一種醋酸曲普瑞林緩釋微球的制備方法
【技術領域】
[0001]本發明屬于醫藥領域，具體而言，本發明涉及醋酸曲普瑞林緩釋微球制備方法及由其制備的醋酸曲普瑞林緩釋微球。
【背景技術】
[0002]醋酸曲普瑞林(Triptorelin)是人工合成的十肽，是天然GnRH(促性腺激素釋放激素)的類似物。研究表明，醋酸曲普瑞林長期使用可使促性腺激素分泌，從而抑制睪丸和卵巢的功能。醋酸曲普瑞林臨床上用于治療轉移性前列腺癌、性早熟、生殖器內外的子宮內膜異位癥。
[0003]根據醋酸曲普瑞林臨床適應癥的用藥特點，患者往往需要長期給藥，因此為了提高患者的順應性，被開發成長效緩釋制劑。常見的緩釋微球制備方法有溶劑蒸發法、相分離法和噴霧干燥法，其中溶劑蒸發法又包括水包油法、油包油法和復乳法。復乳法是目前制備水溶性多肽、蛋白質藥物微球最常用的方法，該法是將活性成分水溶液與乙交酯丙交酯共聚物(PLGA)有機溶液混合在一起打成初乳，該初乳投入到冷的含有乳化劑水溶液中固化形成微粒，過濾收集微粒干燥。但是突釋是采用復乳法制備水溶性藥物過程中最常見問題，如專利CN104010629中醋酸曲普瑞林微球突釋作用過大，會帶來很多副作用。而用復乳法制備醋酸曲普瑞林微球時，活性成分容易從球內部向外部擴散，在球的表面形成很多孔洞，大量空洞會導致突釋的產生并且微球本身會快速降解。處理突釋的常用方法是洗滌球外部，但是此做法會導致藥物的損失。由于醋酸曲普瑞林較為昂貴，因此采用洗滌的方法會使制藥成本大幅提升。
[0004]因此，需要對醋酸曲普瑞林微球生產工藝進行進一步優化工作，解決藥品突釋作用及提高微球表面的平滑度從而使得血藥濃度更加穩定平滑。
【發明內容】
[0005]本發明提供了一種醋酸曲普瑞林微球的制備方法，一方面能夠克服醋酸曲普瑞林微球由于突釋作用大導致的藥物不良反應增大的問題，另一方面使用該法制備的微球表面平滑，血藥濃度穩定，有利于長期用藥。
[0006]本發明涉及的一種醋酸曲普瑞林緩釋微球的制備方法，包括以下步驟:
[0007]步驟I)將醋酸曲普瑞林加水配成藥物溶液A ;將PLGA加有機溶劑配成溶液B ；
[0008]步驟2)將溶液A和溶液B混合超聲形成初乳，初乳加入到用有機混合溶劑飽和過的PVA水溶液中，均質乳化得復乳。
[0009]步驟3)將復乳室溫攪拌I小時后升溫至40°C?45°C保持I小時，再降溫至10°C，過篩收集顆粒，凍干。
[0010]具體地，步驟I)所述的藥物溶液A的濃度為35% -45%，溶液B的濃度為20% -30%，有機溶劑選自乙酸乙酯、苯甲醇混合溶液和二氯甲烷、苯甲醇混合溶液中的一種；
[0011]優選地，步驟I)中的乙酸乙酯和苯甲醇的體積比為2.5?7: I; 二氯甲烷和苯甲醇的體積比為2.5?7: 10
[0012]優選地，PLGA為 PLGA5050。
[0013]具體地，步驟2)中的PVA水溶液濃度為0.1 %?2.5 %。
[0014]優選地，PVA水溶液濃度為0.5%。
[0015]具體地，步驟2)中的有機混合溶劑為苯甲醇和乙酸乙酯，有機混合溶劑的濃度為1% -2% ；
[0016]優選地，苯甲醇和乙酸乙酯的體積比為1:1，苯甲醇濃度為1%，乙酸乙酯濃度為
[0017]具體地，步驟3)中的復乳室溫攪拌I小時后升溫至45°C保持I小時，再降溫至ΙΟ。。。
[0018]本發明的有益效果是:
