一種同時快速檢測飼料中9種有害物質的檢測盤的制作方法
【技術領域】
[0001]本實用新型屬于食品安全檢測領域，具體涉及一種能同時對飼料中黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、伏馬毒素、嘔吐毒素、鹽酸克倫特羅、沙丁胺醇、萊克多巴胺、氯霉素和呋喃唑酮進行快速檢測的檢測盤，可用于食品安全中有害物質的檢測。
【背景技術】
[0002]霉菌毒素是農作物或動物性蛋白因霉菌而產生的有毒代謝產物，主要包括黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、伏馬毒素和嘔吐毒素等。食用受黃曲霉毒素BI污染的食品,會出現急性中毒。臨床表現以黃疸為主，并有嘔吐、厭食和發燒等癥狀。重癥者在2~3周后出現腹水、下肢水腫，甚至死亡，死亡前出現胃腸道出血。玉米赤霉烯酮對人類具有生殖發育毒性、免疫毒性、肝臟毒性等。伏馬毒素對人不僅是一種促癌物，而且完全是一種致癌物。人在誤食被該嘔吐毒素污染的糧谷類后可以產生廣泛的毒性效應，如導致厭食、嘔吐、腹瀉、發燒、站立不穩、反應遲鈍等急性中毒癥狀，嚴重時損害造血系統造成死亡。霉菌毒素幾乎存在所有的人類食品原料和飼料原料中，它造成的危害是一個全球性的問題，因此，霉菌毒素的檢測對人類健康具有重大意義。
[0003]鹽酸克倫特羅、沙丁胺醇和萊克多巴胺都是腎上腺類神經興奮劑，又俗稱“瘦肉精”，能促進瘦肉的生長和抑制動物脂肪的生長。但如果作為飼料添加劑，使用劑量是人用藥劑量的10倍以上，才能達到提高瘦肉率的效果。它用量大、使用的時間長、代謝慢，所以在屠宰前到上市，在豬體內的殘留量都很大。這個殘留量通過食物進入人體，就使人體漸漸地中毒，積蓄中毒。如果一次攝入量過大，就會產生異常生理反應的中毒現象，因此而被禁用。但是，國內一些養豬戶為了追求自身利益，提高豬肉的瘦肉率，在飼料中摻入鹽酸克倫特羅、沙丁胺醇、萊克多巴胺等“瘦肉精”，從而導致肉類食品出現安全危機，直接影響到廣大消費者的身體健康，因此對豬肉中鹽酸克倫特羅、沙丁胺醇和萊克多巴胺的含量是否超標進行檢測具有非常重大的意義。
[0004]氯霉素通過抑制細菌蛋白合成而發揮抑菌作用，對大多數細菌有效。但其具有抑制骨髓造血功能、導致灰嬰綜合癥等副作用，世界各國明令禁止使用。呋喃唑酮是人工合成的光譜抗生素，有非常好的抗菌作用，但近來的科學研究表明，該藥可使實驗動物發生癌癥和基因突變，因此，國家規定禁止在食用動物中添加。以上表明，我們必須對食品中的氯霉素和呋喃唑酮進行檢測。
[0005]目前，對上述幾種有害殘留的的診斷方法主要有氣相色譜-質譜法(GC-MS)、高效液相色譜法(HPLC)等方法。但是由于氣相色譜-質譜法、高效液相色譜法等需要的儀器價格高昂，檢測過程繁瑣、需要專業從事人員操作，不易于在基層的推廣。因此，上述兩種方法在使用中受到很大的限制。
【實用新型內容】
[0006]本實用新型的目的在于提供一種操作方便、快速、有效且能同時快速檢測飼料中黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、伏馬毒素、嘔吐毒素、鹽酸克倫特羅、沙丁胺醇、萊克多巴胺、氯霉素和呋喃唑酮的檢測盤。
[0007]為了實現上述目的，本實用新型采用如下技術方案:
[0008]一種同時快速檢測飼料中9種有害物質的檢測盤，包括盤體，所述盤體由上盤體和下盤體固定連接而成，所述上盤體中央有一個圓形加樣孔，加樣孔底部設有一個圓形樣品墊I，所述下盤體分為3個區域，分別為檢測區I，檢測區II和檢測區III，所述的3個檢測區分別用隔板隔開，其中檢測區I為霉菌毒素類檢測區，包括黃曲霉毒素BI檢測試紙條、玉米赤霉烯酮檢測試紙條、伏馬毒素檢測試紙條和嘔吐毒素檢測試紙條；檢測區II為瘦肉精類檢測區，包括鹽酸克倫特羅檢測試紙條、沙丁胺醇檢測試紙條和萊克多巴胺檢測試紙條；檢測區III為抗生素類檢測區，包括氯霉素檢測試紙條和呋喃唑酮檢測試紙條，所有檢測試紙條共用樣品墊I，且圍繞樣品墊I呈放射性環形陣列，每個檢測試紙條的兩側用卡條固定。
