一種檢測實驗鼠懷孕的裝置及方法
【技術領域】
[0001] 本發明屬于實驗動物妊娠診斷技術和免疫學技術領域，具體涉及一種檢測實驗鼠 懷孕的裝置及方法。
【背景技術】
[0002] 實驗動物是從事科學研究、教學、生產、檢測及其科學實驗的動物，被廣泛應用于 生物醫學、醫藥研發、教學實驗、生物檢測等方面，在生命科學研究中起著非常重要的作用。 因為小鼠和人的基因相似度有99%，且小鼠和大鼠的繁殖和飼養均相對廉價，繁殖迅速。目 前，每10只實驗動物中有大約9只是小鼠或大鼠，應用領域包括免疫學、腫瘤學、生理學。病 理學、胚胎學和毒理學等，而且在神經科學中的應用也在不斷增多，實驗鼠也成了實驗動物 的代名詞。
[0003] 實驗鼠的繁殖是實驗動物生產和實驗過程的關鍵。在實驗鼠繁殖過程中，懷孕天 數和妊娠時間是確定實驗鼠分籠飼喂時間和實驗孕鼠制備的決定性因素。準確的妊娠診斷 可以使實驗動物生產廠家和研究人員掌握準確的妊娠時間，更合理有效的安排飼養空間， 并進一步減少漏檢提高實驗動物的利用率，并減少飼養成本。目前常用的實驗鼠妊娠的診 斷方法有陰栓目測檢測法和陰道精子涂片檢查法。
[0004] (1)陰栓檢測法：陰栓是老鼠在交配4-5min后形成的一種白色漿液性物質，堵塞在 陰道至子宮頸的腔內，陰栓一般在交配后12_24h自動脫落。陰栓檢測法就是在老鼠合籠后 次日清晨把是否檢查到陰栓作為其交配和妊娠的標志，目前主要通過目測和探測來確定。 目測就是直接用眼睛觀察，探測需要持探測棒輕觸老鼠陰道口，如有明顯抵觸感則表明有 陰栓，如無抵觸感且探測棒可無阻力的插入則無陰栓。該方法簡單方便，但由于老鼠陰栓大 小不一，大則凸出于陰道口易于觀察，而小則在子宮頸內，需要翻開陰道口仔細檢查，因此 僅靠目測很難確診，且漏檢的幾率也很大，使得飼養成本提高，造成了生產浪費。探測檢查 用的探測棒大都自制，探測過程中易對雌鼠產生較大刺激。由漏檢所導致的孕鼠和初生的 小鼠因無法確定相關指標，也必須處理，在動物倫理方面也存在消極影響。
[0005] (2)陰道精子涂片檢查法:在老鼠合籠后次日清晨將沾有生理鹽水的棉簽輕柔旋 入雌鼠的陰道，旋轉一圈后拿出，再將棉簽涂片，巴氏染色鏡檢。該方法雖然準確性較高，但 程序繁瑣。在實際大規模生產和實驗過程中，因動物數量較多，需耗費大量時間，并不實用。
【發明內容】
[0006] 為了解決現有條件下不能快速簡單而準確檢測的不足，本發明設計提供一套全面 快速的檢測方法，具有攜帶方便、檢測快速準確、操作簡單的特點。
[0007] 實現本發明目的的技術方案是：
[0008] -種檢測實驗鼠懷孕的裝置，包括中空的檢測盒、探測棒、滑動開關、膠體金試紙 條和觀測窗，所述的探測棒收納于檢測盒內，檢測盒上開有探測棒出口，探測盒側壁上開有 滑動槽，滑動開關設于探測盒側壁外并穿過滑動槽固定在探測棒上，探測棒由滑動開關控 制進出，所述的膠體金試紙條固定于檢測盒內，膠體金試紙條最前端的樣品接觸端頭伸出 至檢測盒外，膠體金試紙條包括吸收墊、硝酸纖維素膜、膠體金墊、樣品墊、pH試紙層和PVC 底板，所述硝酸纖維素膜上設有檢測線和質控線，所述的樣品墊樣作為樣品接觸端頭設在 膠體金試紙條最前端，膠體金墊、硝酸纖維素膜和吸收墊再自前向后依次粘貼在PVC底板 上，所述的pH試紙層連接在吸收墊中段，檢測盒上開有觀測窗，所述的觀測窗開設于膠體金 試紙條的檢測線、質控線和pH試紙層的上方，所述的膠體金墊包被有膠體金標記的能識別 鼠精子抗原的鼠抗精子抗體，所述檢測線包被有鼠抗精子抗體包被原，所述質控線包被有 山羊抗鼠 IgG。
[0009] 所述的一種檢測實驗鼠懷孕的裝置，所述的能識別鼠精子抗原的鼠抗精子抗體是 提取于免疫性不育小鼠精液。
[0010] 所述的一種檢測實驗鼠懷孕的裝置，還包括試紙保護蓋，試紙保護蓋蓋在檢測盒 上，以保護伸出至檢測盒外的膠體金試紙條，且試紙保護蓋與探測棒出口處于檢測盒相反 的兩端。