[0019]I)本發明采用二氯甲烷/乙酸乙酯添加苯甲醇溶解PLGA的同時，外水相用有機溶劑飽和，能夠獲得突釋作用小、緩釋曲線平緩的醋酸曲普瑞林緩釋微球。
[0020]2)本發明采用降低復乳的固化速率的方式來降低醋酸曲普瑞林的擴散，同時在固化后期控制水溶液溫度在微球的玻璃化溫度以上，保持一定時間讓微球高分子骨架進行重排從而融合掉孔洞，使醋酸曲普瑞林微球表面光滑，解決因為大量空洞導致突釋的產生并且微球本身會快速降解的難題。
[0021]2)醋酸曲普瑞林緩釋微球載藥量大則會導致突釋作用明顯，本發明涉及的醋酸曲普瑞林微球的突釋較小，且載藥量達到最大。
[0022]3)本發明涉及的醋酸曲普瑞林微球制備工藝的固化步驟中通過控制固化速率和水溶液溫度，減少了最初的突釋作用，而常規處理突釋的方法是洗滌球外部，但是此做法會導致藥物的損失。在曲普瑞林價格昂貴的情況下，本發明涉及的醋酸曲普瑞林微球極大地降低了生產成本。
【附圖說明】
[0023]圖1:實施例1的醋酸曲普瑞林微球體外釋放曲線圖
[0024]圖2:實施例2的醋酸曲普瑞林微球體外釋放曲線圖
[0025]圖3:實施例1的孔洞連續完整的醋酸曲普瑞林微球掃描電鏡圖
[0026]圖4:實施例18的孔洞較大、不連續的醋酸曲普瑞林微球掃描電鏡圖
[0027]圖5:實施例19的有大量孔洞的醋酸曲普瑞林微球掃描電鏡圖
【具體實施方式】
[0028]以下通過實施例和試驗例來進一步說明本發明，但并不限于此。
[0029]實施例1:
[0030]稱取Ig醋酸曲普瑞林(瑞林Bachem公司，批號1209001)加水配成濃度為40%的藥物溶液，將8g PLGA5050用25ml乙酸乙酯和1ml苯甲醇溶解，將二者混合超聲2min，形成白色均質初乳。初乳在1500rpm的均質下通過注射器加入到6°C的100ml 0.5%的PVA溶液(含1%苯甲醇和1%乙酸乙酯)中，均質乳化2min得復乳。將復乳移至懸臂攪拌機上，轉速為600rpm，攪拌lh，然后升溫到45°保持I小時，再降低到10°篩網過濾，凍干得粉末狀微球。醋酸曲普瑞林微球的載藥量為10.3%, I天突釋為9%，微球孔洞連續完整，平穩釋放28天。
[0031]實施例2:
[0032]稱取Ig醋酸曲普瑞林(瑞林Bachem公司，批號1209001)加水配成濃度為40%的藥物溶液，將8g PLGA5050用23.5ml乙酸乙酯和3.3ml苯甲醇溶解，將二者混合超聲2min，形成白色均質初乳。初乳在1500rpm的均質下通過注射器加入到6°C的100ml 0.5%的PVA溶液(含1%苯甲醇和1%乙酸乙酯)中，均質乳化2min得復乳。將復乳移至懸臂攪拌機上，轉速為600rpm，攪拌lh，然后升溫到45°保持I小時，再降低到10°篩網過濾，凍干得粉末狀微球。醋酸曲普瑞林微球的載藥量為10.8%, I天突釋為8%，微球孔洞連續完整，平穩釋放28天。
[0033]實施例3:
[0034]稱取Ig醋酸曲普瑞林(瑞林Bachem公司，批號1209001)加水配成濃度為40%的藥物溶液，將8g PLGA5050用19ml乙酸乙酯和7.6ml苯甲醇溶解，將二者混合超聲2min，形成白色均質初乳初乳在1500rpm的均質下通過注射器加入到6°C的100ml 0.5%的PVA溶液(含1%苯甲醇和1%乙酸乙酯)中，均質乳化2min得復乳。將復乳移至懸臂攪拌機上，轉速為600rpm，攪拌lh，然后升溫到40°保持I小時，再降低到10°篩網過濾，凍干得粉末狀微球。醋酸曲普瑞林微球的載藥量為10.6 %，I天突釋為9 %，微球孔洞連續完整，平穩釋放28天。
