4h，趁熱過濾，濾液濃縮至原質(zhì)量的一半 停止?jié)饪s，放出冷卻降溫結(jié)晶，離心即得精品豬去氧膽酸。
[0011] 所述的一種高含量豬去氧膽酸精制的方法，其特征是：將精品放入鼓風干燥箱內(nèi)， 60~70°C干燥2h，100~IKTC干燥4h，即得成品高含量豬去氧膽酸。
[0012] 所述的一種高含量豬去氧膽酸的精制的方法，其特征是：粗品豬去氧膽酸中豬去 氧膽酸含量為70%以上。
[0013]本發(fā)明的有益效果在于：1、純度高95%~99% (傳統(tǒng)方法70%~95%)，2、熔點高 198~202°C (傳統(tǒng)方法熔點190~197°C)，3、收率高彡95%以豬去氧膽酸記(傳統(tǒng)方法 < 85%) 4、產(chǎn)品外觀為白色或類白色的結(jié)晶(傳統(tǒng)方法淡黃色或黃色的結(jié)晶性粉末)。
【具體實施方式】
[0014] 實施例1 實驗室小試，稱取粗品豬去氧膽酸150g，熔點172~184°C，高效液相色譜儀檢測含量 75. 5%，加750g的水、加氫氧化鈉調(diào)pH8. 5,加熱至完全溶解，再加0. 75g的澄清劑，80°C保 溫反應2h，降至常溫，過濾，收集濾液，向濾液中加入5%的稀鹽酸進行酸化，酸化至pH2,過 濾，收集濾餅濕品172g，向濾餅中加入1032g的乙酸乙酯，0. 86g的活性炭，加熱回流2h，趁 熱過濾，濾液濃縮至原質(zhì)量的一半停止?jié)饪s，放出冷卻降溫結(jié)晶，離心并用75g的乙酸乙酯 洗晶，即得精品豬去氧膽酸132. 6g，放入鼓風干燥箱內(nèi)，60°C干燥2h，KKTC干燥4h，即得成 品高含量豬去氧膽酸112. 7g，理化檢測結(jié)果熔點198~200°C，高效液相色譜儀檢測含量 95. 6%，收率 95. I %。
[0015] 實施例2 實驗室小試，稱取粗品豬去氧膽酸150g，熔點182~189°C，高效液相色譜儀檢測含量 82. 8%，加750g的水、加氫氧化鈉調(diào)pH8. 5,加熱至完全溶解，再加0. 75g的澄清劑，80°C保溫 反應2h，降至常溫，過濾，收集濾液，向上述濾液中加入5%的稀鹽酸進行酸化，酸化至pH2， 過濾，收集濾餅186g，向上述濾餅中加入1116g的乙酸乙酯，0. 93g的活性炭，加熱回流2h， 趁熱過濾，濾液濃縮至原質(zhì)量的一半停止?jié)饪s，放出冷卻降溫結(jié)晶，離心即得精品豬去氧膽 酸142. 4g，將精品放入鼓風干燥箱內(nèi)，60°C干燥2h，100°C干燥4h，即得成品高含量豬去氧 膽酸121. lg，理化檢測結(jié)果熔點199~201°C，高效液相色譜儀檢測含量97. 6%，收率95. 1 % O
[0016] 實施例3 實驗室小試，稱取粗品豬去氧膽酸150g，熔點183~192°C，高效液相色譜儀檢測含量 90. 2%，加750g的水、加氫氧化鈉調(diào)pH8. 5,加熱至完全溶解，再加0. 75g的澄清劑，80°C保 溫反應2h，降至常溫，過濾，收集濾液，向上述濾液中加入5%的稀鹽酸進行酸化，酸化至 pH2,過濾，收集濾餅188. 3g，向上述濾餅中加入1130g的乙酸乙酯，0. 95g的活性炭，加熱回 流2h，趁熱過濾，濾液濃縮至原質(zhì)量的一半停止?jié)饪s，放出冷卻降溫結(jié)晶，離心即得精品豬 去氧膽酸153. 2g，將精品放入鼓風干燥箱內(nèi)，60°C干燥2h，IKTC干燥4h，即得成品高含量 豬去氧膽酸130. 2,理化檢測結(jié)果熔點200~201°C，高效液相色譜儀檢測含量98. 8%，收率 95. 1 %〇
[0017] 實施例4 實驗室小試，稱取粗品豬去氧膽酸150g，熔點172~184°C，高效液相色譜儀檢測含量 75. 5%，加1200g的水、加氫氧化鈉調(diào)pH10. 5,加熱至完全溶解，再加I. 5g的澄清劑，90°C保 溫反應4h，降至常溫，過濾，收集濾液，向上述濾液中加入10%的稀鹽酸進行酸化，酸化至 pH3,過濾，收集濾餅178. 2g，向上述濾餅中加入1425g的乙酸乙酯，I. 78g的活性炭，加熱回 流4h，趁熱過濾，濾液濃縮至原質(zhì)量的一半停止?jié)饪s，放出冷卻降溫結(jié)晶，離心即得精品豬 去氧膽酸130. 2g，將精品放入鼓風干燥箱內(nèi)，70°C干燥2h，KKTC干燥4h，即得成品高含量 豬去氧膽酸111. 3g，理化檢測結(jié)果熔點199~200°C，高效液相色譜儀檢測含量96. 8%，收率 95. 1 %〇
[0018] 實施例5 實驗室小試，稱取粗品