[0011] 所述的一種檢測實驗鼠懷孕的裝置，還包括試紙固定突起，所述的試紙固定突起 為中空的棱臺體，試紙固定突起固定在伸出至檢測盒外的膠體金試紙條處，膠體金試紙條 從試紙固定突起的上底面伸出。
[0012] -種檢測實驗鼠懷孕的方法，利用如權利要求1-4任一所述的裝置，包括以下步 驟：
[0013] 步驟1:首先查看待測母鼠陰部有無肉眼可見的陰栓，有則完成檢測并判斷為懷 孕，否則伸出裝置上的探測棒，對待測母鼠陰部內部進行探測，若有阻塞感則判斷為有陰 栓，完成檢測并判斷為懷孕，否則執行步驟2;
[0014] 步驟2:往待測雌鼠陰道內插入檢測試紙，并將試紙檢測接觸端頭與待測母鼠陰道 內部分泌物充分接觸，然后讀取試紙上顯示的結果，若檢測PH值呈中性，PH試紙為褐色，并 發生抗精子抗體免疫反應即免疫試紙條呈現兩條紅色指示線，則為強陽性，判斷為懷孕;若 檢測PH值呈弱酸性，PH試紙為紅色或橙色，且發送抗精子抗體免疫反應免疫試紙條呈現兩 條紅色指示線則為陽性，判斷為懷孕;若檢測PH值呈中性，PH試紙為褐色，未發生免疫反應 則為假陽性，判斷為未懷孕;若檢測PH值呈弱酸性，PH試紙為紅色或橙色，未發生免疫反應 則為陰性，判斷為未懷孕。
[0015]本發明的技術效果在于，本發明采用探測法、膠體金試紙法與PH值測定法三種方 法結合的評價體系。并開發出一種新的膠體金試紙與探測結合裝置。
[0016]膠體金免疫層析技術是新型免疫測定技術，主要用于檢測各類疾病。該技術可以 減少分析時間和樣品采集量、提高檢測靈敏度和準確度。鼠抗精子抗體(AsAb)是免疫性不 育的雄鼠產生的一種病理性抗體，它可以與精子抗原結合。當雄鼠與雌鼠交配射精后，會在 雌鼠陰道內殘留大量精液，精液中含有大量精子抗原。本發明通過該原理，提出一種利用抗 精子抗體與精子抗原結合的定性檢測方法對實驗鼠進行妊娠診斷。
[0017]正常雄鼠的精液PH值范圍在6.4-7.5,呈中性，然而在發情期，雌鼠陰道內乳桿菌 含量表達增高，使陰道內環境PH值降低，范圍在5.6-4.5,呈弱酸性。因此，當雄鼠與母鼠進 行交配射精后，精液與陰道內環境液體會有PH值中和的作用，PH值會發生變化。本發明通過 這一原理，在檢測試紙上同時對PH值進行檢測。進一步驗證雌鼠妊娠的準確性。
[0018] 檢測時，若陰道內殘留有精子抗原，檢測線不會形成紅色沉淀線，質控線上，形成 紅色沉淀線;若陰道內殘留無精子抗原，檢測線和質控線上均形成紅色沉淀線。
【附圖說明】
[0019] 圖1為本發明裝置的結構示意圖；
[0020] 圖2為試紙條的結構示意圖；
[0021 ]其中1為探測棒;2為滑動開關;3為試紙保護蓋;4為膠體金試紙條;5為試紙固定突 起;6為讀數顯示屏；7為試紙接觸端頭;8為滑動槽;9為吸收墊；10為PVC底板；11為膠體金 墊;12為檢測線；13為質控線；14為硝酸纖維素膜;15為PH試紙層;16為吸收墊。
【具體實施方式】
[0022] 下面結合實施例說明本發明，這里所述實施例的方案，不限制本發明應用范圍。
[0023] 本實施例的裝置包括中空的檢測盒、探測棒、滑動開關、膠體金試紙條和觀測窗， 探測棒收納于檢測盒內，檢測盒上開有探測棒出口，探測盒側壁上開有滑動槽，滑動開關設 于探測盒側壁外并穿過滑動槽固定在探測棒上，探測棒由滑動開關控制進出，膠體金試紙 條固定于檢測盒內，膠體金試紙條最前端的樣品接觸端頭伸出至檢測盒外，膠體金試紙條 包括吸收墊、硝酸纖維素膜、膠體金墊、樣品墊、pH試紙層和PVC底板，所述硝酸纖維素膜上 設有檢測線和質控線，樣品墊樣作為樣品接觸端頭設在膠體金試紙條最前端，膠體金墊、硝 酸纖維素膜和吸收墊再自前向后依次粘貼在PVC底板上，pH試紙層連接在吸收墊中段，檢測 盒上開有觀測窗，觀測窗開設