[0035]實施例4:
[0036]稱取Ig醋酸曲普瑞林(瑞林Bachem公司，批號1209001)加水配成濃度為40%的藥物溶液，將8g PLGA5050用28.5ml乙酸乙酯和11.5ml苯甲醇溶解，將二者混合超聲2min，形成白色均質初乳。初乳在1500rpm的均質下通過注射器加入到6°C的1000ml 0.1%的PVA溶液(含1%苯甲醇和1%乙酸乙酯)中，均質乳化2min得復乳。將復乳移至懸臂攪拌機上，轉速為600rpm，攪拌lh，然后升溫到45°保持I小時，再降低到10°篩網過濾，凍干得粉末狀微球。醋酸曲普瑞林微球的載藥量為9.5%，I天突釋為10%，微球孔洞連續完整，平穩釋放28天。
[0037]實施例5:
[0038]稱取Ig醋酸曲普瑞林(瑞林Bachem公司，批號1209001)加水配成濃度為40%的藥物溶液，將8g PLGA5050用35ml乙酸乙酯和5ml苯甲醇溶解，將二者混合超聲2min，形成白色均質初乳。初乳在1500rpm的均質下通過注射器加入到6°C的1000ml 2.5%的PVA溶液(含1%苯甲醇和1%乙酸乙酯)中，均質乳化2min得復乳。將復乳移至懸臂攪拌機上，轉速為600rpm，攪拌lh，然后升溫到45°保持I小時，再降低到10°篩網過濾，凍干得粉末狀微球。醋酸曲普瑞林微球的載藥量為9.6 %，I天突釋為10 %，微球孔洞連續完整，平穩釋放28天。
[0039]實施例6:
[0040]稱取Ig醋酸曲普瑞林(瑞林Bachem公司，批號1209001)加水配成濃度為45%的藥物溶液，將8g PLGA5050用25ml乙酸乙酯和1ml苯甲醇溶解，將二者混合超聲2min，形成白色均質初乳。初乳在1500rpm的均質下通過注射器加入到6°C的1000ml 0.5%的PVA溶液(含1%苯甲醇和1%乙酸乙酯)中，均質乳化2min得復乳。將復乳移至懸臂攪拌機上，轉速為600rpm，攪拌lh，然后升溫到45°保持I小時，再降低到10°篩網過濾，凍干得粉末狀微球。醋酸曲普瑞林微球的載藥量為10.7%, I天突釋為9.9%，微球孔洞連續完整，平穩釋放28天。
[0041]實施例7:
[0042]稱取Ig醋酸曲普瑞林(瑞林Bachem公司，批號1209001)加水配成濃度為35%的藥物溶液，將8g PLGA5050用19ml乙酸乙酯和7.6ml苯甲醇溶解，將二者混合超聲2min，形成白色均質初乳初乳在1500rpm的均質下通過注射器加入到6°C的100ml 0.5%的PVA溶液(含1%苯甲醇和1%乙酸乙酯)中，均質乳化2min得復乳。將復乳移至懸臂攪拌機上，轉速為600rpm，攪拌lh，然后升溫到45°保持I小時，再降低到10°篩網過濾，凍干得粉末狀微球。醋酸曲普瑞林微球的載藥量為10.1 %，I天突釋為9 %，微球孔洞連續完整，平穩釋放28天。
[0043]實施例8:
[0044]稱取Ig醋酸曲普瑞林(瑞林Bachem公司，批號1209001)加水配成濃度為45%的藥物溶液，將8g PLGA5050用25ml乙酸乙酯和1ml苯甲醇溶解，將二者混合超聲2min，形成白色均質初乳。初乳在1500rpm的均質下通過注射器加入到6°C的100ml 0.5%的