[0009]所述的每種檢測試紙條均由底板、樣品墊I1、涂覆膠體金顆粒標記抗體的玻璃纖維膜、包被膜和吸水紙組成，其中，包被膜粘貼在底板上面，在該包被膜兩端的上面分別粘貼涂覆膠體金顆粒標記抗體的玻璃纖維膜和吸水紙，在該涂覆膠體金顆粒標記抗體的玻璃纖維素膜遠離包被膜的一端的上面粘貼樣品墊II，在所述包被膜的上面設有檢測線和質控線，每種檢測試紙條的吸水紙位于所述環形陣列的徑向外端。
[0010]所述盤體材料為PVC材料，所述樣品墊I直徑比加樣孔直徑大1mm。
[0011]黃曲霉毒素BI檢測試紙條玻璃纖維膜為涂覆膠體金顆粒標記抗黃曲霉毒素BI抗體，檢測線上包被黃曲霉毒素Bl-BSA偶聯物；玉米赤霉烯酮檢測試紙條玻璃纖維膜為涂覆膠體金顆粒標記抗玉米赤霉烯酮抗體，檢測線上包被玉米赤霉烯酮-BSA偶聯物；伏馬毒素檢測試紙條玻璃纖維膜為涂覆膠體金顆粒標記抗伏馬毒素抗體，檢測線上包被伏馬毒素-BSA偶聯物；嘔吐毒素檢測試紙條玻璃纖維膜為涂覆膠體金顆粒標記抗嘔吐毒素抗體，檢測線上包被嘔吐毒素-BSA偶聯物；鹽酸克倫特羅檢測試紙條玻璃纖維膜為涂覆膠體金顆粒標記抗鹽酸克倫特羅抗體，檢測線上包被鹽酸克倫特羅-BSA偶聯物；沙丁胺醇檢測試紙條玻璃纖維膜為涂覆膠體金顆粒標記抗沙丁胺醇抗體，檢測線上包被沙丁胺醇-BSA偶聯物；萊克多巴胺檢測試紙條玻璃纖維膜為涂覆膠體金顆粒標記抗萊克多巴胺抗體，檢測線上包被萊克多巴胺-BSA偶聯物；氯霉素檢測試紙條玻璃纖維膜為涂覆膠體金顆粒標記抗氯霉素抗體，檢測線上包被氯霉素-BSA偶聯物；呋喃唑酮檢測試紙條玻璃纖維膜為涂覆膠體金顆粒標記抗呋喃唑酮抗體，檢測線上包被呋喃唑酮-BSA偶聯物，上述所有檢測試紙條質控線上均包被抗鼠抗體。
[0012]所述包被膜為硝酸纖維素膜。
[0013]以上用到的抗黃曲霉毒素BI抗體、抗玉米赤霉烯酮抗體、抗伏馬毒素抗體、抗嘔吐毒素抗體、抗鹽酸克倫特羅抗體、抗沙丁胺醇抗體、抗萊克多巴胺抗體、抗氯霉素抗體和抗呋喃唑酮抗體均為高純度的單克隆抗體，可用該領域內的常規方法制備而成。
[0014]本實用新型采用競爭性免疫層析法的原理，通過對金標記抗體pH值、濃度以及包被膜上抗原濃度的調整，使其能夠產生特異性條帶，從而滿足檢測機構、農戶、基層以及個人對食品中黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、伏馬毒素、嘔吐毒素、鹽酸克倫特羅、沙丁胺醇、萊克多巴胺、氯霉素和呋喃唑酮檢測的需求。
[0015]本實用新型在對一份樣品進行檢測時，能同時檢測出該樣品是否含有黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、伏馬毒素、嘔吐毒素、鹽酸克倫特羅、沙丁胺醇、萊克多巴胺、氯霉素和呋喃唑酮。其具有特異性好、靈敏度高、檢測速度快等優點，且不需要特殊儀器設備、操作簡單，能廣泛地用于農戶、基層以及個人對于飼料中上述9中有毒有害殘留的檢測。
【附圖說明】
[0016]圖1為本實用新型所述檢測盤上盤體的俯視圖:圖中I為上盤體,2為加樣孔；
[0017]圖2為本實用新型所述檢測盤下盤體的俯視圖:圖中3為下盤體，4為樣品墊I，5為黃曲霉毒素BI檢測試紙條，6為玉米赤霉烯酮檢測試紙條，7為伏馬毒素檢測試紙條，8為嘔吐毒素檢測試紙條，9為鹽酸克倫特羅檢測試紙條，10為沙丁胺醇檢測試紙條，11為萊克多巴胺檢測試紙條，12為氯霉素檢測試紙條，13為呋喃唑酮檢測試紙條，14為隔板，15為卡條;
[0018]圖3為圖2中一種檢測試紙條的側面結構示意圖，以黃曲霉毒素BI檢測試紙條5做具體說明如下:圖中16為底板，17為樣品墊II，18為涂覆膠體金顆粒標記抗黃曲霉毒素BI抗體的玻璃纖維膜，19為包被膜，20為吸水紙；
[0019]圖4為圖3的俯視圖:圖中21為質控線，22為檢測線；
[0020]圖5為圖2中黃曲霉毒素BI檢測試紙條的陽性結果示意圖(即包被膜19表面的質控線21顯紅色，檢測線22不顯色)；
[0021]圖6為圖2中黃曲霉毒素BI檢測試紙條的陰性結果示意圖(即包被膜19表面的質控線21和檢測線22均顯紅色)；
[0022]圖7為圖2中黃曲霉毒素BI檢測試紙條的無效結果示意圖(即包被膜19表面的質控線21和檢測線22均不顯色)。
【具體實施方式】
[0023]下面結合附圖對本實用新型做進一步詳細說明，但本實用新型的保護范圍不限于此。
[0024]如圖1、圖2、圖3